甘草酸制剂的研发及应用进展

甘草酸制剂的研发及应用进展主要内容2肝损伤的治疗原则3甘草酸制剂的研究进展及应用

1肝损伤常见的病因及其特征一、肝损伤常见的病因及主要特征常见肝损害的病因

病毒性肝损害

药物性肝损害

酒精性肝损害

脂肪性肝炎

自身免疫性肝损害

其他（手术创伤、遗传代谢、休克等）病毒性肝炎：检测病毒标志，如：病毒抗原、特异性抗体、病毒核酸等酒精性肝病：排除病毒性肝炎；有长期大量饮酒史；GGT通常较高；AST升高明显脂肪性肝病：排除病毒性肝炎；常合并代谢综合征的其他表现，B超、CT有重要诊断价值肝功能异常的病因诊断及特征中毒性肝病（药物、有毒物质）：有服药史和有毒物质接触史；可合并其他脏器损伤自身免疫性肝病：女性多见；通常伴有其他自身免疫性疾病；自身抗体阳性；包括：AIH、PBC、PSC肝功能异常的病因诊断及特征遗传代谢性肝病：肝豆状核变性、血色病等外科性疾病：胆道炎症、结石、肿瘤、术后静脉高价营养严重全身感染性：严重感染的证据肝脏严重缺血：右心衰、休克不明原因的肝病：5％—10%，肝活检的意义？肝功能异常的病因诊断及特征二、肝损伤的治疗原则病毒性肝炎酒精性肝病药物性肝病肝纤维化肝硬化炎症反应肝癌细胞异常增生，基质增加对因治疗肝细胞膜损伤非酒精性脂肪肝脂质代谢紊乱能量代谢紊乱肝细胞坏死自由基损伤肝病发展的不同阶段及治疗重点保肝药物作用靶点对症治疗抗纤维化抗硬化抗癌治疗抗病毒戒酒、导致肝损害的药物停药、改变生活习惯、加强运动抗炎保肝治疗的地位

肝脏炎症坏死及其所致的肝纤维化是疾病进展的主要病理学基础。如能有效抑制肝组织炎症，有可能减少肝细胞破坏和延缓肝纤维化的发展甘草酸制剂、水飞蓟素类等制剂活性成分比较明确，有不同程度的抗炎、抗氧化、保护肝细胞膜及细胞器等作用，临床应用这些制剂可改善肝脏生化学指标对于ALT升高者或肝组织学明显炎症坏死者，在抗病毒治疗的基础上可适当选用抗炎保肝药物《慢性乙型肝炎防治指南》中华肝脏病和中华感染病学会，2005.12

《脂肪肝防治指南》推荐使用甘草酸制剂、磷酯酰胆碱等中西药物；不主张单独使用五味子类药物降低血清转氨酶。一般选用1-2种保肝药物，疗程半年以上，或用至血清转氨酶复常或肝活检提示脂肪性肝病消退为止。1.立即停用有关药物和可疑药物;2.促进药物清除和应用解毒剂;3.抗炎、抗氧化、肝细胞保护剂4.免疫抑制剂治疗：强的松

药物性肝损伤的治疗

预防性使用“保肝”药的几个特殊情况

1.抗肿瘤化疗，尤其是大剂量使用化疗药物；

2.抗结核化疗，尤其是多个品种联合使用；

3.器官移植后使用抗排异药物；

4.长期使用降糖药；

5.长期使用治疗甲亢的药物。

三、甘草酸制剂的研究进展认识甘草

甘草为豆科，多年生草本。主根长而粗壮外皮红褐色，味甜。茎稍带木质，小枝有棱，羽状复叶。花冠蝶形，紫红色。荚果镰刀状或环状。花期6～7月，果期7～9月。生于向阳干燥的钙质草原及河岸沙质土壤；喜干燥，耐寒。产中国西北、东北和华北认识甘草

《神农本草经》记载，甘草根是常用的中药，可减低或缓解其他药物的偏性、毒性，具辅助、协调、矫味作用。甘草根性平、味甘，具补脾、润肺、解毒、调和诸药的功能。主治脾虚食少，胃、十二指肠溃疡、咳嗽、支气管炎等。甘草的秘密——天然甘草酸

