第二章天然药物化学成分的提取分离方法第二节有效成分的分离讲解

第二章天然药物化学成分的提取分离方法

第二节有效成分的分离课前回顾1．采用溶剂法提取中草药有效成分要注意（），溶剂按（

）可分为三类，即（

），（

）和（

）。2．超临界萃取法是一种集（

）和（

）于一体，又基本上不用（

）的新技术。3．中草药化学成分中常见基团极性最大的是（

），极性最小的是（

）。教学目的和要求1、掌握提取分离常用的方法2、熟悉两相溶液萃取法的组合原理3、了解萃取操作时的注意事项提取溶液的过滤过滤是将溶液和固形物分离的一种方法实验室常用的是过滤法。过滤法分为常压，减压，加压和离心过滤。提取液的浓缩

常用浓缩法分为蒸发和蒸馏。（一）、蒸发：m=S（F-f）/PM：单位时间内液体的蒸发量S：液体暴露面积P：大气压F：饱和蒸汽压F：实际蒸汽压（二）、影响蒸发的因素：1、足够的加热温度2、药液蒸发面积3、搅拌（结膜现象）4、蒸汽浓度(浓度大则速度慢）5、液面外蒸汽温度（蒸汽温度高，蒸发快）6、液面表面的压力（二）蒸馏定义：是把挥发性不同的物质尽可能彻底分离，并以蒸气再凝结成液体为目的，即必须收集挥散的蒸气。1、常压蒸馏：

常压蒸发是料液在一个大气压下进行蒸发的方法，又称常压浓缩。蒸发速度慢。2、减压蒸发

减压蒸发是在密闭的容器内，抽真空降低内部压力，使料液的沸点降低而进行蒸发的方法，又称减压浓缩。优点：（1）、能防止热敏性物质的分解；（2）、能不断地排除溶剂蒸气；（3）、可利用低压蒸气或废气加热。缺点：料液沸点降低，其气化潜热随之增大，

即减压蒸发比常压蒸发消耗的加热蒸

气的量要多。常用的有系统溶剂法和两相溶剂萃取法（一）、系统溶剂分离法1、定义：中药提取物中常含有不同的各种化学成分，按极性的大小可以选择不同极性的溶剂，使溶解度有差异的各种成分得到分离。第二节有效成分的分离2、溶剂的种类：（1）石油醚，苯，适于强亲脂性成分（2）、乙醚，氯仿适于亲脂性成分（3）、醋酸乙酯适于提取中等居中的成分（4）、正丁醇适于提取极性中等较大的成分（5）、乙醇，甲醇适于亲水性较大的成分（6）、水适于提取强亲水性物质（二）、两相溶剂萃取法：1、原理：利用混合物中各成分在两种互不相溶的溶剂中分配系数的不同而达到分离的方法

Cu（有机溶剂）上相

K=CL(水层)下相例如：A，B两物质萃取平衡后KA=10KB=0.1此萃取率说明如下：

A大部分在上层（90％）仅10％在下层——氯仿层

B大部分在下层（90％在氯仿层）仅10％在上层——水层因此一次萃取可基本分离开2、分离因子β：

表示分离的难易程度β＝Ka/kb(Ka>Kb)β＝10：0.1＝100（一次萃取可完成）β＝10：1＝10（10～12次萃取可完成）β=10:5＝2（100次以上萃取可完成）β＝10：9.5≈1（无法分离）3、萃取法依据少量多次的原则，用尽量少的溶剂萃取尽量多的溶质。装入量为分液漏斗的三分之一。4、萃取操作注意问题

（1）必须是互不相容的两相溶剂（2）注意温度浓度对KD值的影响（3）防止乳化

5、可进行两相溶剂萃取的组合水——石油醚水——苯水——乙醚水——己烷水——氯仿水——乙酸乙酯水——正丁醇不可进行萃取的溶剂组合水——乙醇水——甲醇水——丙酮乙醇——氯仿甲醇——乙酸乙酯6、液滴逆流色谱及高速逆流色谱特点：（1）、分离度大大提高（无载体）（2）、可克服固体载体的吸附消耗（3）、不会使样品形变污染

