DB51T 2166-2016 微生物检测领域培养基和试剂验证指南　

DB51DB51/T2166—2016微生物检测领域培养基和试剂验证指南2016-05-18发布2016-10-01实施四川省质量技术监督局发布I 1 1 1 3 4 7 9 1DB51/T2158实验室服务和供应品注2：倾注到平皿内的固体培养基一般称之为“平板”；倒入试管并摆放注：运输培养基中通常不允许包含使微生物增殖的物质，但是培养基应能保护菌株。典型的运输培养基如缓冲甘2选择性增菌培养基selectiveenric非选择性增菌培养基non-selectiveenri鉴别培养基(特异性培养基)differentia3通常用于培养基性能测试的微生物。注：国家标准中提到的培养基通常可以直接使用。但因其中一些培养基成分(4.2.2实验室应按批量的不同，选择适量的培养基在适当条件下培养，检测其微生物污染。通44.2.3生长特性要求包括生长率、选择性、生化特性。实验室应根据培养基或试剂的用途，选4.2.4对不含指示剂和选择剂的培养基，通常只需采用测试菌株进行生长率测试；对含有选择剂的培注1：采用定量方法时，应使用参考培养基进行对照；采用半定量和定性方法时，使用参考培养基或能得到“阳性”结果的培养基进行对照有助于结果的解释。参考培养基应选择近期批次中质量良好的培养基或是来自其他供注2：试菌株具有其代表种的稳定特性，是能有效证明实验室特定培养基最佳性能的一套菌株。测试菌株主要购置于标准菌种保藏中心，也可以是实验室自己分离的具有良好特性的菌株。测试菌株的来源应尽量与检测对象注3：测试菌株通常需要采用组合菌株进行验证，如具典型反应特性的生长良好的阳性菌株；弱阳性菌株（对培养基中选择剂等试剂敏感性强的菌株）；不具有该特性的阴性菌株；部分或完全受抑制的菌株，使用这四类菌通常要加入18mL～20mL琼脂培养基），冷却至47℃~50℃后添加试剂。倾注后将平板放c)选择合适稀释度的工作菌悬液0.1mL，均匀涂布接种于待测注：参比培养基的选择，一般细菌采用TSA，一般霉菌和酵母采用沙氏葡萄糖琼脂，对营养有特殊要求的微生物采5e)要求目标菌在培养基上应呈现典型的生长形态。对于非选择性固体培养基、选择性计数固体培养基上目标菌的生长率应不小于0.7；选择性分离固体培养基上目标菌的生长率一般不小于5.2.2保藏培养基、运输培养基和d)剩余已接种菌液的待测培养基置20℃~25℃放置45min后，再吸取1mL倾注平板，每管b)将测试菌株接种到非选择性肉汤培养过夜或采用其他6f)对于选择性增菌培养基，划线接种后，目标菌在选择性平板上的菌落应>10CFU。无选择性的液体培养基和选择性计数液体培养基，浊度值应为2,且有目标菌的生长特征。如乳糖胆盐培养基，产气应为1/3或以上。当实验室采用商品化即用型固体培养基，以及使用新批次的商品化脱水合成培养基时，可采用半定量测试方法，按下列程序进行评价：a)按照5.1.1.a)的要求制备与保存平板。b)将标准储备菌株接种到非选择性肉汤培养过夜，此为工作菌悬液。按0.5cm的间隔划4条平行线，再在D区域内划一条连续的曲线。可在培养皿下面放一个模板图，以便于准确划线。按同样的方法同时接种两个平板，按检测方法规定的培养条件培养。菌落生长，则此划线的G值记为1;如果划线上仅一半有稠密菌落生长，则G值为0.5;如果划线上没有菌落生长，或生长量少于划线的一半，或菌落生长微弱，则G值为0。在培养皿上G值为10。d)目标菌在培养基上应呈现典型的生长，且目标菌的生长指数G大于或等于6时，培养基可接受。本方法通常作为液体培养基的补充测试。当实验室使用商品化即用型液体培养基，以及使用新批次的商品化脱水合成培养基时，可采用本方法进行测试。5.4.2增菌培养基7注：有时可以观察到微生物生长后聚集成细胞团，沉积在试管或瓶子底部5.4.3保藏培养基、运输培养基和剩余已接种菌液的待测培养基置于20℃~25℃环境中8图2非目标菌半定量划线法接种模式图d)培养后计算培养基的生长指数G。划线上有比较稠密菌落生长，则此划线的G值为1。培养皿上有6条线，故G值最多为6。如果划线上仅一半有稠密菌落生长，则G值为0.5。如果划线上没有菌落生长，或生长量少于划线的一半，或菌落生长微弱，则G值为0。记录每个平板的得分总和便得到G值。e)非目标菌的生长指数G值一般小于或等于1,最多不大于5。