含量测定(一)(定量分析方法)

常见定量分析方法概述药物的定量分析准确测定药品有效成分或指标性成分的含量化学分析法仪器分析法重量分析滴定分析电化学分析法分光光度法色谱法优点仪器设备简单易于操作、速度较快成本低准确度和精密度都较高。化学分析法的特点缺点灵敏度低，药物用量大不适合含量少的药物专属性不如仪器分析法（易受到干扰）在中外药典中广泛应用于原料药的含量测定；仪器分析法特点优点准确度和精密度越来越高专属性也较强色谱法：先分离后测定，适合组分复杂、干扰成分较多、难以用滴定分析法测定含量的品种国内外药典——仪器分析法占绝大部分高效液相色谱、分光光度法定量分析方法化学分析法紫外可见分光光度法色谱法其他方法重量分析法基本原理

称取一定重量的样品，用适当的方法将待测组分与样品中其他组分分离，根据被测组分和供试品的重量比计算组分的百分含量优点准确度高，精密度好缺点操作繁琐、费时灵敏度低方法挥发法萃取法沉淀法直接挥发法间接挥发法一、挥发法利用被测组分具有挥发性或将其转化为挥发性物质，称取挥发前后供试品的重量，计算被测组分的含量（一）直接挥发法

称得的重量或增加的重量就是被

测组分的重量1.用高氯酸镁吸收挥发的结晶水计算其增加的重量2.炽灼残渣测定法（二）间接挥发法

样品减少的重量是被测组分重量干燥失重测定法

二、萃取法（提取重量法）将待测组分从一种溶剂萃取到另一易挥发的溶剂中，挥去溶剂，称量干燥物的重量进行计算如苯巴比妥中“中性和碱性物质”的检查三、沉淀法将待测组分以沉淀形式从溶液中分离，并转化成称量形式，称定其重量进行计算（一）基本原理操作步骤取样滤渣沉淀过滤洗涤称重沉淀形式称量形式沉淀形式

沉淀时物质的化学组成形式称量形式称量时物质的化学组成形式如Fe(OH)3·nH2O如Fe2O3对沉淀形式的要求

溶解度小，纯净，易过滤洗涤，

易转化为称量形式对称量形式的要求组成固定，化学稳定性高，分子量大（二）计算1.被测组分与称量形式的组成相同时如SiO22.被测组分与称量形式的组成不同时如Fe

Fe2O3×a×b换算因数被测组分的摩尔质量（或原子量）与称量形式摩尔质量的比值如Fe(55.847)

O(15.9994)×2被测物沉淀形式称量形式

换算因数

FeFe(OH)3·nH2O

Fe2O32Fe/Fe2O3

FeO

Fe(OH)3·nH2O

Fe2O32FeO/

Fe2O3SO42-BaSO4

BaSO4SO4/

BaSO4

MgO

MgNH4PO4

Mg2P2O7

2MgO/

Mg2P2O7SiO2

SiO2

SiO2

SiO2

/SiO21、用重量法测定某试样中的Fe，沉淀形式为Fe(OH)3·nH2O，称量形式为Fe2O3，换算因数应为

A、Fe/Fe(OH)3·nH2OB、Fe

/Fe2O3

C、2Fe/Fe2O3D、Fe2O3/FeE、Fe2O3/2Fe2.用沉淀重量法测定硫酸盐药物时，称取沉淀的形式为

A.结晶

B.粉未

C.非晶体

D.称量形式

E.化学因数3、以下哪种形式是沉淀重量法测定

FeSO4的换算因数

A、2Fe/Fe2O3B、2FeSO4/Fe2O3

C、Fe/FeSO4D、Fe/Fe(OH)3

E、FeSO4/FeO4、重量分析法一般分为

A、沉淀法

B、挥发法

C、萃取法

D、残留法

E、熔融法滴定分析法的特点优点1.仪器设备简单2.易于操作、速度较快3.成本低4.准确度和精密度都较高。缺点灵敏度低，药物用量大不适合含量少的药物专属性不如仪器分析法（易受到干扰）在中外药典中广泛应用于原料药的含量测定；容量分析法容量分析法：用已知浓度的标准溶液，滴定一定体积的待测溶液，直到化学反应完全为止，到达终点，根据标准溶液的体积和浓度计算待测物质含量的方法。等当点（化学计量点）

消耗的滴定液的摩尔数＝被测物摩尔数滴定终点指示剂的变色点（允许与化学计量点的误差≤0.1％）滴定方式直接滴定法剩余滴定法置换滴定法容量分析法滴定度 每1ml标准滴定液相当待测物的mg数。滴定度计算1.滴定分析中，一般利用指示剂的突变来判断化学计量点的到达，在指示剂变色时停止滴定，这一点为

A、化学计量点B、滴定分析

C、滴定等当点D、滴定终点

E、滴定误差滴定液的配制和标定基准物质：能用来直接配制标准溶液的化学试剂滴定度：每毫升标准溶液相当于被测物质的质量（g或mg），以符号T表示直接法（不需标定）间接法（标定）：先将其配制成近似于所需浓度的溶液，然后利用基准物质或另一种标准溶液来确定其准确浓度。标定：用基准物质或标准溶液准确测定滴定液浓度的过程。校正因子（F）：表示滴定液准确浓度与标示浓度的比值。其范围应在1.05～0.95之间，超出该范围应加入适当的溶质或溶剂予以调整，并重新标定。酸碱滴定法一、基本原理

