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文档简介
瑞氏染色染色原理
将一小滴血液均匀涂在玻片上,呈单层紧密分布,制成薄血片。用含天青B和伊红的瑞氏染液进行染色。细胞中的碱性物质会与酸性染料伊红结合成红色;细胞中的酸性物质会与碱性染料亚甲兰结合染成蓝色;在中性颗粒与伊红和亚甲兰均可结合,染成淡紫红色。染色原理瑞氏染液亚甲兰+++伊红----碱性物质(Hb、嗜酸性颗粒)+++++酸性物质(淋巴细胞胞质嗜碱性颗粒)---------中性物质(中性颗粒)±±±±染色器材载玻片、推片、吸耳球、显微镜、酒精灯、采血针和EDTA-K2真空管试剂:瑞氏染液标本:EDTA-K2抗凝血Ⅰ液染液Ⅱ液磷酸盐缓冲液(PH)血压片的制备
良好的血涂片
1.厚薄适宜
2.头体尾要明显
3.细胞分要均匀
4.血膜边缘要整齐
5.留有一定空隙fastslow血压片的制备血压片的制备染色过程操作:1.静脉采血2.制作血涂片3.干燥涂片4.标记涂片5.染色6.观察结果1.将玻片平置于染色架上2.滴加染液Ⅰ液3-5滴,迅速盖满血涂片,0.5-1.0分钟3.滴加Ⅱ液(等量或稍多)4.用吸耳球吸匀,让两种液体充分混合,5-10分5.用流水冲去染液,待干染色过程染色结果注意事项1.瑞氏染液:要放置时间长,染液成熟。2.采血:不能使用肝素抗凝标本
玻片必须清洁干燥无尘使用玻片只能手持玻片边缘。3.制作涂片:角度、速度、血量4.干燥涂片:一定要干透后才可染色5.染色:染液要适量,冲洗时不能先倒掉染液,应以流水一起冲洗,时间不能过久,冲洗完的血涂片应立放于支架上。思考题:在缓冲液偏酸或偏碱的情况下,染色结果会有何变化?血红蛋白、嗜酸性颗粒、嗜碱性颗粒、染色质分别是酸性还是碱性?血涂片的制备血细胞分析仪能够快速的进行白细胞分类计数,但该法只是一种筛查的方法。
血涂片制备染色后显微镜检查是血细胞形态学检查的基本方法,对于各种血液病的诊断和鉴别诊断,具有重要价值。一、主要器材推片载玻片二、操作好涂片的标准1234两侧应该留有空隙边缘整齐头体尾分明厚薄适宜三、质量保证4无油腻3干燥2中性1清洁1玻片载玻片和推片应符合要求2标本未抗凝的毛细血管血或静脉血EDTA-K2抗凝静脉血可以用肝素抗凝抗凝血吗?3、制片①制备厚薄适宜的血涂片推片速度推片速度血滴大小②制备血膜分布均匀的血片A推片边缘不整齐C用力不匀B载玻片不清洁血膜分布不均010203血膜太短涂片质量问题角度大速度快可能原因调整推片的角度及推片的速度解决办法血涂片质量不佳的原因及解决办法血涂片质量不佳的原因及解决办法010203血膜太薄太长涂片质量问题角度小速度慢可能原因调整推片的角度及推片的速度解决办法血涂片质量不佳的原因及解决办法010203血膜太厚两边未留空隙涂片质量问题血量太大血滴展开太宽可能原因减少血量展开血滴时间不可太长解决办法血涂片质量不佳的原因及解决办法010203血膜不规则间断涂片质量问题推片用力不均匀推片与载玻片贴太紧可能原因推片与载玻片接触即可,不可贴太紧推片用力匀速均匀解决办法4.制片后处理制备好的血涂片应在一小时内染色3
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