征求意见稿-氧化型低密度脂蛋白检测试剂盒（免疫比浊法）

1T/XXXXXXX—XXXX氧化型低密度脂蛋白检测试剂盒（免疫比浊法）本标准规定了氧化型低密度脂蛋白检测试剂盒（免疫比浊法）及其配套使用的校准品、质控品的术语与定义、技术要求、试验方法、标识、标签和使用说明书、包装、运输和贮存等。本标准适用于氧化型低密度脂蛋白定量检测试剂盒（免疫比浊法）及其配套使用的校准品、质控品。2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T191包装储运图示标志GB/T21415体外诊断医疗器械生物样品中量的测量校准品和控制物质赋值的计量学溯源性GB/T29791.2体外诊断医疗器械制造商提供的信息（标示）第2部分：专业用体外诊断试剂3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.1免疫比浊法Immuneturbidity在反应液中，抗体和抗原形成复合物而形成沉淀，使得浊度增加。当光通过反应液时，一些光被样品散射，一些光被样品吸收，其余透射过样品，测量样品对光吸收的方法为免疫比浊法。3.2氧化型低密度脂蛋白Oxidizedlow-densitylipoprotein氧化型低密度脂蛋白（OxidizedLow-DensityLipoprotein，OxLDL）是低密度脂蛋白（Low-DensityLipoprotein，LDL）在体内多种复杂因素作用下发生氧化修饰形成的。LDL转化为oxLDL是发生和促进动脉粥样硬化（atherosclerotic，AS）的关键生理环节。4技术要求4.1氧化型低密度脂蛋白检测试剂盒（免疫比浊法）的技术要求4.1.1外观试剂盒各组分应齐全、完整，液体无渗漏；包装标签文字符号应清晰。4.1.2装量装量体积应不少于标示体积。4.1.3精密度4.1.3.1重复性在线性区间范围内，选择2个不同浓度的控制物质，所得结果的变异系数（CV）应不大于10.00%。T/XXXXXXX—XXXX24.1.3.2批间差用3个批次产品分别检测同一浓度的控制物质，3个批次产品的相对极差（R）应不大于15.00%。4.1.4正确度取浓度为50.00U/L具有溯源性的企业参考品进行测试，其测试结果的相对偏差应在±15.00%范围内。4.1.5线性试剂盒线性在[15.00,120.00]U/L区间内。a)线性相关系数（r）应不小于0.980。b)在[50.00,120.00]U/L区间内，各浓度点相对偏差应不超过±15.00%。c)在[15.00,50.00)U/L区间内，各浓度点绝对偏差应不超过±7.50U/L。4.1.6分析灵敏度测试30.00U/L质控品时，吸光度值差值(△A）应不小于0.010。4.1.7空白限用空白样本加入试剂测试时，结果应不大于8.00U/L。4.2氧化型低密度脂蛋白校准品技术要求4.2.1外观校准品的外包装应完整、标签标识清晰。校准品应为白色或淡黄色固体，复溶后为无色透明或淡黄色液体。4.2.2水分含量水分含量应不大于5.00%。4.2.3正确度经校准品校准的测试系统检测由高一级测量程序定值的企业参考品，其检测结果的En绝对值≤1。4.2.4均匀性4.2.4.1瓶内均匀性：校准品瓶内变异系数CV瓶内应不大于10.00%4.2.4.2瓶间均匀性：校准品瓶间变异系数CV瓶间应不大于15.00%。4.3氧化型低密度脂蛋白质控品技术要求4.3.1外观质控品的外包装应完整、标签标识清晰。质控品应为白色或淡黄色固体，复溶后为无色透明液体或淡黄色液体。4.3.2水分含量水分含量应不大于5.00%。4.3.3预期结果检测结果均应在靶值范围内。4.3.4均匀性CV瓶间(%)≤10.00%。5检验方法T/XXXXXXX—XXXX35.1氧化型低密度脂蛋白检测试剂盒（免疫比浊法）的检验方法5.1.1外观在自然光下目视检查，结果应符合4.1.1的要求。5.1.2装量使用通用量具测量试剂各组分体积，结果应符合4.1.2的要求。5.1.3精密度5.1.3.1重复性取50.00U/L和80.00U/L质控品，用同一批次试剂盒进行检测，各重复检测10次，计算10次浓度测量结果的平均值（x-）和标准差（s），根据公式(1)计算变异系数（CV），结果应符合4.1.3.1的要求。公式（1）5.1.3.2批间差用3个批次试剂盒分别检测同一份50.00U/L质控品，每批次检测3次，分别计算每批次3次浓和最小值（x-min），根据公式（3）计算相对极差（R），结果应符合4.1.3.2要求。5.1.4正确度取浓度为50.00U/L具有溯源性的企业参考品，用试剂盒进行测试，重复测试3次，测试结果记为Xi，按公式（4）计算相对偏差（B）。如果3次结果都符合4.1.4的要求，即判为合格。如果大于等于2次的结果不符合，即判为不合格。如果有1次结果不符合要求，则应重新连续测试20次，并分别按照公式计算相对偏差，如果大于等于19次测试的结果符合4.1.4的要求，则准确度符合4.1.4的要求。公式（4）式中:T——企业参考品的标定浓度。5.1.5线性用接近线性区间下限的低浓度企业参考稀释接近线性区间上限的高浓度企业参考品，混合成5个稀释浓度，用试剂盒测试以上制备样本，每个稀释浓度测试3次。