利用酸和碱在水溶液中以质子转移为基础的滴定分析方法

酸能给出质子的物质碱能接受质子的物质酸给出质子后剩余部分是该酸的共轭碱碱接受质子后，即成为该碱的共轭酸（一）强酸强碱的滴定化学计量点时，溶液呈中性突跃范围pH4.30～9.70酚酞（8.3~10.0）无色→红甲基红（4.2~6.3）红→黄甲基橙（3.2~4.4）红→黄（二）强碱滴定弱酸化学计量点时，溶液偏碱性酚酞（8.0~10.0）无色→红百里酚酞（9.4~10.6）无色→蓝c·Ka＞10-8（三）强酸滴定弱碱化学计量点时，溶液偏酸性甲基红（4.4~6.2）红→黄溴甲酚绿（3.8~5.4）黄→蓝c·Kb＞10-8（四）多元酸的滴定如甲基橙和酚酞

可选择混合指示剂二、酸碱指示剂常用的酸碱指示剂是有机弱酸或弱碱，与其共轭碱或共轭酸呈现不同的颜色指示剂变色范围酚酞

pKIn=

9.1（8.0~10.0）滴定突跃在化学计量点附近发生突变的pH范围选择原则指示剂的变色范围全部或部分落在滴定突跃范围内三、滴定液的标定NaOH滴定液

基准物邻苯二甲酸氢钾

指示剂酚酞（无色→粉红）HCl

滴定液

基准物无水Na2CO3

指示剂甲基红-溴甲酚绿(绿→暗紫)H2SO4滴定液

基准物无水Na2CO3

指示剂甲基红-溴甲酚绿(绿→暗紫)

用NaOH滴定液（0.1000mo1/L）滴定20.00ml醋酸（0.1000mol/L）时，需选用的指示剂为

A、甲基橙

B、酚酞

C、K2CrO4溶液

D、甲基红

E、淀粉溶液酸碱指示剂的变色范围pH值计算式为

A、pH=pKs±1B、pH=-1og[H+]C、pH=pk+1D、pH=pKin±1E、pH=log[H+]±1滴定分析中，一般利用指示剂的突变来判断化学计量点的到达，在指示剂变色时停止滴定，这一点为

A.化学计量点

B.滴定分析

C.滴定等当点

D.滴定终点

E.滴定误差48

（1）直接滴定法基于本类药物-COOH；可用碱直接滴定，如ASA的含量测定，其原理如下：原理：条件：在中性乙醇中，以酚酞作指示剂；摩尔比为1:1。

应用：多国药典用于双水杨酯、苯甲酸、丙磺舒、布洛芬测定；USP和BP还用于甲芬那酸的测定。酸碱滴定法49含量测定酸碱滴定法阿司匹林含量测定（中国药典2005版）

取本品约0.4g，精密称定，加中性乙醇（对酚酞指示液显中性）20ml，溶解后，加酚酞指示液3滴，用氢氧化钠滴定液（0.1mo1/L）滴定。每lml的氢氧化钠滴定液（0.1mo1/L）相当于18.02mg的C9H8O4。50含量测定酸碱滴定法（2）水解后剩余滴定法

ASA片含量测定原理：

条件：水溶液51含量测定酸碱滴定法ASA片含量测定具体试验：I份NaOHVo-V相当于ASA消耗

硫酸的ml数I份NaOHVOVASA%=(Vo–V)×F×T/W×100%中国药典2005版52含量测定酸碱滴定法

取本品10片，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于阿司匹林0.3g），置锥形瓶中，加中性乙醇（对酚酞指示液显中性）20ml，振摇使阿司匹林溶解，加酚酞指示液3滴，滴加氢氧化钠滴定液(0.1mol/L)至溶液显粉红色，再精密加氢氧化钠滴定液(0.1mol/L)40ml，置水浴上加热15分钟并时时振摇，迅速放冷至室温，用硫酸滴定液(0.05mol/L)滴定，并将滴定的结果用空白试验校正。每1ml氢氧化钠滴定液(0.1mol/L)相当于18.02mg的C9H8O4。

ASA片含量测定中国药典2005版53含量测定酸碱滴定法（3）两步滴定法

ASA片的含量测定ASA+NaOHASA-Na+H2O水解产物SA+NaOHSA-Na+H2O酸性稳定剂+NaOH中性盐第二步为水解与测定第一步为中和氧化还原滴定法以氧化还原反应（通过电子转移）为基础的滴定分析法氧化还原反应电子得失常见氧化还原滴定方法碘量法溴酸钾法铈量法亚硝酸钠法高锰酸钾法高碘酸钾法重铬酸钾法氧化还原反应中常用的滴定液碘液硫代硫酸钠液溴液溴酸钾液草酸液高锰酸钾液硫酸铈液一、碘量法以碘为氧化剂，或以碘化物为还原剂的滴定法直接碘量法间接碘量法剩余碘量法置换碘量法注反应摩尔比以碘原子数计指示终点自身指示终点（无→黄）淀粉指示液（无→蓝紫）（一）直接碘量法用碘滴定液直接滴定的方法测定条件A、pH条件酸性、中性、弱碱性B、避光、立即滴定（二）间接碘量法1.剩余碘量法2.置换碘量法:是先在供试品（氧化性物质）溶液中加入碘化钾，供试品将碘化钾氧化析出定量的碘，碘再用硫代硫酸钠滴定液滴定，从而可求出待测组分含量

