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文档简介

DNA的变性和复性延迟符号分类分类核酸的变性、复性与分子杂交1、定义：在某些理化因素作用下，DNA双链解开成两条单链的过程。变性因素：过量酸，碱，加热，变性试剂如尿素、酰胺以及某些有机溶剂如乙醇、丙酮等。（一）核酸的变性考点DNA变性的本质是双链间氢键的断裂2、变性后理化性质变化OD260增高（增色效应）粘度下降沉降速度增加生物学功能部分或全部丧失增色效应

核酸变性后，260nm的紫外吸收值明显增加，称增色效应。考点解链曲线：如果在连续加热DNA的过程中以温度对A260（A260代表溶液在260nm处的吸光率）值作图，所得的曲线称为解链曲线。

加热DNA的稀盐溶液，达到一定温度(80～100℃)后，核酸即发生热变性。热变性是核酸的重要性质。解链曲线3、DNA的热变性考点Tm：变性是在一个相当窄的温度范围内完成，在这一范围内，紫外光吸收值达到最大值的50%时的温度称为DNA的解链温度，又称融解温度(meltingtemperature,Tm)。一般DNA的Tm值在70～85

C之间。DNA的Tm值主要与分子中的G和C的含量有关。融解温度Tm

Tm值为PCR反应退火温度的重要参考依据，退火温度比Tm值低5～10℃。考点（二）核酸的复性

在适当条件下，变性DNA的两条互补链可恢复天然的双螺旋构象，这一现象称为复性。减色效应：DNA复性时，其溶液OD260降低。热变性的DNA经缓慢冷却后即可复性，这一过程称为退火。考点考点

将不同来源的DNA经热变性后，降温，使其复性，在复性时，异源DNA单链之间具有一定的互补序列，它们就可结合形成杂交的DNA分子，DNA与互补的RNA之间也能形成杂交分子这一过程称为核酸分子杂交。（三）核酸的分子杂交

核酸分子杂交的应用研究DNA分子中某一种基因的位置测定两种核酸分子间的序列相似性检测某些专一序列在待检样品中存在与否是基因芯片技术的基础点滴积累1.核酸具有紫外吸收特性，其最大吸收峰在260nm。2.Tm值的大小与G、C含量成正比关系。3.核酸杂交技术用于定性、定量检测目标DNA或RNA片段，在基因结构分析、基因定位、遗传病诊断等方面应用广泛。核酸的紫外吸收延迟符号分类分类一、核酸的一般理化性质分子量大，两性电解质，通常表现为酸性。DNA为白色纤维状固体；RNA为白色粉末状固体。溶解性：均微溶于水；不溶于一般有机溶剂，在70%乙醇中形成沉淀。粘度：DNA粘度很大，而RNA粘度小得多。DNA对碱稳定，而RNA被稀碱水解。二、核酸的紫外吸收性质

碱基具有共轭双键，因此具有紫外吸收性质，其吸收高峰接近260nm。

DNA紫外吸收

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