T-SXSF 13-2025 沙棘叶及其茶中多酚含量的测定 分光光度法

ICS65.020.01CCSX04SXSF2024-12-30发布IT/SXSF13—2025前言 2规范性引用文件 3术语和定义 4仪器 5试剂 6样品制备 7测定 28结果计算 29重复性 3T/SXSF13－2025本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。本文件由山西省林学会提出并监督管理。本文件由山西省林学会团体标准化技术委员会归口。本文件起草单位：山西省林业和草原科学研究院。本文件主要起草人：魏璐、田建华、史鹏、刘英翠、梁爱军、朱建芸、郭学斌、张春媛、李青辉、马倩。1T/SXSF13—2025沙棘叶及其茶中多酚含量的测定分光光度法文件规定了沙棘叶及其茶中多酚含量测定的仪器、试剂、样品制备、测定、结果计算和重复性等要求。本文件适用于采用分光光度法测定沙棘叶及其茶中多酚含量。2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法3术语和定义本文件没有需要界定的术语和定义。4仪器分析天平（精度0.1mg）、超声提取器、分光光度计、粉碎机。5试剂5.1试剂和材料碳酸钠（Na2CO3福林酚试剂，浓度1mol/L；没食子酸标准品：纯度≥98%，相对分子质量170.12；实验用水，水质达到GB/T6682规定的三级及以上。5.210%碳酸钠溶液用分析天平称取10mg碳酸钠（Na2CO3）于100mL容量瓶中，加水定容。5.320%福林酚溶液量取10mL浓度1mol/L福林酚试剂于50mL容量瓶中，加水定容。5.4没食子酸标准工作液用分析天平称取10mg没食子酸标准品，在10mL容量瓶中加少许水溶解后定容，且须适时配用。分别吸取定容后溶液0.10、0.20、0.30、0.40、0.50、0.60mL置于10mL容量瓶中，加水定容，得浓度为10.0、20.0、30.0、40.0、50.0、60.0μg/mL的标准工作液。6样品制备2T/SXSF13－20256.1样品要求新鲜、无病虫害的沙棘叶，干叶不少于100g，湿叶不少于500g。沙棘叶茶样品不少于6.2样品处理样品经干燥，去除杂质，粉碎，过60目筛，密封备用。6.3测试液的制备称取处理好的样品100mg(±0.5mg），置于锥形瓶中，加入70℃热水40mL，用超声提取器进行超声处理，超声温度32℃,超声功率80W，超声时间20min；对处理液进行过滤，残渣再加入70℃热水30mL，再次进行超声处理，条件同前，重复两次；三次超声处理后的滤液合并至100mL容量瓶，加水定容，得测试液。7测定7.1标准曲线的绘制分别吸取没食子酸标准工作液、水（做空白对照用）各1mL，置于10mL试管中，每个试管内分别加入20%福林酚试剂5.0mL，摇匀后反应5min～8min。加入10%碳酸钠溶液4.0mL，进行超声处理，超声温度32℃,超声功率80W，超声时间10min，静置10min，如此反复3次，取出，冷却至室温，于760nm波长条件下测定没食子酸标准工作液的吸光度。以没食子酸工作液浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线和线性方程。7.2测试液的测定分别吸取测试液、水（做空白对照用）各1mL，置于10mL试管中，每个试管内分别加入20%福林酚试剂5.0mL，摇匀后反应5min～8min。加入10%碳酸钠溶液4.0mL，进行超声处理，超声温度32℃,超声功率80W，超声时间10min，静置10min，如此反复3次，取出，冷却至室温，于760nm波长条件下测定测试液的吸光度，根据标准曲线求出测试液中多酚浓度。如果吸光度值超过60.0μg/mL没食子酸标准工作液的吸光度时，应对测试液进行适当稀释，再重新测定吸光度。8结果计算多酚含量按式（1）计算：式中：X—沙棘叶及叶茶中多酚的含量，单位为百分率（%）；c—由标准曲线计算得出的吸取测试液多酚浓度，单位为微克每毫升(μg/mLD—测试液定容后的稀释倍数，如未进行稀释，则D=1；V—测试液定容体积，单位为毫升