CN202110945038.6 - 高车前素在制备抗胆管癌药物中的应用配方专利技术_第1页
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文档简介

A61K31/352(2006.01)A61P35/00(2006.01)本发明涉及一种天然化合物高车前素的优点在于:本发明通过肝胆管癌细胞RBE和胆管癌细胞TFK1体外实验发现,高车前素对RBE和23[0002]胆管癌是胆管上皮细胞衍生的恶性肿瘤,近年来发病率在世界范围内呈上升趋势,发病率在亚洲人群中为2.8‰-3.3‰,在东亚人群中更为普遍,在我国治性手术切除是目前可能治愈胆管癌的唯一方式,仅约20%的患者有手术机会,术后5年肝细胞癌等肿瘤细胞有抑制作用,同时在心血管系统与治疗糖尿病并发症等方面有良好[0004]中国专利文献CN112156091A公开了高车前素在制备治疗和/或预防心血管疾病的药物中的应用。文献(刘凯莉.高车前素通过JAK2/STAT3信号通路下调PIM1肠癌细胞的生长和转移[D].青岛大学,2019.)公开了高车前素在结肠癌(CRC)中的抗癌作[0006]本发明的目的是针对现有技术中的不足,提供高车前素在制备抗胆管癌药物中4[0014]在本发明的另一方面,提供高车前素作为靶点在筛选制备抗胆管[0016]1、本发明通过肝胆管癌细胞RBE和胆管癌细胞TFK1体外实验发现,高车前素对[0018]图1.CCK8实验发现高车前素(Hispidulin)对TFK1和RBE人胆管癌细胞活性具有[0019]图2.细胞存活能力检测(集落形成实验)发现高车前素对TFK1和RBE人胆管癌细[0020]图3.细胞增殖检测发现高车前素对TFK1和RBE人胆管癌细胞具有抑制细胞增殖[0027]胎牛血清(Fetalbovineserum,FBS),RPMI-1640培养基(RoswellPark检测试剂盒(BeyoClickTMEdUCellProliferationKitwithAlexaFluor488)(碧云5养基和DMEM培养基中培养,并置于37℃,5%CO2的培养箱中,细胞融合度达到90%以上时进行传代,从10cm皿中吸出旧的培养基并丢弃,向10cm皿中加入1ml预热的含0.25%EDTA的胰酶后,将培养瓶放入培养箱消化1‑3min可使细胞解离程度达90%以上,往皿中加入[0038]经过消化和计数,1000个TFK1和RBE细胞分别种在含有2mL完全培养基的6孔板[0039]细胞存活率计算公式:细胞存活率(%)=(实验组集落数/对照组集落数)×[0041]EdU(5‑ethynyl‑2’‑deoxyuridine)可以在DNA合成过程中替代胸苷掺入到新合成的DNA中,因此新合成的DNA可在荧光显微镜下发出荧光,代表细胞增殖水平。分别将30min。吸除Click反应液,用洗涤液洗涤3次,每次3‑5min。吸除洗涤液后,每孔加1X6[0052]结果如图4-10所示,高车前素可以诱导TFK1和RBE胆管癌细胞的G0/G1细胞周期789

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