6.2.2液体培养基按下列程序测试液体培养基的选择性：将培养基分装试管，每管10mL。按5.2.1b)的要求制备工作菌悬液。在装有待测培养基的试管中接种1000CFU~5000CFU非目标菌，接种量为1mL,同时接种两个平行管，混匀。同时将1mL菌悬液(比试管接种小10~100倍稀释度)倾注平板，接种两个平板，作接种量计数用。按检测方法中规定的培养时间和温度进行培养。吸取10μL经培养后的非目标菌培养液，均匀涂布接种到非选择性平板(如TSA)上。同时每管接种一个平板。可使用倾注法进行接种，并按标准规定的培养条件培养平板。该步骤仅针对选择性增菌液体培养基。对平板进行目标菌计数或目测培养液浊度值。非目标菌在非选择性平板上的菌落数应<100CFU或非目标菌的浊度值应为0或1且无产气等现象。6.3定性方法6.3.1本方法可作为液体培养基的补充测试。当实验室使用商品化即用型液体培养基或采用新批次商品化脱水合成培养基产品时，可采用本方法进行测试。6.3.2培养基的制备将培养基分装试管，每管10mL。本步骤不适用于商品化即用培养基。6.3.3工作菌悬液的制备按照5.3.1b)的要求进行。6.3.4接种按照5.3.1c)的要求进行。6.3.5结果观察目测其浊度值：0表示无混浊；1表示很轻微的混浊；2表示严重的混浊。6.3.6结果解释非目标菌的浊度值应为0或1。选择性液体计数培养基还应无产气现象。97.2.2.1平板的制备与保存,按照5.2.1a)的要求进行。本步骤不7.3.1.2工作菌悬液的制备,将标准储备菌株接种注1：高层斜面培养基，取新鲜质控菌株斜面，用接种针挑取菌苔穿刺接注2：斜面培养基，取新鲜质控菌株斜面，用接种环挑取菌苔在斜面上划“之将纯度满意的质控菌株培养物悬浮于TSB肉汤中，并调整浊度为0.5麦氏标准（约1×108CFU％～取干净玻片，在玻片上划出2个约1cm×2cm的区域，用接种环挑取1环测试菌株，各放1/2在无反射黑色背景下，观察有无凝集现象。任何程度的凝集现象皆为阳性反应.大肠埃希氏菌Escherichiacoli单核细胞增生李斯特氏菌Listeri福氏志贺氏菌Shigellaflexne痢疾志贺氏菌Shigelladysenteriae小肠结肠炎耶尔森氏菌Yersiniaente宋内志贺氏菌Shigellasonnei弗氏柠阪崎肠杆菌Enterobactersakazakii婴儿双产气肠杆菌Enterobacteraerogenes德氏乳杆菌保加利亚亚种Lactobacillusdelbrueckii肺炎克雷伯氏菌Klebsiellapneumoniae粪产碱杆菌Alcaligene伤寒沙门氏菌Salmonellatyphi植物乳杆菌Lactobacillus鼠伤寒沙门氏菌Salmonellatyphimur肠炎沙门氏菌Salmonellaen金黄色葡萄球菌Staphylococ表皮葡萄球菌Staphylococcusepidermidis艰难梭菌Clostridium嗜热链球菌Streptococcusthermophilus酿酒酵母Sac胰蛋白胨大豆琼脂固体非选择性分离生长率36℃±1℃24h±2h大肠埃希氏菌ATCC25922TSA定量PR≥0.7—粪肠球菌ATCC29212 MC培养基固体非选择性计数生长率36℃±1℃48h±2h嗜热链球菌IFFI6038MC培养基定量PR≥0.7中等偏小，边缘光滑的红色菌落，可有淡淡的晕MRS培养基固体非选择性计数生长率36℃±1℃48h±2h德氏乳杆菌保加利亚亚种CICC6032MRS培养基定量PR≥0.7无色不透明嗜热链球菌IFFI6038无色不透明婴儿双歧杆菌CICC6069(厌氧培养）圆形，中等大小，边缘整齐，瓷3%氯化钠胰蛋白胨大豆琼脂（TSA)固体非选择性分离生长率36℃±1℃18h～24h副溶血性弧菌ATCC178023%氯化钠TSA定量PR≥0.7无色半透明菌落创伤弧菌落ATCC27562营养琼脂固体非选择性分离生长率36℃±1℃24h大肠埃希氏菌ATCC25922TSA定量PR≥0.7 金黄色葡萄球菌ATCC6538枯草芽胞杆菌ATCC6633含0.6%酵母浸膏的胰酪胨大豆琼脂（TSA-YE)固体非选择性分离生长率30℃±1℃24h～48h单核细胞增生李斯特氏菌ATCC19115TSA定量PR≥0.7 