分别求出每个稀释浓度检测结果的均值。以稀释浓度为横坐标，检测结果均值为纵坐标绘制散点图并求出线性回归方程。计算线性回归方程的相关系数（r），结果应符合4.1.5a）的要求。计算各稀释浓度测试结果与稀释浓度的相对偏差或绝对偏差，结果应满足4.1.5b）、c）的要求。5.1.6分析灵敏度取30.00U/L质控品，按试剂盒规定参数进行测试，测试的吸光度值差值(ΔA结果应符合4.1.6的要求。5.1.7空白限用试剂盒测试生理盐水（或纯水），重复测试20次，记录20次测试结果的平均值（M）和标准差（SD），计算M+2SD，结果应符合4.1.7的要求。45.2氧化型低密度脂蛋白校准品检验方法5.2.1外观取本品1盒，在自然光下目视检测及复溶后应符合4.2.1的要求。5.2.2水分含量取本品1盒，使用微量水分测定仪进行水分含量测试，测试结果应满足4.2.2的要求。5.2.3正确度取本品1盒，复溶后对配套试剂盒和仪器进行校准。校准成功后，检测由高一级测量程序定值的企业参考品3次，计算3次检测结果的平均值（Xlab），并按下列公式（5）计算En绝对值，结果应符合产品4.2.3的要求。公式（5）公式（5）式中：Xlab——测量结果平均值；Xref——测量物标示值；Uref——测量物标示值不确定度；Ulab——测量不确定度。5.2.4均匀性按照下列方法进行均匀性检验。随机抽取同批号的最小包装单元的校准品15盒并随机编号1-15，复溶后用配套的试剂和仪器进行检测，每包装单元下每个水平按下列顺序测试3次。按公式（6）—公式（15）算瓶内变异系数（CV瓶内，%）和瓶间变异系数（CV瓶间，%），结果应符合4.2.4的要求。测试顺序：1、3、5、7、9、11、13、15、2、4、6、8、10、12、14、15、14、13、12、11、10、9、8、7、6、5、4、3、2、1、2、4、6、8、10、12、14、1、3、5、7、9、11、13、15。公式（6）公式（7）公式（8）公式（9）公式（10）公式（11）公式（12）公式（13）T/XXXXXXX—XXXX5公式（14）公式（15）公式中：SS——方差MS——均方；F——检验值ni——第i瓶的测试次数；n0——有效测试次数sbb——瓶间标准差sr——瓶内标准差xi——测试结果xij——第i瓶第j次测量结果x-——总平均值当F≤1时，以瓶内标准差代替瓶间标准差即；当1≤F≤10时，需分别计算瓶内标准差和瓶间标准差；当F＞10时，校准品瓶间均匀性较差，不符合4.2.4的要求。5.3氧化型低密度脂蛋白质控品检验方法5.3.1外观取本品1盒，在自然光下目视检测及复溶后应符合4.3.1的要求。5.3.2水分含量取本品1盒，使用微量水分测定仪进行水分含量测试，测试结果应满足4.3.2的要求。5.3.3预期结果取本品1盒，复溶后用配套试剂盒和仪器进行检测3次，每次结果均应符合4.3.3的要求。5.3.4均匀性取同批号的最小包装单元的质控品10盒，随机编号1-10。复溶后用配套的试剂和仪器进行检测，每个包装单元分别测试3次，按下列顺序进行测试1、3、5、7、9、2、4、6、8、10、10、9、8、7、6、5、4、3、2、1、2、4、6、8、10、1、3、5、7、9，按公式（16）-公式（24）计算瓶间变异系数（CV瓶间，%结果应符合4.3.4均匀性的要求。公式（16）公式（17）公式（18）T/XXXXXXX—XXXX6公式（19）公式（20）公式（21）公式（22）公式（23）公式（24）公式中：SS总和、SS瓶间、SS瓶内——方差；MS瓶间、MS瓶内——均方；F——检验值；ni——第i瓶的测试次数；n0——有效测试次数；sbb——瓶间标准差；r——瓶内标准差；xi——测试结果；xij——第i瓶第j次测量结果；当F≤1时，认为检验结果显示瓶间均匀性良好，以sr代替sbb计算CV瓶间，结果应符合4.3.4均匀性要ν1为瓶内自由度（样品数-1），ν2瓶间自由度（检测总次数-样品数），即ν1=9，ν2=20，查表得F0.05（9，20）=2.39】时，认为检验结果显示瓶间均匀性良好，计算CV瓶间，结果应符合4.3.4均匀性要求；当F＞F0.05(ν1，ν2），sbb≤0.3δ时，认为瓶间均匀性良好，计算CV瓶间，结果应符合4.3.4均匀性要求。当F＞F0.05(ν1，ν2），sbb＞0.3δ时，认为瓶间均匀性较差，无需计算CV瓶间，结果不符合4.3.4均匀性要6标识、标签和使用说明书应符合GB/T29791.2的相关规定。7包装、运输和贮存T/XXXXXXX—XXXX77.1包装包装储运图示标志应符合GB/T191的规定。包装容器应保证密封性良好，完整，无泄漏，无破损。7.2运输试剂盒应按生产企业的要求运输。在运输过程中，应轻搬运、轻装卸，应防潮，应防晒，应防雨雪浸淋，防止重物堆压试剂。7.3贮存试剂盒应在生产企业说明书中规定条件下贮存。T/XXXXXXX—XXXX8参考文献[1]GB/T21415-2008体外诊断医疗器械生物样品中量的测量校准品和控制物质赋值的计量学溯源性[2]GB/T29791.2-2013体外诊断医疗器械制造商提供的信息（标示）