A、需用碘量瓶测定条件B、需做空白滴定系指在不加供试品或以等量溶剂替代供试液的情况下,按同法操作所得的结果.B、pH条件弱酸性、中性、弱碱性水解加大I-浓度A、增加I2溶解度，并减少I2挥发B、降低I2/I-氧化电位，反应完全

配制碘滴定液时加大量碘化钾（三）碘量法误差的主要来源1．碘的挥发预防：

1）过量加入KI——助溶，防止挥发增大浓度，提高速度2）溶液温度勿高3）碘量瓶中进行反应（磨口塞，封水）4）滴定中勿过分振摇2．碘离子的氧化（酸性条件下）预防：1）控制溶液酸度（勿高）2）避免光照（暗处放置）3）I2完全析出后立即滴定4）除去催化性杂质（NO3-，NO，Cu2+）（四）滴定液的标定碘滴定液

基准物三氧化二砷

指示剂淀粉指示液（无→蓝紫）硫代硫酸钠滴定液

基准物重铬酸钾

指示剂淀粉指示液(蓝紫→亮绿)（六）应用与示例

1．直接碘量法：指示剂加入时间：滴定前加入终点：无色→深蓝色例：Vc的测定2．间接碘量法指示剂加入时间：近终点加入终点：深蓝色消失1）剩余碘量法(返滴定法)例：葡萄糖的测定2）置换碘量法例：CuSO4的含量测定指示剂淀粉指示液原理（1）碘量法1.含量测定精密量取本品适量（约相当于维生素C

0.2g），加水15ml与丙酮2ml，摇匀，放置5分钟，加稀醋酸4ml与淀粉指示液1ml，用碘滴定（0.05mol/L）滴定，至溶液显蓝色并持续30秒钟不褪。每1ml碘滴定液（0.05mol/L）相当于8.806mg的C6H8O6.方法（2）酸性环境稀HAC新沸冷H2O减慢VitC被O2氧化速度讨论（3）立即滴定赶走水中O2减少O2的干扰加丙酮减少亚硫酸氢钠干扰

剩余碘量法测葡萄糖的含量注：无须知道CI2葡萄糖

+I2（定过量）葡萄糖酸盐

I2（剩余）+2Na2S2O3

2NaI+Na2S4O6

二、溴量法（剩余溴量法）（一）原理指示剂淀粉指示液（蓝紫→无）（二）测定条件B、反应摩尔比以溴原子数计C、需空白滴定A、溴酸钾与溴化钾在盐酸条件下反应产生新生态溴（三）溴滴定液的标定加入碘化钾，被剩余的溴氧化生成碘，再用硫代硫酸钠液滴定指示剂淀粉指示液（蓝紫→无)三、铈量法指示剂邻二氮菲亚铁还原型→氧化型（红色）（浅蓝色）（一）原理（二）优点A、硫酸铈滴定液稳定B、pH条件HCl（防止Ce4+水解）C、干扰因素少适用于糖浆剂、片剂如硫酸亚铁高锰酸钾法硫酸亚铁片铈量法（三）硫酸铈滴定液的标定基准物三氧化二砷指示剂

邻二氮菲亚铁

（红→淡绿）四、亚硝酸钠滴定法（一）原理利用亚硝酸钠在盐酸存在下可与具有芳伯氨基的化合物发生重氮化反应，定量生成重氮盐，根据滴定时消耗亚硝酸钠的量可计算药物的含量79盐酸普鲁卡因注射液芳伯氨基酯键,易水解脂烃胺Cl－反应具游离芳伯氨基的药物可用本法直接测定。具潜在芳伯氨基的药物，如具芳酰胺基药物（对乙酰氨基酚等）经水解，芳香族硝基化合物（如无味氯霉素）经还原，也可用本法测定。