平板计数琼脂固体非选择性计数生长率36℃±1℃48h±2h大肠埃希氏菌ATCC25922TSA定量PR≥0.7—金黄色葡萄球菌ATCC6538枯草芽胞杆菌ATCC6633亚硫酸铋琼脂固体选择性分离生长率36℃±1℃40h～48h伤寒沙门氏菌CMCC(B)50071TSA定量PR≥0.5黑色菌落，有金属光泽鼠伤寒沙门氏菌ATCC14028黑色或灰绿色菌落，有金属光泽选择性大肠埃希氏菌ATCC25922—半定量G≤1—粪肠球菌ATCC29212HE琼脂固体选择性分离生长率36℃±1℃18h～24h鼠伤寒沙门氏菌ATCC14028TSA定量PR≥0.5绿-蓝色菌落，有黑心福氏志贺氏菌CMCC(B)51572绿-蓝色菌落选择性大肠埃希氏菌ATCC25922 半定量G＜5橙红色菌落，可有胆酸沉淀粪肠球菌ATCC29212G≤1 木糖赖氨酸脱氧胆盐琼脂（XLD)固体选择性分离生长率36℃±1℃18h～24h鼠伤寒沙门氏菌ATCC14028TSA定量PR≥0.5黑色菌落福氏志贺氏菌CMCC(B)51572无色菌落，无黑心选择性大肠埃希氏菌ATCC25922—半定量G＜5黄色菌落金黄色葡萄球菌ATCC6538G≤1—沙门氏菌显色培养基固体选择性分离生长率36℃±1℃18h～24h鼠伤寒沙门氏菌ATCC14028TSA定量PR≥0.5按说明书判定特异性大肠埃希氏菌ATCC25922—定性—按说明书判定奇异变形杆菌CMCC(B)49005—按说明书判定选择性粪肠球菌ATCC29212半定量G≤1PALCAM琼脂固体选择性分离生长率36℃±1℃24h～48h单核细胞增生李斯特氏菌ATCC19115TSA定量PR≥0.5灰绿色菌落，中心凹陷黑色，周围有黑色选择性大肠埃希氏菌ATCC25922—半定量G≤1—粪肠球菌ATCC29212麦康凯琼脂(MAC)固体选择性分离生长率36℃±1℃20h～24h大肠埃希氏菌ATCC25922TSA定量PR≥0.5鲜桃红色或粉红色，可有胆酸沉淀福氏志贺氏菌CMCC(B)51572无色至浅粉红色，半透明棕色或绿色菌落选择性金黄色葡萄球菌ATCC6538—半定量G≤1—类阪崎肠杆菌显色培养基固体选择性分离特异性36℃±1℃24h±2h阪崎肠杆菌ATCC29544TSA定量PR≥0.5按说明书判定特异性普通变形杆菌CMCC(B)49027—定性 按说明书判定大肠埃希氏菌ATCC25922—按说明书判定选择性粪肠球菌ATCC29212半定量G≤1 CIN-I培养基固体选择性分离生长率26℃±1℃48h±2h小肠结肠炎耶尔森氏菌CMCC(B)52204TSA定量PR≥0.5红色牛眼状菌落特异性大肠埃希氏菌ATCC25922-定性-圆形、粉红色菌，边缘有胆汁沉淀环选择性金黄色葡萄球菌ATCC6538半定量G≤1-改良Y培养基固体选择性分离生长率26℃±1℃48h±2h小肠结肠炎耶尔森氏菌CMCC(B)52204TSA定量PR≥0.5无色透明不粘稠菌落特异性大肠埃希氏菌ATCC25922-定性-粉红色菌落选择性金黄色葡萄球菌ATCC6538半定量G≤1-伊红美蓝琼脂（EMB)固体选择性分离生长率36℃±1℃18h～24h大肠埃希氏菌ATCC25922TSA定量PR≥0.5黑色菌落，具金属光泽特异性鼠伤寒沙门氏菌ATCC14028-定性-菌落呈无色，半透明选择性金黄色葡萄球菌ATCC6538-半定量G＜5-改良山梨醇麦康凯琼脂（CT-SMAC)固体选择性分离生长率36℃±1℃18h～24h大肠埃希氏菌O157：H7NCTC12900TSA定量PR≥0.5无色菌落特异性大肠埃希氏菌ATCC25922-定性-粉红色菌落，周围有胆盐沉淀选择性金黄色葡萄球菌ATCC6538半定量G≤1-类O157显色培养基固体选择性分离生长率36℃±1℃18h～24h大肠埃希氏菌O157：H7NCTC12900TSA定量PR≥0.5按说明书判定特异性大肠埃希氏菌ATCC25922-定性-按说明书判定选择性粪肠球菌ATCC29212半定量G≤1-奇异变型杆菌CMCC(B)49005-半定量G≤1-李斯特氏菌显色培养基固体选择性分离生长率36℃±1℃24h～48h单核细胞增生李斯特氏菌ATCC19115TSA定量PR≥0.5蓝绿色菌落，带白色晕环特异性英诺克李斯特氏菌ATCC33090-定性-蓝绿色菌落，无白色晕环选择性大肠埃希氏菌ATCC25922半定量G≤1-粪肠球菌ATCC29212志贺氏菌显色培养基固体选择性分离生长