脱落细胞学检验（临床检验课件）

细胞病理学检验技术任务一脱落细胞形态识别概念脱落细胞学（exfoliativecytology）是采集人体各部位，特别是管腔器官表面的脱落细胞，经染色后用显微镜观察这些细胞的形态，并作出诊断的一门临床检验学科，又名诊断细胞学或临床细胞学。脱落细胞学历史

1928年，Papaniculaou首先提出用细胞学方法可以诊断肿瘤。1943年以后细胞学方法才逐渐得以推广。1970年以后已成常规。并开展细针吸取细胞学。近年来，有全自动化的液基细胞学涂片和电脑自动阅片从而提高了诊断率。脱落细胞学诊断的优势1.安全，病人痛苦少，无不良反应可多次重复取材；2.所需设备简单，操作方便，可用于普查；3.癌细胞检出率较高，一般在60%以上；4.采集的细胞代表范围较大。脱落细胞学诊断的不足

1.有一定的误诊率，有10-40%假阴性（恶性诊断为良性）和1-3%的假阳性（良性诊断为恶性）。2.往往不能确定肿瘤的具体部位，需结合活检或X线等确诊。3.有时不易对癌细胞做出明确组织分型。脱落细胞采集方法

1．自然排出物：体表体腔及各组织器官表面脱落的细胞均是2．体腔抽出液：胸腹腔积液等3．细针穿刺吸取液：囊肿等的抽取液正常脱落细胞形态1炎症增生脱落细胞形态2CONTENTS

肿瘤脱落细胞形态3标本采集与涂片制作4显微镜检查5脱落细胞学检查的

临床应用评价6正常脱落细胞形态01正常脱落的上皮细胞复层扁平上皮01基底层细胞：内底层细胞：1︰0.5-1外底层细胞：1︰1-203表层细胞角化前细胞：1︰3-5不全角化细胞：1︰5以上完全角化细胞：衰亡细胞02中层细胞1︰2-3

中底层细胞（HE）

外底层细胞（巴氏）

表层角化前细胞（巴氏）

表层完全角化细胞（HE）规律1.细胞体积由小到大2.胞核由大到小，最后消失3.核染色质由细致均匀到粗糙固缩4.核质比由大到小5.胞质量由少到多复层扁平上皮01基底层细胞：内底层细胞：1︰0.5-1外底层细胞：1︰1-203表层细胞角化前细胞：1︰3-5不全角化细胞：1︰5以上完全角化细胞：衰亡细胞02中层细胞1︰2-3柱状上皮01纤毛柱状上皮细胞：03储备细胞：02粘液柱状上皮细胞：粘液柱状上皮细胞

纤毛柱状上皮细胞及增生的形态01成团脱落的鳞状上皮基层细胞呈相嵌铺砖状02成团脱落的纤毛柱状上皮细胞常呈融合状03成团脱落的粘液柱状上皮细胞常呈蜂窝状脱落的上皮细胞团形态特点02脱落上皮细胞的退化变性01自然退变02涂片固定不及时。细胞从器官内粘膜表面脱落后，由于中断血液供应，缺乏氧气和养料，以及加上粘膜表面酶作用，很快发生变性直至坏死，称退化变性。常见于以下几种情况03固定不佳04有人为挤压01肿胀性退变：多见于急性炎症02固缩性退变脱落细胞退变分为肿胀性退变和固缩性退变两类：与细胞器和染色质脱水有关，表现：整个细胞变小，固缩变形。胞质染成红色。胞核染色质致密呈深蓝色，胞核与胞质之间形成空隙，称核周晕。最后胞核破裂成碎片或溶解为淡杂的核阴影，称影细胞03非上皮细胞成分

涂片中脱落的非上皮细胞成分又称背景成分。包括血细胞（红细胞和各种炎细胞）、粘液、坏死物及异物等。炎症增生脱落细胞形态01炎症时脱落细胞的一般形态特征上皮细胞的一般形态变化上皮细胞增生、再生、化生时的脱落细胞形态各类型炎症的脱落细胞特征上皮细胞的一般形态变化急性炎症时，上皮细胞主要表现为退化变性和坏死。慢性炎症时则主要表现增生、再生和化生、并有不同程度的退化变性。01细胞核：核肥大、核固缩、核碎裂02细胞形态：发生明显变异，如呈蝌蚪状、梭形、星形或不规则形鳞状上皮细胞