甘草酸是甘草的主要药理成份

由一分子甘草苦质酸和二分子葡萄糖醛酸组成

甘草酸制剂具有多种药理作用明确的多种保肝作用广泛应用于各类肝损伤治疗

甘草酸制剂多种肝细胞保护机制Ref:吴锡铭反式甘草酸铵盐的研究郝飞甘草酸国外研究进展；李开龙甘草酸与肾脏和肾脏疾病抗炎2直接与激素受体结合发挥抗炎作用3抑制炎症物质的产生甘草酸制剂的抗炎作用机制抑制肝脏糖皮质激素代谢1Refer：陈尉华.国际消化病杂志.2006.218α－甘草酸抗炎作用1、抑制肝脏内糖皮质激素代谢内源性糖皮质激素Δ4-5-β还原酶代谢失活竞争性结合Refer：陈尉华.国际消化病杂志.2006.2甘草酸制剂对血浆激素水平的影响研究方法：治疗组46名肝病患者（包括慢性活动性肝炎患者36例）受检者无肾上腺、垂体疾病，也未用过糖皮质激素类药物治疗组给予甘草酸制剂150mg/d，连续15日于用药前一日和用药后第十五日抽取血样ug/dlP<0.01有显著性差异用药前16.9用药后24.5051015202530血浆中激素浓度对比Refer：孙慧玲.中国中西医结合杂志.1997.6

18α体分子结构中D／E－环为反式构型与泼尼松龙(prednisolone)相似，易与类固醇激素的靶细胞受体结合发挥抗炎作用18α体甘草酸激素受体抗炎Refer：吴锡铭.中国药理学报.1992.7

2、直接与激素受体结合发挥抗炎作用花生四烯酸（AA）环氧合酶脂氧酶炎症介质白三烯PGs甘草酸3、抑制炎症物质的产生Refer：高章圈；解放军药学学报1999年10月

甘草酸可参与细胞免疫，抑制肝脏非特异性炎症，作用优于β体甘草酸Ref:18H差向异构体对慢性肝损伤小鼠花生四烯酸代谢的影响。

茹仁萍，吴锡铭，方红英甘草酸药物研究，2001，10（9）：29

*p<0.01

甘草酸制剂有多种肝细胞保护机制抗脂质过氧化甘草酸可升高D-GalN引起急性肝损伤小鼠肝组织中超氧化物歧化酶(SOD)的含量U/mgprot

n=10，**p<0.01与病理模型组比较

**p<0.01天晴甘美可降低D-GalN引起急性肝损伤小鼠

NOS的含量

n=10，*p<0.05与病理模型组比较

*p<0.05

甘草酸制剂有多种肝细胞保护机制解毒、抗肝脏毒物甘草酸治疗药物性肝病药物性肝损害的主要原因就是毒性反应，而我国自古以来就有甘草解百毒的说法。现在临床上常用甘草酸类药物治疗药物性肝损害。甘草酸类解毒的主要机制就是其通过对肝脏内酶系的作用从而减少毒物生成，增加毒物排泄。Refer：杨静药学学报200136（5）CYP2E1前体毒物催化毒性产物CYP1A1前致癌物活化致癌物甘草酸对P450中某些酶的抑制作用Refer：杨静药学学报200136（5）甘草酸制剂Ⅱ相酶Ⅱ相酶Ⅱ相酶甘草酸增加Ⅱ相酶的活性毒物毒物毒物毒物毒物毒物水溶性复合物

排泄出体外Refer：杨静药学学报200136（5）甘草酸制剂

甘草酸高水溶性代谢物第一相反应（氧化）第二相反应（结合）脂溶性药物水溶性代谢产物P450细胞色素氧化酶葡萄糖醛酶谷胱甘肽（GSH）抑制P450家族部分酶活性增强谷胱甘肽还原酶活性诱导内源性GSH甘草酸药物释出酶类大分子蛋白共价结合肝细胞P450亲电子基团自由基氧自由基（O2）

膜破坏

释出溶酶体酶损害肝细胞结构和功能Ca++自稳抗制膜泵系统线粒体细胞骨架破坏细胞死亡

药物直接肝毒性稳定细胞膜改善细胞炎性病变稳定细胞器膜恢复细胞功能改善细胞代谢促进解毒功能

甘草酸制剂有多种肝细胞保护机制Ref:吴锡铭反式甘草酸铵盐的研究郝飞甘草酸国外研究进展；李开龙甘草酸与肾脏和肾脏疾病抗肝纤维化抗纤维化反复炎症肝星状细胞激活抑制胶原酶胶原合成增加胶原降解减少细胞外基质（ECM）合成增加降解减少Refer：朱蔚岗实用肝脏病杂志200412

李东实用肝脏病杂志20036

刘流临床麻醉学20011抑制炎症抑制肝星细胞活化提高胶原酶活性促进胶原降解减少纤维组织生成肝脏纤维化逆转纤维化：抗纤维化疗效反映肝纤维化的的血清学指标血清透明质酸(HA)Ⅲ型前胶原(PCⅢ)