（二）测定条件1、pH条件过量HCl稳定重氮盐，防止偶氮氨基化合物生成(酸度不足)1:2.5～6（2）反应温度t↑→v↑

10~30℃t↑重氮盐易分解t↑HNO2易分解逸失（3）催化剂KBr

比[NO+·Cl-]多300倍快速滴定法

滴定管尖插入液面下2／3处，在搅拌下一次性放下大部分滴定液，近终点前才提出滴定管，冲洗管尖，再缓缓滴定至终点（4）滴定方式

ν↑来不及反应ν↓亚硝酸分解逸失（5）指示终点的方法A、永停滴定法ChP（2010）B、电位法C、内指示剂法中性红D、外指示剂法

KI－淀粉糊剂或试纸氧化还原法中常用的滴定液是

A、碘滴定液

B、硫酸铈滴定液

C、锌滴定液

D、草酸滴定液

E、硝酸银滴定液亚硝酸钠滴定法中，加KBr

的作用是

A、添加Br-B、生成NO+·Br-C、生成HBrD、生成Br2

E、抑制反应进行亚硝酸钠滴定法中加入适量溴化钾的作用是

A、防止重氮盐分解-B、防止亚硝酸逸失

C、延缓反应

D、加速反应

E、使终点清晰非水滴定法在水以外的溶剂中进行的滴定反应分类非水碱量法非水酸量法对象酸或碱性较弱的药物难溶于水的药物均化效应与区分效应均化效应将不同强度酸或碱拉平到同一强度的效应均化性溶剂具有均化效应的溶剂均化性溶剂均化效应共轭碱（液氨）碱性溶剂是酸的均化性溶剂酸性溶剂是碱的均化性溶剂区分效应能区分出酸或碱的不同强度的效应区分溶剂具有区分效应的溶剂HClO4

＞HCl

＞H2SO4

＞HNO3酸性溶剂是碱的均化性溶剂碱性溶剂是酸的均化性溶剂酸性溶剂对酸有区分效应碱性溶剂对碱有区分效应二、碱的滴定（非水碱量法）（一）溶剂酸性溶剂（冰醋酸、醋酐）（二）滴定液高氯酸（冰醋酸）

基准物邻苯二甲酸氢钾（三）指示剂结晶紫、电位法（四）测定对象弱碱性药物有机弱碱胺类、生物碱类有机酸的碱金属盐枸橼酸钾有机碱的氢卤酸盐（加醋酸汞）盐酸麻黄碱

有机碱的硫酸盐（硫酸在冰醋酸为一元酸）

硫酸奎宁有机碱的硝酸盐（电位法指示终点）有机碱的有机酸盐重酒石酸去甲肾上腺素四、酸的滴定（非水酸量法）（一）溶剂乙二胺二甲基甲酰胺（二）滴定液甲醇钠（甲醇-苯）

基准物苯甲酸（三）指示剂溴酚蓝、百里酚蓝（四）测定对象有机弱酸性药物DMF有机弱酸类药物芳酸类苯甲酸酚类苯酚磺酰胺类磺胺嘧啶巴比妥类苯巴比妥四、滴定液的标定高氯酸滴定液

基准物邻苯二甲酸氢钾

指示剂结晶紫（紫→蓝）甲醇钠滴定液的标定

基准物苯甲酸

指示剂麝香草酚蓝（黄→蓝）非水溶液滴定法（硫酸阿托品）(1)基本原理当HA酸性较强时，反应不能定量完成，必须除去或降低HA的酸性，使反应顺利地完成。BH+A-+HClO4BH+ClO4+HA游离碱类盐被置换出的弱酸因此，要根据不同情况采用相应测定条件。101(2)一般方法供试品+冰醋酸10ml~30ml若供试品为氢卤酸盐再加5%醋酸汞的冰醋酸液3ml~5ml结果高氯酸滴定液滴定以空白试验校正非水溶液滴定法102(3)问题讨论A.适用范围

主要用于Kb＜10-8的有机碱盐的含量测定。对碱性较弱的杂环类药物，只要选择合适的溶剂、滴定剂和终点指示的方法，可使pKb为8～13的弱碱性药物采用本法滴定。非水溶液滴定法103一般来说：

Kb为10-8～10-10时，宜选冰醋酸作为溶剂；药物的Kb为10-10～10-12时，宜选冰醋酸与醋酐的混合溶液；

Kb＜10-12时，应用醋酐作为溶剂。

另外，在冰醋酸中加入不同量的甲酸，也能使滴定突跃显著增大，使一些碱性极弱的杂环类药物获得满意测定结果。非水溶液滴定法

B.酸根的影响：无机酸类，在醋酸介质中的酸性以下列排序递减：

高氯酸＞氢溴酸＞硫酸＞盐酸＞硝酸

消除HX干扰的方法：加Hg(Ac)2

量不足终点不明显，结果偏低。

2B·HX+Hg(Ac)2→2B·HAc+HgX2

过量(1～3倍)不影响测定结果非水溶液滴定法105C.滴定剂的稳定性

非水溶液滴定法所用的溶剂为醋酸，具有挥发性，膨胀系数较大，温度和贮存条件都影响滴定剂的浓度。若滴定样品与标定HClO4溶液时的温度不一致，温差未超过10℃时，应将高氯酸滴定液的浓度用下列公式加以校正：

D.终点指示方法

常用电位法和指示剂法。

Ch.P收载的本类药物大多采用结晶紫指示剂指示终点，少数采用电位法指示终点。非水溶液滴定法106硫酸阿托品：阿托品为碱性较强的一元碱，因而硫酸阿托品的化学结构式可以简写为（BH+）2·SO42-，用高氯酸直接滴定时的反应式：(BH+)2·SO42-+HClO4→(BH+)·ClO4-+(BH+)·HSO4-