炎症时鳞状上皮细胞改变（巴氏）炎症时，纤毛柱状上皮细胞改变较明显，常可成排成片脱落，细胞以固缩退变为主。黄色：脓性精液，见于前列腺炎或精囊炎柱状上皮细胞病毒感染上皮细胞增生、再生、化生时的脱落细胞形态增生（hyperplasia）上皮细胞增生共同特点

鳞状上皮细胞增生①核增大，可见核仁；②胞质嗜碱性；③核与胞质比例略大；④核分裂活跃，可见双核、多核。纤毛柱状上皮细胞的增生鳞状上皮增生

柱状上皮增生再生参考值再生细胞核增大，染色深，见染色质结块，核仁增大增多，或见有丝分裂。胞质略嗜碱性。还可见增生活跃的基底层细胞定义：一种分化成熟转变为另一种分化成熟的细胞过程。柱状上皮的储备细胞增生，逐渐呈多边形，胞质丰富的鳞状上皮细胞分化再生和化生各类型炎症的脱落细胞特征涂片中除退变上皮细胞和坏死细胞碎屑外，尚见增生的上皮细胞，中性粒细胞、单核细胞、淋巴细胞及嗜酸粒细胞常同时存在亚急性炎症02上皮细胞常有明显退变，有较多坏死细胞碎屑、中性粒细胞和巨噬细胞。急性炎症01各类型炎症的脱落细胞特征由类上皮细胞、朗罕巨细胞和淋巴细胞以及干酪样坏死组成肉芽肿性炎症04涂片中较多成团的增生上皮细胞。炎症细胞则以淋巴细胞或浆细胞为主。慢性炎症03类上皮细胞朗罕巨细胞02核异质和角化不良的脱落细胞形态1．轻度核异质细胞：2．重度核异质细胞：指脱落的细胞的核异常，表现为核的大小、形态及染色质的分布异常，核边增厚，核的边界不整齐，细胞质的质和量的分化正常核异质轻度核异质细胞重度核异质细胞1．轻度核异质细胞：2．重度核异质细胞：系指鳞状上皮非角化层，即表面角化前细胞和中、底层细胞出现一些个别散在的胞质内角化细胞角化不良肿瘤脱落细胞形态肿瘤脱落细胞学主要是研究恶性肿瘤细胞的异型性，并以涂片中背景细胞作为对照比较，作出正确的判断。01恶性肿瘤细胞的一般形态特征恶性肿瘤细胞核异型性表现01核增大，大小不等02核染色质粗糙深染03核畸形04核与胞质比例失常-增加06核仁增大数目增多07核分裂增多及病理性核分裂05瘤巨细胞和多核巨细胞08裸核

癌细胞的各种异型性恶性肿瘤细胞质异型性表现胞质丰富，有特征性分化物质。高分化恶性肿瘤低分化恶性肿瘤恶性肿瘤细胞胞质肿瘤细胞分化愈差，其胞质愈少呈嗜酸碱性染色即红中带蓝。高分化腺癌低分化腺癌低分化鳞癌恶性肿瘤细胞胞质上皮细胞组织发生的恶性肿瘤可见成团脱落的癌细胞；间叶组织发生的恶性肿瘤，涂片中肉瘤细胞相对一致，散在分布癌细胞团腺癌恶性肿瘤涂片中常见较多坏死碎屑及红细胞，尚可发现多少不等的中性粒细胞涂片中背景成分02常见癌细胞的形态特征鳞状细胞癌分化较好的鳞癌细胞癌细胞胞浆呈多角形，内有角化。常见下列特征性形态：①蝌蚪形；②纤维形；③癌珠。

分化差的鳞癌细胞涂片中只见相当于中层和底层的癌细胞，多为圆形或不规则形，散在或成团分布。细胞小，胞质少。

蝌蚪形纤维形

腺

癌分化较好的腺癌细胞癌细胞体积较大，呈圆形、卵圆形，胞浆内含分泌物，成排脱落者可呈不规则的柱状分化差的腺癌细胞癌细胞体积较小，胞质少，核嗜碱性染色。成团脱落的细胞使整个癌细胞团呈桑椹状