率36℃±1℃20h～24h福氏志贺氏菌CMCC(B)51572TSA定量PR≥0.5白色，突起，无色素沉淀圈痢疾志贺氏菌CMCC(B)51105白色，突起，有清晰环，无色素沉淀圈特异性大肠埃希氏菌ATCC25922-定性-黄色，有清晰环，无色素沉淀圈产气肠杆菌ATCC13048绿色菌落，无环和沉淀圈选择性金黄色葡萄球菌ATCC6538半定量G≤1-改良CCD(mCCD)琼脂固体选择性分离生长率42℃±1℃24h～48h微需氧空肠弯曲菌ATCC33291无抗生素的CCD定量PR≥0.5菌落有光泽、潮湿、扁平，呈扩散生长倾向选择性42℃±1℃24h～48h大肠埃希氏菌ATCC25922-半定量G≤1-金黄色葡萄球菌ATCC6538Skirrow琼脂固体选择性分离生长率42℃±1℃24h～48h微需氧空肠弯曲菌ATCC33291无抗生素的CCD定量PR≥0.5菌落灰色、扁平、湿润有光泽，呈沿接种线向外扩散倾向选择性42℃±1℃24h～48h大肠埃希氏菌ATCC25922-半定量G≤1-金黄色葡萄球菌ATCC6538改良纤维二糖-多粘菌素B-多粘菌素E(mCPC)琼脂固体选择性分离生长率39.5℃±0.5℃或36℃±1℃18h～24h创伤弧菌ATCC275623%氯化钠TSA定量PR≥0.1圆型扁平，中心不透明，边缘透明的黄色菌落特异性霍乱弧菌VBO-定性-紫色菌落选择性副溶血性弧菌ATCC17802半定量G≤1-纤维二糖－多粘菌素E(CC)琼脂固体选择性分离生长率39℃~40℃或36℃±1℃18h～24h创伤弧菌ATCC275623%氯化钠TSA定量PR≥0.5圆型扁平，中心不透明，边缘透明的黄色菌落特异性霍乱弧菌VbO-定性-紫色菌落选择性副溶血性弧菌ATCC17802半定量G≤1-硫代硫酸钠-柠檬酸盐-胆盐-蔗糖琼脂（TCBS）固体选择性分离生长率36℃±1℃18h～24h副溶血性弧菌ATCC178023%氯化钠TSA定量PR≥0.2绿色菌落选择性大肠埃希氏菌ATCC25922-半定量G≤1-弧菌显色培养基固体选择性分离生长率36℃±1℃18h～24h副溶血性弧菌ATCC178023%氯化钠TSA定量PR≥0.5按说明书判定特异性霍乱弧菌VbO-定性-按说明书判定溶藻弧菌ATCC33787按说明书判定选择性大肠埃希氏菌ATCC25922-半定量G≤1-类Baird-Parker固体选择性计数生长率36℃±1℃18h～24h或45h~48h金黄色葡萄球菌ATCC25923TSA定量PR≥0.7菌落黑色凸起，周围有一混浊带，在其外层有一透明圈特异性表皮葡萄球菌CMCC(B)26069-定性-黑色菌落，无混浊带和透明圈选择性大肠埃希氏菌ATCC25922-半定量G≤1-结晶紫中性红胆盐琼脂（VRBA）固体选择性计数生长率36℃±1℃18h～24h大肠埃希氏菌ATCC25922TSA定量PR≥0.7有或无沉淀环的紫红色或红色菌落弗氏柠檬酸杆菌ATCC43864选择性粪肠球菌ATCC29212-半定量G＜5-VRB-MUG琼脂固体选择性计数生长率36℃±1℃18h～24h大肠埃希氏菌ATCC25922TSA定量PR≥0.7带有沉淀环的紫红色或红色菌落，有荧光特异性弗氏柠檬酸杆菌ATCC43864-定性-可带有沉淀环的红色菌落，无荧光选择性粪肠球菌ATCC29212半定量G＜5-马铃薯葡萄糖琼脂（PDA）固体选择性计数生长率28℃±1℃5d酿酒酵母ATCC9763沙氏葡萄糖琼脂定量PR≥0.7奶油色菌落黑曲霉ATCC16404白色菌丝，黑色孢子选择性大肠埃希氏菌ATCC25922-半定量G≤1-金黄色葡萄球菌ATCC6538孟加红培养基固体选择性计数生长率28℃±1℃5d酿酒酵母ATCC9763沙氏葡萄糖琼脂定量PR≥0.7奶油色菌落黑曲霉ATCC16404白色菌丝，黑色孢子选择性大肠埃希氏菌ATCC25922-半定量G≤1-金黄色葡萄球菌ATCC6538莫匹罗星锂盐（Li-Mupirocin）改良MRS培养基固体选择性计数生长率36℃±1℃48h±2h厌氧培养婴儿双岐杆菌CICC6069MRS培养基定量PR≥0.7圆形凸起，边缘整齐，无色不透明选择性德氏乳杆菌保加利亚亚种CICC6032-半定量G≤1-嗜热链球菌IFFI6038甘露醇卵黄多粘菌素琼脂（MYP）固体选择性计数生长率30℃±2℃24h～48h蜡样芽胞杆菌CMCC(B)63