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脊髓损伤(SpinalcordinjurySCI)作为由于直接或间接原因所致的脊椎损伤后最要紧的并发使其在脊髓损伤诊治方面引起了学者们的注意。其中神经干细胞(neuralstemcells,NSCs)由于其特外泌体(Exosomes,Exos40-100nm,参SDSD100mm37℃,5%二氧化碳恒温培养箱中培养,24100g5min311BiologicalIndustriesDAPI21mL/5mL/20mL-80日本HirayamaEP31mm310min。300g5min,离心结束后弃掉上清,用含青-链霉素双抗的磷酸盐缓冲液重悬沉淀100g5min,弃上清,保留细胞沉淀进行下一步操作。31637℃,5min33min。8Cy3IgG(H+L50min(加入荧光二抗之后的操作步骤45minDAPI1NestinMusashi1SD100mm313生工生物工程(上海)BiologicalIndustries4日本HirayamaEPPBSPBS1L121℃高压灭菌锅进行灭菌处10000g30min120000g120min,得到的沉淀物质即为神经干细胞外泌体。随后将得到的神经干细胞外泌体放置于-80℃4℃条件下完成。100μL4%15min10030min5min33min,完成后于镜下进行观察。280nmCD63+%,CD9+%,CD81EpCAM+%95%以上,证明了外泌体的成功提取[2](2)。nm(3)。3透射电镜下神经干细胞外泌体的形态5外泌体的浓度(A280法SD671mL/5mL/20mLEP1L121℃高压灭菌8各组实验大鼠重量各只重量平均重量10[3]。2天内腹腔注射已配好的抗生素溶液预防感染(0.3mL/只)3次按压膀胱以促排尿,至BBB运动功能评分是指通过实验大鼠爬行,进而观察其躯干运动,后肢臀,膝,踝关节活动,以及两9。9BBB运动功能评分标准214%多聚甲5μm85%,95%5min5minI5minII5minIII5minI5minII5min染料后,0.13大鼠苏醒后呈明显卧位拖拉状行走姿势(4d)。4(A)脊髓击打器,(B)造模前,(C)造模后,(D)造模后大鼠活动状况103P>005;7P<005P>00P<005。10各组实验大鼠不同时间段BBB运动功能评分113714215各组大鼠不同时间段BBB运动功能评分变化趋势6各组脊髓组织切片苏木精伊红染色结果各组脊髓切片经尼氏染色后可见(7)。假手术组呈现蓝紫色的神经元数目较多,体积较大,且样本
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