(高清版)GB∕T 44214-2024 蚕丝中非蚕丝蛋白物质含量试验方法

ICS59.080.01蚕丝中非蚕丝蛋白物质含量试验方法2024-07-24发布2025-02-01实施I 1 13术语和定义 14原理 15试剂和材料 16仪器和设备 2 27.1标准溶液配制 27.2缓冲液配制 27.3样品前处理 37.4衍生化操作 3 37.6测定 38结果计算与表示 4 4 5 5 5附录A(资料性)四种氨基酸化合物信息 6Ⅲ1蚕丝中非蚕丝蛋白物质含量试验方法本文件适用于通过测定蚕丝中四种主要氨基酸(丝氨酸、甘氨酸、丙氨酸和酪氨酸)含量计算蚕丝下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用2GB/T44214—20245.8三乙胺-乙腈溶液(1mol/L):移取1.4mL三乙胺于10mL容量瓶中，用乙腈定容至刻度，5.10氮气：纯度为99.99%。5.11氨基酸标准物质：丝氨酸(Ser)、甘氨酸(Gly)、丙氨酸(Ala)和酪氨酸(Tyr),化合物信6.2高效液相色谱仪(HPLC):6.9恒温干燥箱：能控制温度在110℃±2℃。6.12水浴锅：能控制温度在55℃±2℃。称取附录A所列各氨基酸标准品适量(精确至0.01mg),用水溶解，分别配制成质量浓度约为分别准确移取1mL标准储备液置于10mL容量瓶中，用水稀释定容至刻度，混匀，即得到第一份混合标准液。将第一份混合标准液用水逐级稀释，制成总共5个不同浓度的系列混合标准工作液。5个浓度的混合标准工作液中各氨基酸质量浓度分别为10mg/L、20mg/L、40mg/L、80mg/L磷酸缓冲液(10mmol/L,pH=6.9):移取0.68mL磷酸溶液(5.12)于1000mL容量瓶中，用水37.3.1.3取出试样瓶，冷却至室温，过滤后移取1mL水解液，在旋转蒸发器(6.11)或水浴锅(6.12)7.3.2.1取待测样品1g,按GB/T9995规定烘超声处理2min,放置冰水(0℃)混合物中冷冻5min,抽真空通入氮气3次后密封，并放置于7.3.2.3取出试样瓶，冷却至室温，过滤后移取1mL水解液，在旋转蒸发器(6.11)或水浴锅(6.12)0.45μm有机相微孔滤头过滤(5.14),再进样分析。做两个平行试样。4GB/T44214—2024时间min流动相A%133作液(7.1.2),按照7.4衍生化操作。衍生化完毕后，注入高效液相色谱仪进行测定，分别得到四种氨分析经过前处理(7.3)和衍生化(7.4)制备的试样，测定试样中各氨基酸色谱峰面积，由标准工作曲线(7.6.2)计算试样中各氨基酸的浓度。按公式(1)计算各氨基酸的含量：所测四种氨基酸的总含量按公式(2)计算：5非蚕丝蛋白物质含量按公式(3)计算：K——修正系数，88(桑蚕丝)或81(柞蚕丝)。互独立进行的测试获得的两次氨基酸总量的测试结果的绝对差值不大于这两个测定值的算术平均值的5%,以大于5%的情况不超过5%为前提。c)测试结果(四种氨基酸在试样中的含量、非蚕丝蛋白物质含量);6(资料性)A.1四种氨基酸化合物信息见表A.1。序号中文名称英文和简写分子式相对分子质量1丝氨酸56-45-1C₃H₇NO₃2甘氨酸Gly56-40-6C₂H₅NO₂75.073丙氨酸Ala56-