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文档简介

1牛流感病毒抗体血凝抑制试验检测方法4仪器和材料水浴锅、单道及多道微量移液器、计时器、吸25.1阿氏（Alsevers）液，按照附录A.1配置。5.5禽流感病毒血凝素分型标准抗原、标准阳性血清、阴性血清。到吸附后的血清中，含原始血清20μL，则应加入80μ在37°C下，将RDE与牛血清的混合溶液孵育18-20小时。将血清样本在56°C水浴中如果需要更长时间的储存，需冷冻保存在-20°C或更低的温度下。6.2.1使用微量移液器在血凝板A观察红细胞有无泪珠状流淌，完全无泪珠状流淌（100%凝集）表明该抗原稀释度可导致红细胞全血凝，导致完全血凝的病毒最高稀释度即HA血36.3.1根据HA试验测定的效价配置4个血凝单位（即4HAU）病毒抗原。4HAU抗原应根据回滴检示例：配制的4HAU抗原需检査血凝价是否准确，将配制的25μL混匀。将血凝板在室温（20~25℃)静置30min或4℃60min，如果配制的抗原液为4HAU，6.3.4第1孔~第11孔均加入25μL4HAU抗原，在室温（20~25℃)静置30min或4℃60min。6.3.5每孔加入25μL1.0%（体积分数）鸡红细胞悬液，震荡混匀，在室温（20~25℃)静置30min7.1若样品无非特异性吸附，可不使用鸡红细胞预吸附去除非特异性凝集素。非特异性凝集检测的方7.21.0%（体积分数）的红细胞悬液可存在批4试剂配置A.1阿氏(Alsevers)液配制称取葡萄糖2.05g、柠檬酸钠0.8g、柠A.21.0%鸡红细胞悬液采集至少三只SPF鸡或无禽流感和新城疫等抗体的健康公鸡的血液与等体积阿氏液混合，用pH配成1%（体积分数）红细胞悬液，4取1×PBS，用氢氧化钠或盐酸调pH至7.2，灭菌或过滤除菌，PBS一经使用，于4℃保存不应超5有些牛血清可能对鸡红细胞产生非特异性凝集,可先用待检血清做检测,如果待检血清出现红细胞凝集现象,则说明有非特异凝集因子存在,宜按6.1.B.2.5在室温(22°C至25°C6[3]WOAHTerrestrialManual2023CHAPTE[4]YuJ,WenZ,HuW,ChenM,ZhangY,LiuS,WangG,WangZ,WangD,ZhaiSL,WeiWK,LiT,LiaoM.InfluenzaDvirusinfectioninChdoi:10.1080/2222175

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