303TSA定量PR≥0.7菌落为微粉红色，周围有淡粉红色沉淀环特异性枯草芽胞杆菌ATCC6633-定性-黄色菌落，无沉淀环选择性大肠埃希氏菌ATCC25922半定量G≤1-胰胨-亚硫酸盐-环丝氨酸琼脂(TSC)固体选择性计数生长率36℃±1℃20h～24h厌氧培养产气荚膜梭菌ATCC13124TSA定量PR≥0.7黑色菌落选择性艰难梭菌ATCC43593-半定量G≤1-含0.6%酵母浸膏的胰酪胨大豆肉汤（TSB-YE）液体非选择性增菌生长率30℃±1℃24h～48h单核细胞增生李斯特氏菌ATCC19115TSA半定量混浊度2液体硫乙醇酸盐培养基（FTG）液体非选择性增菌生长率36℃±1℃18h～24h产气荚膜梭菌ATCC13124哥伦比亚琼脂半定量混浊度2缓冲蛋白胨水（BP）液体非选择性增菌生长率36℃±1℃8h鼠伤寒沙门氏菌ATCC14028TSA半定量取10µL增菌液倾注TSA平板36℃±1℃培养18h～24h，在TSA上＞100CFU脑心浸出液肉汤（BHI）液体非选择性增菌生长率36℃±1℃18h～24h金黄色葡萄球菌ATCC6538TSA半定量混浊度2布氏肉汤液体非选择性增菌生长率42℃±1℃48h±2h微需氧空肠弯曲菌ATCC33291无抗生素的CCD半定量混浊度1～2标李氏增菌肉汤（LB1,LB2)液体选择性增菌生长率30℃±1℃24h单核细胞增生李斯特氏菌ATCC19115+大肠埃希氏菌ATCC25922+粪肠球菌ATCC29212TSA半定量（LB2目标菌接种量为300CFU~500CFU）在PALCAM上>10CFU，培养基变黑灰色至黑色菌落带有黑色晕环选择性大肠埃希氏菌ATCC25922在TSA上<100CFU-粪肠球菌ATCC29212Bolton肉汤液体选择性增菌生长率42℃±1℃24h～48h微需氧培养空肠弯曲菌ATCC33291+金黄色葡萄球菌ATCC6538+大肠埃希氏菌ATCC25922无抗生素的CCD半定量空肠弯曲菌在改良CCD平板上＞10CFU菌落呈灰白色选择性金黄色葡萄球菌ATCC6538TSA在TSA上<100CFU-大肠埃希氏菌ATCC25922四硫磺酸钠煌绿增菌液（TTB）液体选择性增菌生长率42℃±1℃18h～24h鼠伤寒沙门氏菌ATCC14028+大肠埃希氏菌ATCC25922+铜绿假单胞菌ATCC27853TSA半定量在XLD上＞10CFU菌落无色半透明，有黑心选择性大肠埃希氏菌ATCC25922在TSA上<100CFU-粪肠球菌ATCC29212亚硒酸盐胱氨酸增菌液（SC）液体选择性增菌生长率36℃±1℃18h～24h鼠伤寒沙门氏菌ATCC14028+大肠埃希氏菌ATCC25922+铜绿假单胞菌ATCC27853TSA半定量在XLD上＞10CFU菌落无色半透明，有黑心选择性大肠埃希氏菌ATCC25922在TSA上<100CFU-粪肠球菌ATCC2921210%氯化钠胰酪胨大豆肉汤液体选择性增菌生长率36℃±1℃18h～24h金黄色葡萄球菌ATCC6538+大肠埃希氏菌ATCC25922TSA半定量在Baird-Parker上＞10CFU菌落黑色凸起，周围有一混浊带，在其外层有一透明圈选择性大肠埃希氏菌ATCC25922在TSA上<100CFU-7.5%氯化钠胰酪胨大豆肉汤液体选择性增菌生长率36℃±1℃18h～24h金黄色葡萄球菌ATCC6538+大肠埃希氏菌ATCC25922TSA半定量在Baird-Parker上＞10CFU菌落黑色凸起，周围有一混浊带，在其外层有一透明圈选择性大肠埃希氏菌ATCC25922在TSA上<100CFU-改良磷酸盐缓冲液液体选择性增菌生长率26℃±1℃48h～72h小肠结肠炎耶尔森氏菌CMCC(B)52204+粪肠球菌ATCC29212+铜绿假单胞菌ATCC27853TSA半定量在改良Y平板上>10CFU菌落圆形、无色透明，不粘稠选择性金黄色葡萄球菌ATCC6538在TSA上<100CFU-粪肠球菌ATCC29212改良月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤-万古霉素液体选择性增菌生长率44℃±0.5℃24h±2h阪崎肠杆菌ATCC29544+大肠埃希氏菌ATCC25922+粪肠球菌ATCC29212TSA半定量在阪崎肠杆菌显色培养基上＞10CFU绿－蓝色菌落或按说