食管腺癌细胞胃印戒癌细胞未分化癌1

大细胞型未分化癌2小细胞型未分化癌

03放射治疗后的细胞形态改变放射治疗的作用表现为分裂间期杀伤、丝状分裂期延迟、抑制染色体畸变和基因改变等四方面。细胞形态改变表现为细胞核增大、空泡变性、核碎裂和核溶解

核增大核碎裂

细胞空泡变性细胞多形性良性上皮细胞的放射性损伤急性放射性改变（1）细胞体积增大（2）核边增厚，核空泡变，核碎裂溶解。（3）形成多核或分叶核等畸形核上皮细胞持续性放射改变涂片中可发现核异质细胞，呈纤维或蝌蚪形，胞核与胞质比例仍在正常范围或略大癌细胞的放疗后改变o

癌细胞在放疗后主要为持续性改变，表现为胞质和胞核内空泡形成，继之出现胞质同质化，核碎裂和溶解放射敏感性、放疗反应和敏感反应放射敏感性分化愈差，癌细胞的放射敏感性愈高：高度敏感者：精原细胞瘤、甲状腺癌、恶性淋巴瘤、基底细胞癌等；中度敏感者：有鳞癌；低度敏感者：有各种腺癌；敏感度最差者：纤维肉瘤、骨肉瘤、恶性黑色素瘤等放疗反应放疗反应良好：放疗以后若有放射后改变的细胞达75%以上者。放疗反应差：放疗以后若有放射后改变的细胞在65%以下者。患者对放疗敏感，预后亦较好；患者对放疗不敏感，预后较差。标本采集与涂片制作401标本采集直视采集法身体直视部位直接用刮片刮取、吸管吸取、刷洗、刷取等取细胞制片自然分泌液的采集法痰液涂片检查：尿液涂片检查：乳头溢涂片检查：前列腺液涂片检查灌洗洗向空腔器官或腹腔、盆腔（剖腹探查时）灌注一定量生理盐水冲洗，使其细胞成分脱落于液体中，收集灌洗液离心制片，作细胞学检查

利用磨擦工具在病变部位磨擦，将擦取物直接涂片。常用磨擦工具有海棉磨擦器、线网套、气囊等。可分别用于鼻咽部、食管和胃部病灶的取材.磨擦法当有胸腔、腹腔、心包腔及关节腔积液时，可用针穿抽吸部分积液作细胞学检查。此外某些深部组织器官，如淋巴结、甲状腺、软组织、肝等亦可作细针穿刺吸取部分细胞进行涂片诊断针穿抽吸法02涂片制作方法Aoremipsumdolorsitamet准备工作Part101取材后尽快制片02避免挤压以防止损伤细胞.涂片前准备工作03涂片要均匀，厚薄要适度