根据1mol的硫酸阿托品消耗1mol高氯酸的关系计算其含量。4、含量测定1074、含量测定（硫酸阿托品）

取本品约0.5g，精密称定，加冰醋酸与醋酐各10ml溶解后，加结晶紫指示液1～2滴，用高氯酸滴定液(0.1mol/L)滴定至溶液显纯蓝色，并将滴定的结果用空白试验校正。每1ml高氯酸滴定液(0.1mol/L)相当于67.68mg(C17H23NO3)2·H2SO4。

中国药典2005版1084、含量测定（硫酸阿托品片）

酸性染料比色法

（1）基本原理

（2）影响因素a.水相最佳pH值的选择：本法中水相的pH应使有机碱性药物均成阳离子(BH+)，而酸性染料应电离足够的阴离子(In-),阴阳离子才能定量生成离子对，并完全溶于有机溶剂中，而过量的染料完全保留在水相中，才能保证定量的测定。b.酸性染料及其浓度：常用酸性染料有溴麝香草酚蓝、甲基橙、溴甲酚绿等。酸性染料浓度，对测定影响不大，有足够量即可。

酸性染料比色法c.有机溶剂的选择

有机碱药物应对离子对提取率高，不与水混溶，或能与离子对形成氢键的有机溶剂。常用的有机溶剂有氯仿、二氯甲烷、二氯乙烯、苯、甲苯、四氯化碳等。d.水分的影响：严防水分混入有机溶剂中，水相中过量有色酸性染料，而影响测定结果；水分的混入使氯仿混浊，而影响比色测定。一般加入脱水剂，或滤纸过滤的方法，除去混入的水分。

酸性染料比色法3、准确度差，不能用于原料药的测定，只能用于制剂分析（3）特点1、选择性高，选用适当pH缓冲液可消除干扰2、灵敏度高、供试品用量少酸性染料比色法112（4）结果计算含量测定中的“并将滴定的结果用空白试验校正”,系指按供试品所耗滴定液的量(ml)与空白试验中所耗滴定液量(ml)之差进行计算。在滴定的过程中，由于内因：操作。外因：杂质。等原因会导致检测结果有一定误差，但是这么误差，我们无法控制与量化。

做空白目的在于消除，杂质以及手法等上产生的误差1:[1—5]应选择的溶剂为

A、纯水B、液氨C、冰醋酸

D、甲苯E、甲醇1、苯酚、水杨酸、盐酸和高氯酸的均化溶剂2、苯酚、水杨酸、盐酸和高氯酸的区分溶剂3、非质子性溶剂4、奎宁是弱碱，应在何种溶剂滴定5、中国药典（2010年版）用硝酸银滴定苯巴比妥应选择最佳溶剂BCDCE2、将不同强度的酸碱调节到同一强度水平的效应称为

A、酸效应

B、区分效应

C、均化效应

D、盐效应

E、同离子效应3：[1—5]可选择的方法为

A、非水碱量法B、非水酸量法

C、两者均可D、两者均不可1、以冰醋酸为溶剂2、以二甲基甲酰胺为溶剂3、以水为溶剂4、以苯为溶剂5、以甲醇为溶剂ABDCC4、下列哪些药物可以用高氯酸滴定液进行非水溶液滴定

A、枸橼酸钾

B、盐酸麻黄碱

C、重酒石酸去甲肾上腺素

D、咖啡因

E、异戊巴比妥5：[1—5]A.拉平效应B.区分效应

C.非水酸量法D.非水碱量法

E.须加醋酸汞1.用冰醋酸作溶剂2.用DMF作溶剂3.能使不同酸的强度相等4.消除有机盐的氯离子的影响5.高氯酸在冰醋酸中显强酸DCAEB沉淀滴定法概念以沉淀反应为基础的滴定分析法

应用较广的是银量法银量法铬酸钾法（Mohr法）铁铵矾指示剂法（Volhard法）吸附指示剂法（Fajans法）吸附指示剂法（Fayans法，法扬司法）吸附指示剂法：利用沉淀对有机染料吸附而改变颜色来指示终点的方法吸附指示剂：一种有色有机染料，被带电沉淀胶粒吸附时因结构改变而导致颜色变化原理：SP前：HFLH++FL-

（黄绿色）

AgCL:CL-----吸附过量CL-SP时：大量AgCL:Ag+::FL-（淡红色）----双电层吸附D．避免阳光直射E．被测物浓度应足够大F．被测阴离子→阳离子指示剂被测阳离子→阴离子指示剂适用范围：

可直接测定CL-，Br-，I-，SCN-和Ag+

滴定条件及注意事项

a）控制溶液酸度，保证HFL充分解离：pH＞pKa

例：荧光黄pKa7.0——选pH7~10

曙红pKa2.0——选pH＞2

二氯荧光黄pKa4.0——选pH4~10b）防止沉淀凝聚措施——加入糊精，保护胶体

c）卤化银胶体对指示剂的吸附能力<对被测离子的吸附能力(反之终点提前，差别过大终点拖后)

