AbMole脂肪间质干细胞衍生的外泌体通过WNTbeta-catenin信号传导途径促进真皮成纤维细胞的伤口愈合

AbMole|脂肪间质干细胞衍生的外泌体通过WNT/beta-catenin信号传导途径促进真皮成纤维细胞的伤口愈合皮肤成纤维细胞的分化、迁移和增殖被认为是皮肤伤口愈合的关键因素。脂肪来源的间充质干细胞（ADMSCs）及其外泌体（ADMSC-Exos）被认为是组织再生的潜在治疗工具；然而，皮肤伤口愈合的潜在机制仍未被很好地理解。在这项研究中，我们成功地获得了ADMSC-Exos，并发现ADMSC-Exos在体外以剂量依赖的方式显著促进成纤维细胞的迁移和增殖。用ADMSC-Exos处理的成纤维细胞中COL-I和COL-III的表达水平明显增加，而α-SMA的表达水平则下降。此外，WNT2b和β-catenin的蛋白表达增强证实了WNT/β-catenin信号通路的激活，WNT/β-catenin抑制剂（XAV939）逆转了ADMSC-Exos对伤口愈合和β-catenin表达的促进作用。总之，我们的研究部分阐明了ADMSC-Exos在伤口愈合中的机制，说明了ADMSC-Exos作为一种新的治疗方法促进皮肤伤口愈合的潜力。XAV939（Abmole，M1796，纯度>98%）通过抑制tankyrase1/2而选择性抑制Wnt/β-catenin介导的转录，IC50为11nM/4nM，调节轴蛋白水平，但对CRE，NF-κB和TGF-β无作用。Fig.6EfectofADMSC-ExosonwoundhealingafterapplicationofWNT2b/β-cateninpathwayinhibitor.我们应用WNT2b/β-catenin通路抑制剂（XAV939），进一步观察ADMSCExos对伤口愈合的变化。经WNT通路抑制剂处理后，ADMSCExos+X处理组的伤口闭合率较ADMSC-Exos处理组下降，且在第7天和第14天差异有统计学意义，表明阻断WNT2b/β-catenin通路可抑制ADMSC-Exos促进的伤口愈合（图6A，B）。虽然XAV939治疗组和空白对照组在第3天和第14天的愈合率没有统计学差异，但XAV939治疗组在第7天的愈合率明显低于空白对照组，表明WNT通路的激活对伤口愈合有积极作用。H&E分析显示，三组在第14天没有明显的炎症细胞浸润，纤维组织变得致密、有序、连续上皮化，尤其是ADMSC-Exos组，其次是ADMSC-Exos+X组。Masson分析显示，ADMSC-Exos组的胶原蛋白更为紧密，排列最为有序和连续。在XAV939处理组中，胶原蛋白的排列是无序的，比较粗糙和稀疏，上皮层的程度最小（图6C）。Fig.7ImmunohistochemicalanalysisafteruseofWNTpathwayinhibitor(XAV939).XAV939处理后，免疫组化平均光密度（AOD）分析显示，WNT2b蛋白在ADMSC-Exos中的表达量增加，高于ADMSCExos+X处理组、对照组和XAV939处理组，而XAV939处理组的表达量最低（图7A,C）；ADMSCExos组的β-catenin高于ADMSC-Exos+X处理组、XAV939处理组和对照组（图7B,D）。β-catenin在XAV939治疗组的表达水平是最低的。这些结果表明，XAV939阻断了伤口愈合过程中ADMSCExo