DB32T3395-2018鸡孵化厂菌落总数检测与评判

ICS11.200

B41DB32

备案号：58785-2018

江苏省地方标准

DB32/T3395-2018

鸡孵化厂菌落总数检测与评判

Detectionandevaluationofthetotalnumberofcoloniesinincubationplant

2018-5-10发布2018-6-10实施

江苏省质量技术监督局发布

DB32/T3395—2018

鸡孵化厂菌落总数检测与评判

1范围

本标准规定了孵化厂的种蛋表面、空气、水质、绒毛和其它设施设备表面的菌落总数检测方法与评

判标准。

本标准适用于孵化厂内部的菌落总数检测与评判。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。

凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修订版）适用于本标准。

NY5027-2008无公害食品畜禽饮用水水质

3种蛋表面

3.1采样与检测

3.1.1采样位置：对于消毒前种蛋，在一个蛋车的最上面一层蛋盘、最中间一层蛋盘、最下面一层蛋盘

各取每个蛋盘最中间一枚种蛋，共采取5个蛋车的样本。5个蛋车共计采样15枚种蛋。种蛋消毒过后，

采用同样的方法采样。

3.1.2采样方法：将特制规板的圆形部分（直径为3.5cm，面积为9.62㎝²）进行火焰灭菌，待冷却后将

规板套在待检测种蛋的大头部分，在装有5mL灭菌生理盐水的玻璃试管中浸湿灭菌的棉签，在玻璃试

管壁上挤去多余的盐水，然后在规板范围内滚动棉签，涂抹待检测蛋表面30s完成一个采样。规板图示

见附录A。折去棉签手持部位，使采样部位落入5mL灭菌生理盐水玻璃试管中，并与生理盐水充分混

合，带回实验室检验。

3.1.3检测要求：对于消毒前种蛋，吸取用灭菌生理盐水稀释10倍的样品水溶液0.5mL，注入直径9cm

的灭菌平皿中，然后倾注20mL已融化并冷却到40℃~50℃的营养琼脂培养基，并立即旋摇平皿，使水

溶液与培养基充分混匀。每次检验时，应用单独一个平皿只倾注营养琼脂培养基作空白对照。对于消毒

后的种蛋，直接吸取0.5mL样品水溶液，处理方法同前。在37℃培养箱内培养24h，进行细菌计数。

3.2菌落总数计数（CFU/㎝²）

3.2.1消毒前种蛋单位面积菌落总数计算方法如下：

N=（A×100）/9.62

备注:式中

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N：种蛋表面每平方厘米菌落总数

A：培养皿中的菌落数

3.2.2消毒后种蛋单位面积菌落总数计算方法如下：

N=（A×10）/9.62

备注:式中

N：种蛋表面每平方厘米菌落总数

A：培养皿中的菌落数

3.3判定

判定标准详见表1

表1种蛋菌落总数判定标准

采样每平方厘米菌落总数（CFU/㎝²）判定

<400合格

消毒前种蛋

≥400不合格

<8.7合格

消毒后种蛋

≥8.7不合格

4.空气

4.1采样位置及方法

4.1.1采样位置

在以下位置进行空气采样：

a)孵化机：入口和出口

b)孵化厅：两头和中间

c)出雏机：左右两边

d)出雏厅：两头和中间

e)苗鸡房：四角和中央

f)疫苗间：四角和中央

g)种蛋室：四角和中央

4.1.2采样器皿

提前24h用平板制作好普通营养琼脂培养基，密闭备用。

4.1.3采样方法

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在上述采样位置，各放置一直径9cm的普通营养琼脂培养皿，打开培养皿盖暴露15min后盖好盖子回

收。

4.2检测

4.2.1回收的平板在37℃培养箱中培养24h。

4.2.2计算平板上的菌落数。

4.2.3菌落总数判定标准见表2。

表2空气菌落总数判定标准

采样菌落总数（CFU/㎝²）判定

<350合格

苗鸡房

≥350不合格

<30合格

出雏机/出雏厅

≥30不合格

<20合格

孵化机/种蛋室/疫苗间/孵化厅

≥20不合格

5雏鸡绒毛

5.1采样方法：使用灭菌样品袋采集出雏机内的绒毛2g~3g，带回化验室检测。

5.2细菌培养：无菌称取0.5g绒毛与50mL无菌蒸馏水混合1h，过滤去除绒毛。取1mL过滤后的水

溶液倒在营养琼脂平板上，在37℃培养箱中培养24h。

5.3判定标准：单位面积菌落总数小于1.0×104CFU/cm²，判定为合格。

6加湿水

加湿水按照NY5027标准进行判定，菌落总数小于10MPN/100mL判定为合格用水。

7其它孵化设施设备表面

7.1采样位置

5

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其它设施设备表面在以下位置表面进行采样：

a)孵化机内壁

b)孵化机蛋架

c)孵化机蛋车

d)孵化机胚蛋表面（1胚龄-3胚龄或15胚龄-17胚龄）

e)出雏机内壁

f)出雏机蛋盘

g)疫苗间墙壁

h)疫苗用容器

i)疫苗间工作台面

j)蛋筐

k)蛋托

l)苗鸡箱垫纸（消毒前和消毒后）

7.2检测

7.2.1当待检测部位的面积较大时，用特制规板的圆形部分（直径为3.5cm，面积为9.62㎝²）；否则

用特制规板的正方形部分（边长为1cm，面积为1.0㎝²），检测方法同3.1.2和3.1.3。

7.2.2判定

判定合格指标见表4。

表3其它孵化设施设备表面菌落总数判定合格指标

采样合格指标（CFU/㎝²）

孵化机内壁、孵化机蛋架、孵化机蛋车、孵化机胚蛋表面、出雏机内壁、出雏机蛋盘、蛋筐、

≤12

蛋托、苗鸡箱垫纸

疫苗间墙壁、疫苗用容器、疫苗间工作台面≤4

8孵化厂菌落总数检测频率

以上项目每20天检测一次，遇特殊异常情况，需要增加检测频率。孵化厂内部检测项目见附录

B。

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附录A

（规范性附录）

规板图示

A.1规板图示见图A1

图A1规板图

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附录B

（规范性附录）

孵化厂内部检测项目

B.1孵化厂内部检测项目见表B1。

表B1孵化厂内部检测项目

检测项目采样地点采样位置采样数量培养基类别

种蛋表面蛋盘中15个×1普通

孵化机入口、出口2个×2普通

孵化厅两头、中间3普通

出雏机左、右2个×2普通

空气出雏厅两头、中间3普通

苗鸡房四角、中央5普通

疫苗间四角、中央5普通

种蛋室四角、中央5普通

雏鸡绒毛出雏机内部2-3克普通

加湿水加湿器1普通

孵化机左右内壁2个普通

孵化机蛋架2个普通

孵化机蛋车2个普通

孵化机胚蛋表面2个×2普通

出雏机内壁2普通

出雏机蛋盘对角