吸附顺序：I-＞SCN-＞Br-＞曙红＞CL-＞荧光黄例：测CL－→荧光黄测Br－→曙红1：[1—5]测定中所用的指示液

A.结晶紫B.碘化钾—淀粉

C.荧光黄D.酚酞E.邻二氮菲1.亚硝酸钠法2.吸附指示剂法3.非水碱量法4.酸碱滴定法5.铈量法BCADE用作沉淀滴定的沉淀反应必须满足以下条件：（1）反应速度快，生成沉淀的溶解度小；（2）反应按一定的化学式定量进行；（3）有准确确定理论终点的方法。应用范围：含量在1%以上的卤素化合物和硫氰化物的测定。配位（络合）滴定法一、基本原理以配位反应为基础的滴定分析法配位剂中应用最广的是乙二胺四乙酸（EDTA）

配位滴定主要是指EDTA滴定，它可滴定数十种含金属离子的药物二、金属指示剂（一）原理（以络黑T为例）终点前

M+In

MIn

显配合物颜色滴定过程

M+YMY终点

MIn

+YMY+In（置换）

显游离指示剂颜色滴定液基准物终点指示NaOH邻苯二甲酸氢钾酚酞(无色→粉红)HCl无水Na2CO3甲基红-溴甲酚绿(绿→暗紫)AgNO3NaCl荧光黄(黄绿→微红)EDTAZnO络黑T(紫→纯蓝）I2

As2O3淀粉(无色→蓝紫)Ce(SO4)2As2O3邻二氮菲亚铁(红→绿)NaNO2对氨基苯磺酸永停法Na2S2O3K2Cr2O7淀粉(蓝→亮绿)HClO4邻苯二甲酸氢钾结晶紫(紫→蓝)定量分析方法特点

（一）容量分析法的特点

容量分析法是将已知浓度的滴定液由滴定管滴加到待测药物的溶液中，直到所加滴定液与被测药物按化学计量反应完全为止，然后根据滴定液的浓度和消耗的体积，就可计算出被测药物的含量。滴定终点与等当点不符---滴定误差，需要选择合适的指示剂指示终点。

通常用于测定高含量或中含量组分，即被测组分的含量在1%以上。容量分析法比较准确，一般情况下相对误差可达0.2%以下。

容量分析法操作简便、快速、比较准确，仪器普通易得。（二）容量分析法的计算问题

1.滴定度是每1ml某摩尔浓度的滴定液所相当的被测药物的重量。中国药典用毫克（mg）表示。

2.滴定度(T)的计算

在容量分析中，被测药物（B)与滴定液(A)之间都按一定的摩尔比进行反应的，反应可表示为：

aA＋bB

cC＋dD

滴定度（T）可按下式计算：

（mg/ml）

式中M对为滴定液的摩尔浓度，b为被测药物的摩尔数，a为滴定液的摩尔数，B为被测药物的毫摩尔质量（分子量）。3.百分含量计算

在测定药物含量时，常用直接滴定法和回滴定法，其计算方法如下。

滴定的分类按反应方式分类：直接滴定法：滴定液与被测物质直接反应间接滴定法：包括剩余滴定和置换滴定含量%=含量%=药典收载的容量分析法都给出了滴定度值，根据供试品取量（W）、消耗滴定液的体积（V)和滴定度（T），即可计算出被测药物的百分含量。在实际工作中，所配制的滴定液的摩尔浓度与药典中规定的摩尔浓度不一定恰好符合，此时就不能直接应用药典上所给出的滴定度（T），需乘以滴定液浓度校正因数（F）即可换算成实际的滴定度（T'），即

T'=T×F取苯巴比妥0.4045g，加入新制的碳酸钠试液16ml使溶解，加丙酮12ml与水90ml，用硝酸银滴定（0.1025mol/L）滴定至终点，消耗硝酸银滴定液16.88ml，求苯巴比妥的百分含量（每1ml0.1mol/L硝酸银相当于23.22mg的C12H22N2O3？解：∴苯巴比妥的含量为99.3%.分光光度法

紫外-可见分光光度法（ＵＶ－ＶＩＳ）

根据物质对波长为200～760nm波长范围的光吸收特性所建立的一种定性、定量和结构分析的方法.(1)200～400nm----紫外光区；(2)400～760nm----可见光区；(3)760～2500nm（12800cm-1～4000cm-1）----近红外光区(4)2.5～25μm（按波数计为4000cm-1～400cm-1）----红外光区。

紫外-可见吸收光谱分子的价电子吸收了光的能量，由低能量的基态跃迁到高能量的激发态，在相应波长位置出现吸收带形成的光谱，称为紫外-可见吸收光谱

物质对光的选择性吸收

物质对光的吸收是选择性的，利用被测物质对某波长的光的吸收来了解物质的特性，这就是光谱法的基础。原理：朗伯-比尔定律朗伯-比尔定律：当一束平行单色光通过含有吸光物质的稀溶液时，溶液的吸光度与吸光物质浓度、液层厚度乘积成正比，即

