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DB21辽TechnicalRegulationforGermplasmidentificationofRhopilemaesculentum辽宁省市场监督管理局发布I本文件主要起草人：李云峰、李玉龙、周遵春、鲍相渤、陈百灵、陈井童、田梅1海蜇种质鉴定技术规范GB/T18654.2养殖鱼类种质检验第2部分GB/T18654.12养殖鱼类种质检验第12部分：染色体组型刺胞动物门（Cnidaria）、钵水母纲（Scyphomedusa5.2形态特征胃膜、口柱连为一体。伞体部表面光滑，呈半25.3.1性成熟5.3.2怀卵量性腺发育情况，当卵子直径在80μm~100μm可进行繁殖，统计每个雌性海蜇的怀5.4细胞遗传学特性检测5.4.2核型35.5分子遗传学特征取海蜇口腕部200mg，用DNA提取试剂盒或CTAACTGATACACTGATTGACGTACTGACAATCTGATTGTCTGTCGTCTGTCGCTTGCTTGTGCAGCAGCTTATGCAGCAGCTGACACAACACGACCACTGTGAACTTGTACCATCCGTGTGAGGTGGACAGAGCTGCGTGTGTCTGTCCTTGCATGAAGAGCACCTCCCTCGTGTGTCTATCTCTTCGGCCTCACATTGGAGCTATTTTGTTGGTTGTTTTTGCTGCCATTTTTAACACGTTATTATATTATACAAATTG4GCACACGCACCAGAAGAGACGTTCGCTCGTTCGCTCGTTCGTTTGTCTCTTGCTGTATACGTGTGGCTAGCGATAAAACAAAACAAGAAACAACTTCCAACGGTGGATCTCTTGGCTCGTGCATCGATGAAGAACGCAGCCAGCTGCGATATGTAGTGTGAATTGCAGAACCCAGCGAATCATCGAATCTTTGAACGCAAATGGCGCTCCTTGGTTCTCCATGGAGCACGTCTGTCTGAGCGTCATGGCCAATCAATCCCAATAGCACACGCTCTTCTGCAAAGAGAGGAGCATGTGGCGTTGAGGCAACACGGCGTTGATGACGGACATCAGCCATCAACTGATGC符合第5章要求，且COI基因序列测序结果与5.5.4节比对结果相似度在98%以上，判5A.2低渗：将细胞悬液于1000rpm/min离心10min，去除上清后加入0.075mol/L的KCl溶液，27℃低渗A.4解离：-20℃中取出已经固定好的细胞悬液，离心去上清，加入预冷的50%冰醋酸1-2滴进行解离A.5滴片：将细胞悬液在距冰冻载玻片上1m左右的高A.6染色：将载玻片置于现配置的10%Giemsa（pH=6.8）染缸内染色30min，用蒸馏水冲洗干净，或将载玻片用DAPI染色，封片，染色24h，-20℃A

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