明书判定选择性大肠埃希氏菌ATCC25922在TSA上<100CFU-粪肠球菌ATCC29212胰酪胨大豆多粘菌素肉汤液体选择性增菌生长率30℃±1℃24h～48h蜡样芽胞杆菌CMCC(B)63303+大肠埃希氏菌ATCC25922TSA半定量在MYP上＞10CFU菌落为微粉红色，周围有淡粉红色沉淀环选择性大肠埃希氏菌ATCC25922在TSA上<100CFU-志贺氏菌增菌肉汤（Shigellabroth）液体选择性增菌生长率41.5℃±0.5℃18h±2h厌氧培养福氏志贺氏菌CMCC（B）51572+金黄色葡萄球菌ATCC6538金黄色葡萄球菌ATCC6538TSA半定量在XLD上＞10CFU无色至粉红色，半透明菌落选择性在TSA上<100CFU标基GN增菌液液体选择性增菌生长率36℃±1℃8h福氏志贺氏菌CMCC（B）51572+粪肠球菌ATCC29212TSA半定量在HE琼脂上＞10CFU菌落呈绿－蓝色选择性粪肠球菌ATCC29212在TSA上<100CFU-3%氯化钠碱性蛋白胨水液体选择性增菌生长率36℃±1℃8h副溶血性弧菌ATCC17802+大肠埃希氏菌ATCC259223%TSA半定量在弧菌显色培养基平板上＞10CFU品红色菌落或按说明书判定选择性大肠埃希氏菌ATCC25922TSA在TSA上<100CFU-改良EC肉汤（mEC+n）液体选择性增菌生长率36℃±1℃18h～24h大肠杆菌O157：H7NCTC12900+粪肠球菌ATCC29212TSA半定量在CT-SMAC上＞10CFU菌落无色，中心灰褐色选择性粪肠球菌ATCC29212在TSA上<100CFU-改良麦康凯（CT-MAC）肉汤液体选择性增菌生长率36℃±1℃17h～19h大肠杆菌O157：H7NCTC12900+大肠埃希氏菌ATCC25922+金黄色葡萄球菌ATCC6538TSA半定量在CT-SMAC上＞10CFU菌落无色，中心灰褐色选择性大肠埃希氏菌ATCC25922在TSA上<100CFU-金黄色葡萄球菌ATCC6538月桂基磺酸盐胰蛋白胨肉汤（LST）液体选择性液体计数生长率36℃±1℃24h～48h大肠埃希氏菌ATCC25922TSA半定量混浊度2，且气体充满管内1/3弗氏柠檬酸杆菌ATCC43864选择性粪肠球菌ATCC29212混浊度0（不生长）煌绿乳糖胆盐肉汤（BGLB）液体选择性液体计数生长率36℃±1℃24h～48h大肠埃希氏菌ATCC25922TSA半定量混浊度2，且气体充满管内1/3弗氏柠檬酸杆菌ATCC43864选择性粪肠球菌ATCC29212混浊度0（不生长）或浑浊度1（微弱生长）不产气EC肉汤液体选择性液体计数生长率44.5℃±0.2℃24h～48h大肠埃希氏菌ATCC25922TSA半定量混浊度2，且气体充满管内1/3选择性粪肠球菌ATCC29212混浊度0（不生长）磷酸盐缓冲液（PBS）液体悬浮培养基生长率20℃~25℃45min大肠埃希氏菌ATCC25922TSA定量接种前后菌落数变化在±50%金黄色葡萄球菌ATCC65383%氯化钠溶液液体悬浮培养基生长率20℃~25℃45min副溶血性弧菌ATCC178023%TSA定量接种前后菌落数变化在±50%0.1%蛋白胨水液体悬浮培养基生长率20℃~25℃45min产气荚膜梭菌ATCC13124哥伦比亚琼脂定量接种前后菌落数变化在±50%缓冲甘油-氯化钠溶液液体运输培养基生长率-60℃24h产气荚膜梭菌ATCC13124哥伦比亚琼脂定量接种前后菌落数变化在±50%MuellerHinton血琼脂固体药敏试验培养基生化特性36℃±1℃22h±2h微需氧培养空肠弯曲菌ATCC33291定性头孢唑啉钠纸片无抑菌圈，萘啶酮酸纸片有抑菌圈三糖铁琼脂（TSI）高层斜面鉴定生化特性36℃±1℃24h大肠埃希氏菌ATCC25922定性生长良好，A/A；产气；不产硫化氢肠炎沙门氏菌CMCC(B)50335生长良好，K/A；产气；产硫化氢福氏志贺氏菌CMCC(B)51572生长良好，K/A；不产气；不产硫化氢铜绿假单胞菌ATCC27853生长良好，K/K；不产气；不产硫化氢西蒙氏柠檬酸盐培养基斜面鉴定生化特性36℃±1℃24h±2h肺炎克雷伯氏菌MCC(B)46117定性生长良好，培养基变蓝宋内志贺氏菌CMCC(B)51592生长不良或不长，培养基不变色尿素琼脂(pH7.2)斜面鉴