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文档简介

第八章

薄层色谱法叶桦珍福建卫生职业技术学院教学目标掌握薄层色谱法的特点、基本原理、操作方法熟悉结果分析方法了解薄层色谱法在药物分析方面的应用第二节

基本原理

一、分离分析过程

二、定性参数

比移值（retardationfactor，Rf）是指组分移动的距离与展开剂移动距离的比值,其数值等于基线至斑点中心的距离和基线至展开剂前沿的距离比值。

例：计算右图中中A、B、B'三个斑点的Rf

解：根据：A、B、B'三个斑点的Rf分别为

（一） 固定相的种类

吸附剂、化学键合相、离子交换剂、色谱凝胶等

三、固定相（二）固定相的选择

应根据试样的性质选择吸附剂的种类与活性。如试样为弱酸性，宜选择硅胶、酸性氧化铝或中性氧化铝作为吸附剂。若试样中的各组分无色且无荧光，可选择添加了无机荧光剂的硅胶。一般而言，对极性小的试样，可选择吸附活性较强的吸附剂以保证对试样有足够的吸附力；对极性大的试样，宜选择活性较弱的吸附剂以免试样被牢牢吸附，造成Rf（比移值）过小。（一）展开剂的种类 1.单一展开剂对于成分简单的混合物，可用单一展开剂。2.多元展开剂对于组分结构差异较小或极性接近的试样，通常采用多元溶剂（可从二元至六元）作展开剂以提高分离效果。四、展开剂（二）展开剂的选择方法选择的依据是“相似相溶”原理，即极性大的组分选用极性大的展开剂分离，极性小的组分选用极性小的展开剂分离。第二节

操作方法

薄层色谱法的一般操作流程为：

制板→加样→展开→斑点定位→结果分析

一、薄层板制备和处理1.制板前准备

制板前先选择适当的支持物，要求表面光洁、平整无油污，且具有一定的机械强度，能经受一定的高温，对所用溶剂和显色剂呈化学惰性。通常采用玻璃板，也可以用塑料板或铝基板。常用有5cm×20cm，10cm×10cm，10cm×20cm，20cm×20cm等几种规格。2.制板过程

制板时除另有规定外，将1份固定相和3份水置于研钵中，按同一方向研磨混合均匀并去除气泡，倒入已放置好支持物的专用的涂布器中进行涂布。涂布完毕取下薄层板，置水平台上于室温下晾干后，在110℃烘30分钟以去除吸附剂所吸附的水分，冷置室温后随即使用或置于干燥箱或干燥器中保存备用。二、加样材料准备毛细管试样标准品画原点线（点样基线距底边1.5~2.0cm）毛细管点样迅速吹干

材料准备（层析缸或展开槽）倾入展开剂，开始展开将展开剂倒入层板缸薄层板放在无展开剂一边，饱和

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