A=Eclc为吸光物质浓度，l为透光液层厚度。

朗伯-比尔定律是紫外-可见分光光度法的理论基础。二、紫外-可见分光光度计

1、光源紫外区氢灯或氘灯可见区钨灯或卤钨灯

2、单色器棱镜或光栅

3、吸收池石英或玻璃

4、检测器光电池、光电管、光电倍增管、光二极管阵列检测器三、紫外-可见吸收光谱与结构的关系（一）紫外-可见吸收光谱通过测定被测物质对不同波长的光的吸收强度（吸光度），以波长为横坐标，吸光度为纵坐标作图，得出该物质在测定波长范围的吸收曲线。在吸收曲线中，通常选用最大吸收波长λmax进行物质含量的测定。特征参数（1）最大吸收波长（

max）（2）最大吸收波长处的吸收系数（3）最小吸收波长（

min）（4）末端吸收紫外可见光度计结构光源单色器吸收池检测器单波长单光束分光光度计光源：能够发出测量所需波长范围内的连续光谱，要求具有一定的光强度并在一定时间内能保持稳定钨灯或卤钨灯——可见光源350~1000nm氢灯或氘灯——紫外光源200~360nm单色器：（包括狭缝、准直镜、色散元件）

棱镜——对不同波长的光折射率不同色散元件分出光波长不等距光栅——衍射和干涉

分出光波长等距吸收池：又称比色皿或比色杯

玻璃——仅适用于可见光区石英——适用于紫外和可见光区要求：匹配性（对光的吸收和反射应一致）其光径可在0.1~10cm之间，其中以1cm光径吸收池最为常用。记录装置：

讯号处理和显示系统光电池光电管光电倍增管二极管阵列检测器检测器：将光信号转变为电信号的装置比色皿按规格标准比色皿微量比色皿半微量比色皿避光流动比色皿按用途：红外比色皿紫外比色皿光学比色皿按光路宽：11.5234510mm按光路长：51020304050100mm按颜色：白壁黑壁按密封方式：无密封带盖带塞按材质：石英玻璃二、紫外-可见分光光度计的类型

按其光学系统可分为单波长分光光度计和双波长分光光度计。1.单波长单光束分光光度计

目前国内广泛采用721型分光光度计。具有结构简单、价格低廉、操作方便、维修也比较容易，适用于常规分析。

单波长单光束分光光度计还有国产751型、XG-125型、英国SP500型和伯克曼DU-8型等。2.单波长双光束分光光度计

单波长双光束分光光度计有国产710型、730型、740型、日立UV-340型等就属于这种类型。3.双波长分光光度计双波长分光光度计的优点：是可以在有背景干忧或共存组分吸收干忧的情况下对某组分进行定量测定。国产WFZ800-5型、岛津UV-260型、UV-265型等。三、分光光度计的校正和检验1.波长校正2.吸光度校正3.杂散光的检验4.稳定性的检验普析ＵＶ２５０１紫外-可见分光光度法的特点：

1与其它光谱分析方法相比，其仪器设备和操作都比较简单，费用少，分析速度快;2灵敏度高;3

选择性好;4精密度和准确度较高;5用途广泛。

四．注意事项（一）使用的吸收池必须洁净，并注意配对使用。量瓶、移液吸管均应校正、洗净后使用。

（二）取吸收池时，手指应拿毛玻璃面的两侧，装盛样品以池体的4/5为度，使用挥发性溶液时应加盖，透光面要用擦镜纸由上而下擦拭干净，检视应无溶剂残留。吸收池放入样品室时应注意方向相同。用后用溶剂或水冲洗干净，晾干防尘保存。（三）供试品溶液浓度除各该品种已有注明外，其吸收度以在0.3～0.7之间为宜。

（四）测定时除另有规定外，应以配制供试品溶液的同批溶剂为空白对照，采用1cm石英吸收池，在规定的吸收峰±2nm以内，测几个点的吸收度或由仪器在规定的波长附近自动扫描测定，以核对供试品的吸收峰位置是否正确，并以吸收度最大的波长作为测定波长，除另有规定外吸收度最大波长应在该品种项下规定的测定波长±2nm以内。（五）供试品应取2份，如为对照品比较法，对照品一般也应取2份。平行操作，每份结果对平均值的偏差应在±0.5%以内（六）选用仪器的狭缝宽度应小于供试品吸收带的半宽度，否则测得的吸收度值会偏低，狭缝宽度的选择应以减少狭缝宽度时供试品的吸收度不再增加为准，对于大部分被测品种，可以使用2nm缝宽五、应用(1)鉴别吸收光谱（1）结构完全相同的化合物应有完全相同的吸收光谱注意（2）吸收光谱完全相同的化合物不一定是同一个化合物

*利用药物与杂质吸收光谱的明显差别，进行杂质检查(2)杂质检查中的应用*在一定波长处测定A，规定A酮体检查生产工艺：酮体氢化还原制得，若氢化不完全则引入酮体杂质。药物检查的杂质溶剂样品浓度(mg/ml)测定波长(nm)

A肾上腺素肾上腺酮HCl(9→2000)

