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第三节

核酸的理化性质及其应用一、核酸的一般性质（一）两性电解质酸性：磷酸基碱性：碱基（二）紫外线吸收1.原因：

碱基（含共轭双键）2.最大吸收峰：260nm应用：判断核酸样品的纯度DNA纯品:OD260/OD280=1.8RNA纯品:OD260/OD280=2.0三、DNA的变性与复性1.定义：在某些理化因素作用下，DNA双链解开成两条单链的过程。2.因素：加热、高压、强酸、强碱以及某些有机溶剂如乙醇、丙酮等。（一）DNA的变性3.增色效应：DNA在变性过程中有更多的共轭双键得以暴露，使DNA在260nm处的吸光度增高。热变性

Tm：A260达到最大吸光度一半时的环境温度，又称融解温度(meltingtemperature,Tm)。G+C含量越高，Tm值越大。A260（二）DNA的复性1.DNA复性：

当变性条件缓慢的去处后，两条解离的互补链可重新配对，恢复原来的双螺旋结构。2.退火：

热变性后温度缓慢下降时，变性DNA的两条互补链可重新形成双螺旋。︱︱︱︱︱︱︱︱︱︱︱︱︱︱︱︱︱︱︱︱︱︱︱︱︱︱︱︱︱︱︱︱︱︱︱︱︱︱︱︱︱︱︱︱︱︱︱︱单链DNA双链DNA杂交双链变性复性核酸分子杂交原理示意图（三）核酸分子杂交不同来源的DNA单链之间或DNA与RNA单链之间，只要存在着一定程度的

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