经甘草酸二铵治疗后,患者HA和PCⅢ水平明显降低。Refer:许伟华.中国新药与临床杂志2003年6月,第22卷第6期.研究方法住院治疗的慢性肝炎病人200例，分为2组,A组45例，B组155例。A组用门冬氨酸钾镁20ｍＬ/d，B组给予甘草酸制剂（300mg/d）治疗，疗程为6周,后改为口服药治疗8ｗ于治疗前及治疗结束时用放免法检测HA,PCⅢ浓度。Refer:许伟华.中国新药与临床杂志2003年6月,第22卷第6期.两组患者HA,PC血浆浓度下降对比ug/l

Refer:许伟华.中国新药与临床杂志2003年6月,第22卷第6期.A,B组治疗后前相比,经t检验:均

P<0.01甘草酸组与门冬氨酸组相比,经t检验:e

P<0.05,fP<0.01均有显著性差异甘草酸制剂对血清ECM的影响现已公认检测血清细胞外基质（ECM）可以较准确地了解肝细胞损伤情况和判断肝纤维化程度。经研究甘草酸类药物可明显降低血清ECM浓度，具有一定的抗纤维化作用。Refer：李晓鸥.中国新药与临床杂志,2001年5月,第20卷第3期研究方法70例肝炎病人按入院时间先后顺序随机分成2组。甘草酸二铵组41例，静脉注射150mg/d，甘草酸单铵组29例，静注200mg/d。疗程30天，于治疗首日和末日静脉采血测定ECM的4个项目:Ⅳ型胶原(CⅣ)、透明质酸(HA)、板层素(LN)、Ⅲ型前胶原肽(PⅢP)Refer：李晓鸥.中国新药与临床杂志,2001年5月,第20卷第3期ECM下降值Refer：李晓鸥.中国新药与临床杂志,2001年5月,第20卷第3期ug/l2组治疗前后配对比较,经t检验:cP<0.01。2组治疗后组间比较,经t检验,d

P>0.05,e

P<0.05,f

P<0.01。均有显著性差异甘草酸制剂发展史

不断探索，不断提高

甘草酸粗提混合物以普通甘草酸单铵盐为主的混合复方制剂普通甘草酸混悬体二铵为主普通甘草酸单铵美能甘利欣异甘草酸镁第一代第二代第三代第四代甘草酸二铵脂质复合物天晴甘平

甘草酸制剂的研发历程第一代甘草酸制剂

1945年：荷兰学者Revers

首先报道甘草治疗胃溃疡有良效

1948年：甘草酸是甘草的有效成分被发现，经过吸附提取，制成甘草甜素片和针，成为第一代甘草酸制剂

60年代初：英国发明甘珀酸钠，广泛用于治疗胃溃疡第二代甘草酸制剂1988年：经过进一步化学及制剂研究及改进，复方甘草酸苷在中国上市

主要成份是普通甘草酸单铵盐

用于肝炎及皮肤病治疗

疗效较好第三代甘草酸制剂

1994年：第三代甘草酸制剂（普通甘草酸二铵盐，甘利欣

）问世，以后有了不同的剂型，在我国临床应用十分广泛。α体甘草酸与β体甘草酸的

比较研究

α体和β体甘草酸的结构

α体和β体的溶解与吸收抗炎作用比较不良反应

α体和β体甘草酸的体内器官分布

α体和β体甘草酸的急性毒性α体和β体甘草酸的结构甘草酸根据分子构向的不同α和β两种异构体,主要形成α体二铵盐和β体单铵盐OOOOOHHHOHOHHHCOHHHCHOHHOHOOOOHHH3CCH3CH3HCH3CH3CH3CCH3OHHOHHα体β体ABCDEA、B、C、D、E表示不同的环平面α体和β体甘草酸的构效关系α体结构中Ｄ/Ｅ环为反式构型，不但可以抑制肝脏δ4-5-β还原酶；而且可直接与类固醇激素的靶细胞结合；二胺盐可提高GL转化为GA的比率而β体只能抑制肝脏δ4-5-β还原酶，不能直接与类固醇激素的靶细胞结合；导致：α体抗炎作用远大于β体.Ref：李开龙唐应忠张建国甘草酸与肾脏和肾脏疾病《国外医学》泌尿系统分册2001年第21卷1期30-2

α体甘草酸对肝脏δ4-5-β还原酶的抑制作用明显高于复方甘草酸苷两种甘草酸对皮质醇代谢的影响α体甘草酸比β体甘草酸具有更强的抗炎保肝作用α体比β体甘草酸更具有肝脏靶向性α体和β体甘草酸的溶解与吸收α体极性低，脂溶性高