.04玻片要清洁

.05涂片前先在玻片上涂薄层粘附剂.06至少涂两张玻片，以避免漏诊07及时玻片编号

.Boremipsumdolorsitamet制备方法Part11推片法用推片用30度夹角将玻片上检液轻轻向左推2涂抹法由玻片中心经顺时针方向外转圈涂抹；或从玻片一端开始平行涂抹3压拉涂片法将标本夹于横竖交叉的两张玻片之间，然后移动两张玻片，使之重叠，再边压边拉，获得两张涂片4吸管推片法5印片法将切取的病变组织用手术切开，立即将切面平放在玻片上，轻轻按印。此方法为活体组织检查的辅助方法涂片制备方法（4）：（5）：（6）6喷射法涂片的固定是保持细胞自然形态，防止细胞自溶和细菌所致的腐败固定的目的固定液能沉淀和凝固细胞内蛋白质和破坏细胞内溶酶体酶，使细胞保持自然形态，结构清晰，易于着色固定原理固定液、固定方法及固定时间细胞学检查常用的固定液有下列三种：（1）乙醚酒精固定液：该固定液渗透明性较强，固定效果好，适用于于一般细胞学常规染色。（2）氯仿酒精固定液：又称卡诺氏固定液。其优点同上。（3）95%酒精固定液：适用于大规模防癌普查。制备简单。但渗透作用稍差.固定液（1）带湿固定：适用于巴氏或HE染色。痰液、阴道分泌物及食管拉网涂片等。（2）干燥固定：适用于稀薄标本如尿液、胃冲洗液等。固定方法一般为15-30min固定时间Coremipsumdolorsitamet染色Part1是借助于一种或多种染料，使组织和细胞内结构分别着不同的染色染色的目的1染色的物理作用是利用毛细管现象，渗透、吸收和吸附作用，使染料的色素颗粒牢固地进入组织细胞，并使其显色。染色的化学作用是渗入组织细胞的染料与其相应的物质起化学反应，产生有色的化合物。组织细胞染色原理2染色的目的及组织细胞染色原理01巴氏染色法本法染色特点是细胞具有多色性颜色，色彩鲜艳多彩0203苏木精—伊红（HE）染色法该方法染色透明度好，核与胞质对比鲜明瑞特—吉姆萨染色法胞质内颗粒与核染色质结构显示较清晰。染色方法显微镜检查5检查涂片前必须严格核对涂片编号LOREM1了解送检单上填写的全部资料LOREM2阅片要全面、认真、细心,由面到点观察。LOREM3显微镜观察时必须按顺序视全张涂片，用推进器从左至右，自上而下移动LOREM4显微镜观察方法错误正确根据细胞学检查结果，直接写出关于疾病的诊断直接法1将涂片中细胞学检查发现的细胞变化，用分级方式表示。它的优点是能真实地反映细胞学所见。目前有三级、四级、和五级分级法3诊断报告方式三级四级Ⅰ级：阴性：无核异质细胞，涂片中均为正常细胞或一般退变细胞。Ⅱ级：可疑。涂片中发现核异质细胞，但不能肯定的是肿瘤细胞，应重复送检。Ⅲ级：阳性。涂片中发现典型癌细胞，有时根据癌细胞形态特征及分布，初步进行分类。将细胞学检查结果分为阴性、核异质，可疑和阳性四级。即见到什么描述什么，提出参考意见，但无明确诊断。用于非妇科细胞学标本和细针穿刺的细胞学标本描述性诊断法2135246标本采集阅片诊断

复查会诊制片过程理论学习定期随访细胞学诊断的质量管理体系脱落细胞学检查的

临床应用评价6安全，病人痛苦少，无不良反应可多次重复取材

所需设备简单，操作方便，可用于普查.癌细胞检出率较高，一般在60%以上

脱落细胞学诊断的优势采集的细胞代表范围较大4有时不易对癌细胞做出明确组织分型.LOREM3往往不能确定肿瘤的具体部位，需结合活检或X线等确诊.LOREM2有一定的误诊率，有10-40%假阴性（恶性诊断为良性）和1-3%的假阳性（良性诊断为恶性）

LOREM1脱落细胞学诊断的不足01020304.切实掌握正常、良性病变和恶性肿瘤细胞的形态特点必须结合临床无把握时应反复取材检查，诊断要客观无充分把握时，不可轻易下阳性的肯定诊断脱落细胞学的诊断原则05在实践中不断总结经验，提高诊断水平细胞病理学检验技术任务二阴道脱落细胞检查生殖系统正常脱落细胞形态1良性病变细胞形态学2CONTENTS

阴道上皮细胞与卵巢功能的关系3阴道炎症4生殖系统正常脱落细胞形态女性生殖道主要检查3种上皮:1.鳞状上皮，分布于阴道和宫颈外部；2.子宫颈粘膜上皮3.子宫内膜上皮01鳞状上皮细胞底层鳞状上皮细胞中层鳞状上皮细胞上层鳞状上皮细胞外底层细胞01宫颈型外底层细胞：胞质内有空泡，有时空泡环绕于核周，形成一透明环，特殊染色证实空泡内含糖原，胞质丰富蓝染。该型显示上皮细胞的增生状态。常见于青壮年女性的涂片。03萎缩型外底层细胞：细胞常散在，形态较一致，呈圆形或卵圆形。因胞质内不含糖原，内无或有时含小空泡。核圆形或卵圆形，较一致，染色质疏松。见于原发性闭经或绝经期女性的阴道涂片02中层细胞产后型外底层细胞：部分细胞体积较大。此型细胞核常受空泡挤压呈扁长形，多皱折、凹陷成瓢形。见于产妇或晚期流产患者阴道涂片