2.0

310不得过0.05盐酸去氧肾上腺素酮体水

2.0

310不得大于0.20重酒石酸去甲肾上腺素去甲肾上腺酮水

2.0

310不得大于0.05盐酸异丙肾上腺素酮体水

2.0

310不得大于0.15盐酸甲氧明酮胺水

1.5

347不得大于0.06紫外分光光度法检查酮体的条件及要求(三)在含量测定中的应用1.对照品比较法2.吸收系数法3.计算分光光度法（1）对照品比较法：按各品种项下的方法，分别配制供试品溶液和对照品溶液，对照品溶液中所含被测成分的量应为供试品溶液中被测成分标示量的100±10%，所用溶剂也应完全一致，在规定的波长测定供试品溶液和对照品溶液的吸收度后，按下式计算供试品中被测溶液的浓度：式中Cx为供试品溶液的浓度,Ax为供试品溶液的吸收度，Cr为对照品溶液的浓度,Ar为对照品溶液的吸收度，D为稀释倍数，W为供试品取样量。（2）吸收系数法：按各品种项下的方法配制供试品溶液，在规定的波长处测定其吸收度，再以该品种在规定条件下的吸收系数计算含量。

含量％=用本法测定时，应注意仪器的校正和检定。3.计算分光光度法（多组分的测定）当吸收度处在吸收曲线的陡然上升或下降的部位测定时，影响精度的因素较多，故对照品和供试品测试条件应尽可能一致。若测定时不用对照品，如维生素A测定法，则应在测定时对仪器作仔细地校正和检定。1、紫外分光光度计应定期检查

A、波长精度

B、吸收度准确性

C、狭缝宽度

D、溶剂吸收

E、杂散光2、某药物的摩尔吸收系数（

）很大，则表示A、光通过该物质溶液的光程长B、该物质溶液的浓度很大C、该物质对某波长的光吸收能力很强D、该物质对某波长的光透光率很高E、测定该物质的灵敏度低3、紫外分光光度法中，用对照品比较法测定药物含量时A、需已知药物的吸收系数B、供试品溶液和对照品溶液的浓度应接近C、供试品溶液和对照品溶液应在相同的条件下测定D、可以在任何波长处测定E、是中国药典规定的方法之一4、用紫外分光光度法鉴别药物时，常采用核对吸收波长的方法，影响本法试验结果的有

A、仪器波长的准确度

B、供试品溶液的浓度

C、溶剂的种类

D、吸收池的厚度

E、供试品的纯度5、紫外分光光度计是由以下部件组成的

A、氘灯

B、光栅

C、石英吸收池

D、光电管

E、真空热电偶6、摩尔吸收系数的表示符号是

A、

B、εC、αD、nE、Ka

7、可见一紫外分光光度法测定的药物分子具有吸收特性的电磁波范围是

A、10～400nmB、400～800nmC、800～400nmD、400m～1mE、200～760nm8、分光光度法（吸收光度法）所依据的基本定律是

A、Beer定律

B、Lambert定律

C、Nernst公式

D、VanDeemter方程

E、Beer-Lambert定律UV法：盐酸异丙嗪片已知：W10片=1.0241g标示量25mg

W粉=0.04701gA249nm=0.472取本品10片，除去糖衣后，精密称定，研细，精密称取适量(约相当于盐酸异丙嗪12.5mg)，置200ml量瓶中，加盐酸溶液(9→1000)适量，振摇15min使盐酸异丙嗪溶解，再加盐酸溶液(9→1000)稀释至刻度，摇匀，用干燥滤纸滤过，精密量取续滤液10ml，置100ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，照分光光度法(附录ⅣA)，在249nm的波长处测定吸收度，按C17H20N2S·HCl的吸收系数()为910计算，即得荧光分析法一、基本原理荧光处于第一激发态的分子，跃迁回基态时发射的光称为荧光，其能量小于激发光，波长长于激发光；除去激发光源，荧光立即熄灭荧光为发射光。利用荧光的物理特性进行定性与定量测定的方法称为荧光分析法。本法特点为：

（1）灵敏度高，荧光分析法的灵敏度一般较紫外分光光度法为高，其灵敏度可达10-10g/ml一10-12g/ml

（2）荧光分析法应在低浓度溶液中进行

（3）空白试验（4）对易被光分解的样品，为使仪器灵敏度定标准确避免因激发光多次照射而影响荧光强度，可选择一种激发光和发射光波长与之近似而对光稳定的物质配成适当浓度的溶液，作为基准溶液。

在测定供试品溶液时用基准溶液代替对照品溶液校正仪器的灵敏度。

（5）荧光衍生化试剂

（6）取样少，方法快速2.含量测定

在每次测定前，用一定浓度的对照品溶液校正仪器的灵敏度；然后在相同条件下，读取对照品溶液及其试剂空白的荧光读数与供试品溶液及其试剂空白的荧光读数，用下式计算供试品浓度：应在0.50-2.0之间二、荧光光度计1、光源汞灯或氙灯2、单色器滤光片或光栅（两个）

[第二个位于激发光源垂直方向]3、吸收池低荧光玻璃或石英池

[四面透明]4、检测器光电倍增管

[在与激发光源垂直方向检测]五．应用1.鉴别2.含量测定对照品比较法红外分光光度法

红外吸收光谱是由分子的振动及转动能级的跃迁而引起的

将分子吸收红外光的情况用仪器记录下来，就是红外光谱图红外吸收光谱又称为分子的振-转光谱红外分光光度法是利用物质分子吸收波数在4000～400cm-1范围的红外光而产生的吸收光谱进行分析的方法，