β体的极性较高，脂溶性较差。α甘草酸二铵的消化道吸收好于β体甘草酸单铵

甘草酸的主要不良反应来源于对肾11-β-羟基类固醇脱氢酶（11β-OHSD）的抑制作用

α甘草酸对肾11βＯＨＳＤ的作用很弱临床应用α甘草酸制剂出现的不良反应率低于β甘草酸制剂Ref:Van-RossumTG,De-JongFH,HopWC,etc.Pseudo-aldosteronism'inducedbyintravenousglycyrrhizintreatmentofchronichepatitisCpatients.JGastroenterolHepatol,2001,16(7):789

俞进,林康,楼宜嘉α甘草酸对豚鼠肾11β羟基类固醇脱氢酶活性的影响中国现代应用药学2003年03期181甘草酸的主要的不良反应来源α体对11-羟基类固醇脱氢酶的抑制作用明显低于β体反应系统包括0.5mmol/LNAD,80uL微粒体酶,144umol/L皮质醇20uL,Krebs-Henseleit缓冲液,甘草酸0.8mmol/L,总体积0.5mL.每次实验三组之间经F检验,P<0.05;3次实验三组自身比较经F检验,P>0.05,平均值t检验,P<0.05甘草酸及其甙元两立体异构体毒性试验比较

动物试验：天晴甘美具有更高的LD50，表明安全性更高急性毒性18β-GL18α-GL灌胃LD50(小鼠)4320mg/kg>8000mg/kg静注LD50(小鼠)588.84mg/kg684.93mg/kgα体与β体甘草酸比较总结α甘草酸二铵相比于β体:极性更低，吸收更好体内分布更合理，肝脏靶向性更强抗炎作用更强对11-β-羟基类固醇脱氢酶抑制更弱毒性更低

如何获得甘草酸中最具价值的单一α体甘草酸成分？

沙利度胺

R对映体

S对映体

孕妇

强致畸缓解妊娠反应

最为著名的案例就是在60年代欧洲风行一时的沙利度胺（反应停）。研究证明，(R)-(+)-异构体具有镇静作用，但其(S)-(

)-异构体及代谢产物(S)-N-邻苯二甲酰谷氨酰胺和(S)-N-邻苯二甲酰谷氨酸却有很强的胚胎毒素和致畸作用。

手性药物研究的兴起2001年诺贝尔化学奖得主威廉·诺尔斯野依良治巴里·夏普莱斯

由于他们在手性物质催化和氢化领域的贡献，如今许多手性化合物的单一异构体可以方便的合成或者拆分出来，这成为化学领域几十年来最重要的发现之一。18α甘草酸和18β甘草酸存在多个手性碳，但只有C－18位手性碳原子构型不同，由此产生立体差异性18α甘草酸（异甘草酸）18β甘草酸

18α体甘草酸与18β体甘草酸实际上就是一对同分异构体的手性药物。而化学催化领域的突破为我们获得单一的优势的α体甘草酸提供了方法。第四代甘草酸制剂2005年：经过国家SFDA批准，异甘草酸镁（甘草酸单一手性异构体镁）上市。

甘草酸家族最新一代——天晴甘美通用名：异甘草酸镁注射液商品名：天晴甘美天然甘草酸的手性差向异构体镁盐，两种保肝成分的全新组合肝脏靶向性更高，作用更快多重保肝机制更有效地防治各类肝损伤

甘草酸制剂在肝损伤

疾病中的应用肝脏炎症是肝损伤的病理学基础NADPHIINOROS启动Caspase（8）LOX前列腺素白三烯血栓素溶血磷脂LPC脂质神经酰胺NF-kBTNFα/FasSOD药物、活性氧自由基、胆酸、细胞应激cPLA2α-炎症级联瀑布效应的“阀门”磷脂酶A2将损伤因素（活性氧化物，一氧化氮）、炎症细胞、脂类物质、细胞因子等细胞有形成分和可溶分子物质联系起来，成为该体系中极其关键的活性酶。在PLA2亚型中，cPLA2α在激动剂（如细胞因子、内毒素）诱导的花生四烯酸以及下游一系列炎性介质的释放中发挥主导作用，现在多数的研究者认为，cPLA2α是调控这一过程的“阀门”。TakashiONOetal.Characterizationofanovelinhibitorofcytosolic