1内底层细胞2萎缩型外底层细胞3宫颈型外底层细4产后型外底层细胞5中层细胞6妊娠期中层细胞7角化前细胞8完全角化细胞中层鳞状上皮细胞若中层细胞呈船形，说明细胞质含大量糖原，巴氏染色成黄色，胞核被挤至细胞边缘，核大偏位，胞膜增厚，被称为“妊娠细胞”或“船形”细胞。见于妊娠及绝经早期。

1内底层细胞2萎缩型外底层细胞3宫颈型外底层细胞4产后型外底层细胞5中层细胞6妊娠期中层细胞7角化前细胞8完全角化细胞表层鳞状上皮细胞角化前细胞不全角化细胞胞质内含深褐色小颗粒，偶见大的、淡褐色包涵体，称为大圆点细胞（polka-dotcells）

卵巢雌激素促进阴道上皮分化成熟

表层底层02柱状上皮细胞子宫颈内膜细胞01子宫颈内膜细胞：又称粘液细胞。保存完好的细胞似杯状02纤毛柱状细胞：绝经后较多见。似蜂窝状

子宫内膜上皮细胞01基底层细胞02腺细胞子宫内膜上皮（常规涂片）

显示子宫内膜上皮细胞呈单层片状排列；细胞小，圆形，胞浆少；核小，染色较深。（取自功能性子宫出血涂片）良性病变细胞形态学01粘膜白斑：常发生于子宫颈，癌前病变。02正常：无核鳞状上皮细胞小于0.5%。03假性角化：涂片中出现大片形态不规则的小鳞状上皮鳞状上皮细胞鳞化细胞阴道上皮细胞与卵巢功能的关系阴道上皮受卵巢内分泌直接影响，其成熟程度与体内雌激素水平呈正相关:雌激素水平高时，涂片中有较多角化细胞，核致密深染；雌激素水平低时，涂片中出现小而圆或卵圆形，核疏松蓝染的底层细胞。因此，根据涂片中上皮细胞的变化可以评价卵巢的功能。雌激素水平对阴道脱落细胞影响雌激素水平脱落细胞变化临床意义1.极度低落阴道上皮萎缩变薄。脱落细胞以内底层细胞为主，核深见于老年人和卵巢切除患者2.高度低落以外底层细胞为主，混杂少数中层和表层细胞，粘液多。更年期、绝经后及轻妇女期卵巢功能缺如者。3.中度低落以中层细胞为主，其细胞拥护。更年期年纪大而未绝经者、年轻闭经者。4.轻度低落经钝角的角化前细胞为主5.轻度影响细胞全属表层月经后或接受小剂量雌激素治疗时。6.中度影响以角化前细胞为主，并有30-40%角化细胞排卵前期，接受中等量雌激素治疗7.高度影响角化细胞占60%左右，几乎无白细胞，背景清晰红蓝相间排卵期或接受大剂量雌激素治疗8.极度影响化细胞持续达60-70%。或角化细胞占90%宫内膜囊性增生、子宫内膜腺癌和子宫肌瘤等青春期女性在13-17岁，卵泡的发育渐趋成熟而导致正常生理变化，但在青春期内分泌系统尚未稳定，所以阴道涂片细胞无明显周期性改变性成熟期青春期后，卵巢发育成熟，阴道上皮随卵巢激素水平变化而发生周期性改变。更年期开始于45岁左右。雌激素水平低落，由于阴道上皮高度萎缩，抵抗力差，常伴有炎症。涂片中细胞多是内、外底层细胞，核深染，见较多中性粒细胞、巨噬细胞和红细胞。由于炎症刺激亦可见于增生与退变的中层、表层细胞和鳞状化生细胞女性各阶段的阴道脱落细胞表现1月经期持续