定生化特性36℃±1℃24h普通变形杆菌CMCC(B)49027定性生长良好，培养基变桃红色大肠埃希氏菌ATCC25922生长良好，培养基变黄色醋酸盐利用试验斜面鉴定生化特性36℃±1℃24h～48h大肠埃希氏菌ATCC25922定性阳性，培养基变蓝色宋内志贺氏菌CMCC(B)51592阴性，培养基不变色（绿色）3%氯化钠三糖铁琼脂（TSI）高层斜面鉴定生化特性36℃±1℃18h～24h副溶血性弧菌ATCC17802定性生长良好，斜面变红，底部变黄溶藻弧菌ATCC33787生长良好，斜面或底部均变黄改良克氏双糖高层斜面鉴定生化特性26℃±1℃24h小肠结肠炎耶尔森氏菌CMCC(B)52204定性生长良好，A/A；不产气；不产硫化氢鼠伤寒沙门氏菌ATCC14028生长良好，A/A；产气；产硫化氢福氏志贺氏菌CMCC(B)51572生长良好，K/A；不产气；不产硫化氢粪产碱杆菌CMCC(B)40001生长良好，K/K；不产气；不产硫化氢邻硝基酚β-D半乳糖苷培养基（ONPG）液体鉴定生化特性36℃±1℃24h肺炎克雷伯氏菌CMCC(B)46117定性阳性，培养基变深黄色伤寒沙门氏菌CMCC（B）50071阴性，培养基无色或浅黄色蛋白胨水（靛基质试验）液体鉴定实验试剂生化特性36℃±1℃18h～24h大肠埃希氏菌ATCC25922定性阳性，滴加靛基质试剂，显红色产气肠杆菌ATCC13048阴性，滴加靛基质试剂，黄色氰化钾培养基（KCN）液体鉴定生化特性36℃±1℃24h普通变形杆菌CMCC(B)49027定性生长良好，培养基混浊伤寒沙门氏菌CMCC（B）50071不生长，澄清氰化钾对照培养基（KCN）液体鉴定生化特性36℃±1℃24h普通变形杆菌CMCC(B)49027定性生长良好，培养基混浊伤寒沙门氏菌CMCC（B）50071生长良好，培养基混浊葡萄糖铵培养基斜面鉴定生化特性36℃±1℃20h～24h鼠伤寒沙门氏菌ATCC14028定性生长良好，培养基变黄福氏志贺氏菌CMCC(B)51572不生长，培养基不变色缓冲葡萄糖蛋白胨水（甲基红(MR)和V-P试验）液体鉴定实验试剂生化特性36℃±1℃48h大肠埃希氏菌ATCC25922定性生长良好，滴加MR试剂1滴，培养基变红。滴加VP甲液0.5mL和乙液0.2mL，20min内液面不显红色产气肠杆菌ATCC13048生长良好，滴加MR试剂1滴，培养基变红。滴加P甲液0.5mL和乙液0.2mL，20min内液面显红色鼠李糖发酵管液体鉴定生化特性36℃±1℃24h±2h单核细胞增生李斯特氏菌ATCC19115定性阳性，培养基变黄伤寒沙门氏菌CMCC（B）50071阴性，培养基颜色不变0.5%蔗糖发酵管0.5%纤维二糖发酵管0.5%麦芽糖发酵管0.5%甘露醇发酵管0.5%水杨苷发酵管0.5%山梨醇发酵管0.5%棉子糖发酵管七叶苷发酵管液体鉴定生化特性36℃±1℃24h植物乳杆菌GIM1.140定性阳性，培养基变黄德氏乳杆菌保加利亚亚种CICC6032阴性，培养基紫色不变L-赖氨酸脱羧酶培养基液体鉴定生化特性36℃±1℃24h±2h以灭菌液体石蜡覆盖培养基表面鼠伤寒沙门氏菌ATCC14028定性阳性，培养基呈紫色普通变形杆菌CMCC(B)49027阴性，培养基呈黄色L-鸟氨酸脱羧酶培养基液体鉴定生化特性36℃±1℃24h±2h以灭菌液体石蜡覆盖培养基表面鼠伤寒沙门氏菌ATCC14028定性阳性，培养基呈紫色普通变形杆菌CMCC(B)49027阴性，培养基呈黄色氨基酸脱羧酶对照液体鉴定生化特性36℃±1℃24h±2h以灭菌液体石蜡覆盖培养基表面与各种氨基酸脱羧酶的阳性和阴性质控菌株对应定性生长良好，培养基呈黄色L-精氨酸双水解酶培养基液体鉴定生化特性36℃±1℃24h±2h以灭菌液体石蜡覆盖培养基表面鼠伤寒沙门氏菌ATCC14028定性阳性，培养基呈黄色普通变形杆菌CMCC(B)49027阴性，培养基呈黄色精氨酸双水解酶对照液体鉴定生化特性36℃±1℃24h±2h以灭菌液体石蜡覆盖培养基表面鼠伤寒沙门氏菌ATCC14028定性生长良好，培养基呈黄色硝酸盐肉汤液体鉴定生化特性30℃±1℃24h～48h蜡样芽胞杆菌CMCC(B)63303定性阳性，滴加硝酸盐还原试剂甲、乙液各2～3滴，培养基变红棕色硝酸盐阴性不动杆菌CMCC(B)25001阴性，滴加硝酸盐还原试剂甲、乙液各2～3滴，培养基不变色