phospholipaseA2a.BiochemJ．2002，363：727-735.NADPHIINOROS启动Caspase（8）LOX前列腺素白三烯血栓素溶血磷脂LPC脂质神经酰胺NF-kBTNFα/Fas正反馈SOD常见保肝药物在肝损炎症瀑布中的作用点甘美易善复谷胱甘肽甘美－掌门人，关上了炎症级联瀑布的阀门易善复－修补者，亡羊补牢谷胱甘肽－勤劳的清道夫，但有点不堪负重甘草酸制剂治疗病毒性肝病天晴甘美与阳性对照药有效率比较（430名*P<0.05）用药2周、4周和停药2周的总有效率*PRef:异甘草酸镁新药报批资料甘草酸制剂治疗病毒性肝病天晴甘美与阳性对照药ALT,AST复常情况比较(120名*P<0.05）*P*PRef：刘先进等异甘草酸镁治疗慢性乙型肝炎60例疗效观察《药品评价》2007；5：天晴甘美明显减轻GalN引起的急性药物性肝损伤甘草酸制剂治疗药物性肝损伤Ref:异甘草酸镁新药报批资料试验组

肝细胞坏死程度

平均级数(－)组

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—0(＋)组

++++++++++++++++++++++++2.4美能60mg/kg+++++++++++++++++++1.9*甘美15mg/kg+++++++++++++++++++++2.1*甘美30mg/kg++++++++++++—+—++1.5**甘美60mg/kg++++++++++—

—++1.2***

天晴甘美可保护GalN引起急性肝损伤大鼠肝脏形态N=10,*p>0.05;**p<0.05;***p<0.01与模型对照组比较甘草酸制剂治疗药物性肝损伤Ref:异甘草酸镁新药报批资料＊46例确诊药物性肝病患者随机分为2组

＊治疗组（17例）异甘草酸镁注射液100mg

＊对照组（29例）还原性谷胱甘肽＋门冬氨酸钾镁＋Vc

＊为期4周天晴甘美治疗药物性肝损伤*P#P*P<0.01#P<0.05甘草酸制剂治疗药物性肝损伤Ref：李异蒋永芳异甘草酸镁治疗急性药物性肝损伤的疗效观察《中西医结合肝病》2007；5初治急性非淋巴细胞性白血病患者92例。随机分为治疗组46例，对照组46例。两组年龄、性别差异无统计学意义。对照组：柔红霉素+阿糖胞苷(DA)方案化疗：柔红霉素每天45mg／m2

共3d静脉滴注。阿糖胞苷150mg／m2共7d持续静脉滴注。治疗组：于化疗同时开始给予异甘草酸镁l50mg+5％葡萄糖250ml静脉滴注，每日1次，用至化疗后1周。两组分别于化疗前1d及化疗后第8天复查肝功能。肝损害程度：ALT>45U／L为异常，肝损害程度参照抗癌药物毒性反应分级标准。天晴甘美对白血病化疗者肝脏的保护作用甘草酸制剂治疗药物性肝损伤4.3％8.7％008.7％13％13％ALT异常发生率：治疗组13％，对照组43.5％，P<0.05甘草酸制剂治疗药物性肝损伤DA方案：柔红霉素+阿糖胞苷

天晴甘美在肿瘤相关肝损害中的应用

介入：介入药物的影响局部缺血化疗：治疗药物的肝脏毒性手术：缺血再灌注治疗药物全身氧应激肝细胞损伤坏死不同浓度天晴甘美作用于肝星状细胞株

异甘草酸镁对大鼠肝星状细胞增殖和氧应激的影响陈蔚华，陆伦根，曾民德，等。《中华肝脏病杂志》

甘草酸制剂治疗肝纤维化

天晴甘美作用于慢乙肝合并肝纤维化患者120（**p<0.01）甘草酸制剂治疗肝纤维化******郭雅玲等异甘草酸镁对慢性乙型肝炎肝纤维化指标的影响《中西医结合肝病》2007;22512127对照组p=0.0002治疗组10510150203040500YearsHCC(%)CumulativerateofHCC长期服用甘草酸将显著减少肝癌的发生率！REF:Y.Araseetal.,Cancer79,1997全新甘草酸口服剂型

2004年：甘草酸最新口服剂型（甘草酸二铵脂质复合物，天晴甘平）问世，从此改变了甘草酸口服制剂吸收利用度差的难题，并引入了另一种保肝成分磷脂酰胆碱，保肝功效更全面。双效协同保肝高效持久安全

难题甘草酸口服制剂吸收差Ref1:

奚念朱《药剂学》第三版人民卫生出版社1994434Ref2：RuRP,WuXM,LüJStudyonthephysico-chemicalsandliverprotectiveeffectofglycyrrhizin-phosphatidylcholinecomplex.ChineseJournalofModernAppliedPharmacy,2000,17(3):241提高生物利用度,显著增强药效！Ref4：茹仁