（三）、沉淀法1、定义：

在中药的提取液中加入试剂，使某些成分产生沉淀或降低其溶解性从而从溶液中析出，从而获得有效成分或去除杂质的方法。2、酸碱沉淀法（1）、分类：酸溶碱沉法——提取生物碱碱溶酸沉法——提取酚酸性成分：（2）、原理：离子态溶解，分子态难溶而沉淀析出3、试剂沉淀法一些成分能与某些特定的试剂发生沉淀反应。胆甾醇能与甾体皂苷生成沉淀；明胶，蛋白质液能沉淀鞣质。4、乙醇沉淀法：

乙醇浓度达到一定时，就能析出沉淀而达到分离的目的。5、金属盐沉淀法（1）、酸性物——可用Ca++Ba++Pb++等沉淀（2）、碱性物——苦味酸盐沉淀雷氏铵盐沉淀

5、絮凝沉淀法：

絮凝沉淀法是在混悬的中药提取液或提取浓缩液中加入一种絮凝沉淀剂以吸附架桥和电中和方式与蛋白质果胶等发生分子间作用，使之沉降，除去溶液中的粗粒子，以达到精制和提高成品质量目的的一项新技术。（四）盐析法盐析法是在中药水提液中,加入无机盐至一定浓度,或达饱和状态,可使某些成分在水中溶解度降低,从而与水溶性大的杂质分离。（五）结晶、重结晶法1、原理：

利用温度不同溶解度的改变进行分离2、溶剂的选择：对纯化成分——热溶，冷不溶对杂质——冷热都不溶或冷热都溶沸点不可太高，易于回收对纯化成分不反应3、结晶制备去杂制备过饱和溶液析晶操作关键：溶解趁热抽滤沉淀（热不溶型杂质）滤液放冷析晶

母液结晶4、结晶纯度的检查（1）、外观：颜色、晶型（2）、mp检查溶点、溶距（3）、TLC——三种不同溶剂系统均为一个斑点（4）、HPLC——基线稳定的单峰

（六）、膜分离法1、原理：

其原理是在压力驱动下，借助气体中各组分在高分子膜表面上的吸附能力以及在膜内溶解－扩散上的差异，即渗透速率差来进行分离的。2、膜分离的特点：膜分离法的主要特点是无相变，能耗低，而且设备简单，操作方便安全，启动快，运行可靠性高，不污染环境，投资少等优点。（七）、透析法是利用小分子物质在溶液中可通过半透膜，而大分子物质不能通过半透膜的性质，达到分离的方法。（八）升华法利用某些固体物质具有在低于熔点的温度下受热后，不经熔融就直接转化成蒸汽，遇冷后有凝固为原来的固体的性质，而与其他成分分离的方法。（九）、分馏法分馏法（fractionation）利用沸点不同进行分馏，然后精制纯化的方法称为分馏法。一般情况下，沸点随分子量的增大，双键数目的增多，沸点升高。（十）、分子蒸馏法分子蒸馏是一种在高真空下操作的蒸馏方法，这时蒸气分子的平均自由程大于蒸发表面与冷凝表面之间的距离，从而可利用料液中各组分蒸发速率的差异，对液体混合物进行分离。课堂论述题：简述结晶和重结晶的原理和溶剂的选择？小结各种方法提取天然药物所得的提取液是包含诸多成分的混合物，要想得到所需成分和单体成分就必须进行反复的精制和纯化处理。在分离过程中可综合运用多种方法、是相互融合，达到分离的目的。测评1.采用乙醇沉淀法除去水提取液中多糖等杂质，应使乙醇浓度达到（

）A50%以上