葡萄糖发酵管液体鉴定生化特性36℃±1℃24h大肠埃希氏菌ATCC25922定性阳性，培养基变黄粪产碱杆菌CMCC(B)40001阴性，培养基不变色甘露醇发酵管液体鉴定生化特性36℃±1℃24h大肠埃希氏菌ATCC25922定性阳性，培养基变黄色普通变形杆菌CMCC(B)49027阴性，培养基颜色不变木糖发酵管液体鉴定生化特性36℃±1℃24h肺炎克雷伯氏菌MCC(B)46117定性阳性，培养基变黄色单核细胞增生李斯特氏菌ATCC19115阴性，培养基颜色不变蔗糖发酵管液体鉴定生化特性36℃±1℃24h普通变形杆菌CMCC(B)49027定性阳性，培养基呈黄色鼠伤寒沙门氏菌ATCC14028阴性，培养基颜色不变纤维二糖发酵管液体鉴定生化特性36℃±1℃24h肺炎克雷伯氏菌MCC(B)46117定性阳性，培养基呈黄色大肠埃希氏菌ATCC25922阴性，培养基颜色不变麦芽糖发酵管液体鉴定生化特性36℃±1℃24h伤寒沙门氏菌CMCC（B）50071定性阳性，培养基呈黄色铜绿假单胞菌ATCC9027阴性，培养基颜色不变水杨苷发酵管液体鉴定生化特性36℃±1℃24h肺炎克雷伯氏菌MCC(B)46117定性阳性，培养基变黄伤寒沙门氏菌CMCC（B）50071阴性，培养基不变色山梨醇发酵管液体鉴定生化特性36℃±1℃24h肺炎克雷伯氏菌MCC(B)46117定性阳性，培养基变黄色宋内志贺氏菌CMCC(B)51592阴性，培养基颜色不变棉籽糖液体鉴定生化特性36℃±1℃24h肺炎克雷伯氏菌MCC(B)46117定性阳性，培养基呈黄色普通变形杆菌CMCC(B)49027阴性，培养基颜色不变粘液酸利用试验液体鉴定生化特性36℃±1℃24h～48h大肠埃希氏菌ATCC25922定性阳性，培养基呈黄色福氏志贺氏菌CMCC(B)51572阴性，培养基颜色不变含铁牛乳培养基液体鉴定生化特性46℃±0.5℃2h与5h均观察产气荚膜梭菌ATCC13124定性（接种生长旺盛的FT培养液1mL）暴烈发酵大肠埃希氏菌ATCC25922不发酵无盐胨水液体鉴定生化特性36℃±1℃24h霍乱弧菌VbO定性生长良好，混浊副溶血性弧菌ATCC17802不生长，澄清3%氯化钠胨水液体鉴定生化特性36℃±1℃24h副溶血性弧菌ATCC17802定性生长良好，混浊创伤弧菌ATCC27562生长良好，混浊6%氯化钠胨水液体鉴定生化特性36℃±1℃24h副溶血性弧菌ATCC17802定性生长良好，混浊嗜水气单胞菌As1.172不生长，澄清8%氯化钠胨水液体鉴定生化特性36℃±1℃24h副溶血性弧菌ATCC17802定性生长良好，混浊创伤弧菌ATCC27562不生长，澄清10%氯化钠胨水液体鉴定生化特性36℃±1℃24h溶藻弧菌ATCC33787定性生长良好，混浊副溶血性弧菌ATCC17802不生长，澄清3.0%氯化钠甘露醇液体鉴定生化特性36℃±1℃24h～48h副溶血性弧菌ATCC17802定性阳性，培养基呈黄色普通变形杆菌CMCC(B)49027阴性，培养基颜色不变3.0%氯化钠赖氨酸脱羧酶液体鉴定生化特性36℃±1℃24h～48h以灭菌液体石蜡覆盖培养基表面副溶血性弧菌ATCC17802定性阳性，培养基变紫色普通变形杆菌CMCC(B)49027阴性，培养基变黄色3.0%氯化钠氨基酸脱羧酶对照液体鉴定生化特性36℃±1℃24h～48h副溶血性弧菌ATCC17802定性生长良好，培养基变黄色普通变形杆菌CMCC(B)49027生长良好，培养基变黄色七叶苷发酵管液体鉴定生化特性36℃±1℃24h肺炎克雷伯氏菌MCC(B)46117定性阳性，培养基变棕黑色奇异变形杆菌CMCC(B)49005阴性，培养基颜色不变3.0%氯化钠MR-VP培养基液体鉴定生化特性36℃±1℃48h产气肠杆菌ATCC13048定性MR试验阴性，滴加MR试剂1滴培养基呈黄色副溶血性弧菌ATCC17802MR试验阳性，滴加MR试剂1滴培养基V-P试验阴性，滴加0.6mL甲液及0.2mL乙液，培养基不变色溶藻弧菌ATCC33787V-P试验阳性，滴加0.6mL甲液及0.2mL乙液，培养基呈红色乳糖发酵管液体鉴定生化特性36℃±1℃24h大肠埃希氏菌ATCC25922定性阳性，培养基变黄色伤寒沙门氏菌CMCC（B）50071阴性，培养基颜色不变Koser氏柠檬酸盐肉汤液体鉴定生化特性36℃±1℃18h～96h弗氏