《医学微生物学》课件-厌氧性细菌

厌氧性细菌1.阐述沙门菌属、志贺菌属的致病物质和所致疾病。2.说出霍乱弧菌的致病物质和所致疾病。复习回顾1.阐述破伤风梭菌的致病条件、致病物质和所致疾病。2.说出产气荚膜梭菌、肉毒梭菌的致病物质和所致疾病。3.说出无芽孢厌氧菌的致病条件和感染特征。教学内容和目标厌氧性细菌:一群必须在无氧环境条件下才能生长繁殖的细菌。根据能否形成芽胞，厌氧菌可分为厌氧芽胞梭菌和无芽胞厌氧菌。厌氧芽胞梭菌临床常见的有破伤风梭菌、产气荚膜梭菌、肉毒梭菌及艰难梭菌,主要引起外源性感染。无芽胞厌氧菌则包括多个属的球菌和杆菌,大多为人体正常菌群的成员,主要引起内源性感染。第一节厌氧芽胞梭菌Clostridium破伤风梭菌C.tetani

--------破伤风产气荚膜梭菌C.perfringens-------气性坏疽肉毒梭菌C.botulinum------------肉毒中毒艰难梭菌C.difficile------------假膜性结肠炎

1.是一群专性厌氧、能形成芽胞、G＋的粗大杆菌。2.它们广泛分布于自然界的土壤中，有些可寄生在动物和人体的肠道内。形态：菌体：菌体细长，周鞭毛，无荚膜芽胞：芽胞正圆，位于菌体顶端，使细菌呈鼓槌状菌落：羽毛状，血平板上见薄膜状爬行生长染色：革兰氏阳性破伤风梭菌（C.tetani）一、生物学性状生化反应不活泼，不发酵糖类，不分解蛋白质。抵抗力:芽胞抵抗力很强100℃1小时才能灭活在干燥的土壤和尘埃中可存活数年无侵袭力，细菌在局部繁殖，产生神经外毒素而致病伤口需要厌氧环境：伤口窄而深。新生儿出生时用不洁器具剪断脐带（七日风）破伤风（tetanus）发病后机体呈强直性痉挛、抽搐，可因窒息或呼吸衰竭死亡。二、致病性与免疫性1.致病条件：伤口的厌氧微环境（1）伤口窄而深，如刺伤、枪伤、扎伤；（2）伤口坏死组织多，如大面积烧伤；（3）有其他需氧菌共同感染，如伤口沾有泥土。破伤风痉挛毒素（tetanospasmin）一种强毒性蛋白质，不耐热，可被肠道蛋白酶破坏。

由细菌质粒编码，由两条肽链借二硫键联结而成：

α轻链：具有毒性作用；

β重键：能与神经节苷脂(ganglioside)结合；

神经毒素，对脑干神经和脊髓前角细胞有高度亲合力。

毒性极强，1mg纯化的结晶可杀死3000万只小鼠。具有免疫原性，经0.3%甲醛作用后脱毒成为类毒素。主要致病物质

毒素对脑干神经和脊髓前角神经细胞有高度亲和力，结合非常牢固，一旦结合，抗毒素便不能中和毒素。

阻止抑制性神经介质γ-氨基丁酸的释放，使肌肉活动的兴奋与抑制失调，造成强直性痉挛。致病机制

破伤风梭菌及芽胞机体局部生长外毒素脊髓前角，并可到达脑干封闭抑制性突触的介质释放

伸肌、屈肌同时强烈收缩强直痉挛创伤神经纤维的间隙淋巴液和血液致病机理牙关紧闭苦笑面容临床表现破伤风的临床诊断主要结合创伤史和观察特有的体征。微生物学检查对早期诊断意义不大，一般不做。

破伤风免疫属外毒素免疫，主要是抗毒素发挥中和作用。

一般病后不会获得牢固免疫力。（抗毒素只能中和游离的外毒素，对迅速与神经组织结合的外毒素无中和作用。）获得有效抗毒素的途径是人工被动免疫。三、微生物学检查1.一般不进行涂片镜检和分离培养。2.典型的症状和病史即可作出诊断。四、防治原则1.正确处理创口及清创、扩创。用3％过氧化氢或1：400高锰酸钾溶液冲洗伤口。2.注射白百破三联疫苗进行人工主动免疫。3.对可疑病人可立即注射破伤风抗毒素（tetanusantitoxin,TAT）进行紧急预防。皮肤试验，多部位注射。发病早期可足量使用抗毒素进行特异性治疗。4.抗生素、镇静剂、肌肉松弛剂等。二、产气荚膜梭菌C.perfringens菌体：粗大杆菌，有荚膜，无鞭毛芽胞：位于菌体中央或级端，小于菌体染色：革兰阳性是气性坏疽的病原体。一、生物学性状培养特性厌氧,但不十分严格。20~50℃均能旺盛生长,在其最适生长温度42℃,此时该菌分裂繁殖周期仅为8分钟,易于分离培养。

在血琼脂平板上,多数菌株有双层溶血环。双层溶血环“汹涌发酵”现象产气荚膜梭菌在牛乳培养基中分解乳糖产酸使酪蛋白凝固，同时产生的大量气体使凝固的酪蛋白冲成蜂窝状，气势汹猛，称为“汹涌发酵”。二、致病性与免疫性多种外毒素（主要致病物质）和侵袭性酶2.荚膜产气荚膜梭菌主要和次要毒素及其分型致病物质：

α毒素等多种毒素分解细胞膜上磷脂和蛋白形成的复合物，造成细胞溶解，引起血管通透性增加伴大量溶血、组织坏死、肝脏、心功能受损。

肠毒素为不耐热的蛋白质，100℃瞬时即被破坏；整段肽链嵌入细胞膜，破坏膜离子运输功能。改变细胞膜通透性，引起腹泻。所致疾病1.气性坏疽：是严重创伤感染性疾病：肿、痛、黑、臭；

该病多见于战伤和地震灾害,也可见于平时大面积创伤的工伤、车祸等致病条件与破伤风梭菌相似。2.食物中毒：A型产生的肠毒素引起，1-2自愈，难确诊三、微生物学检查气性坏疽发病急，后果严重，需要尽早准确的作出微生物学诊断，早期治疗：镜检：可发现G＋大杆菌，并伴有其他杂菌和少量形态不规则的白细胞。培养：厌氧培养（疱肉）动物实验四、防治原则主要是外科手术处理，去除病变组织，清创，扩创、局部用H2O2反复冲洗使用特异性抗体抗体中和毒素使用抗生素抑制细菌繁殖对症治疗高压氧舱由于该菌在环境中很快形成芽胞，故必须严密隔离病人，并对所用器械及敷料彻底灭菌，避免在医院内传播。肉毒梭菌C.botulinum菌体：粗大杆菌，有鞭毛，无荚膜芽胞：位于菌体次级端，大于菌体，呈“网球拍状”染色：革兰阳性庖肉培养基上消化肉渣，使肉渣变黑，有腐败恶臭。芽胞抵抗力强，肉毒毒素不耐热，煮沸1分钟即可被破坏。一、生物学性状二、致病性与免疫性

1.致病物质为肉毒毒素，神经外毒素，是已知最剧烈的毒素，对人致死量为0.1µg。2.不耐热，煮沸1分钟即被破坏，但对酸和消化酶的抵抗力较弱。3.肉毒毒素作用于外周胆碱能神经，抑制神经肌肉接点处神经介质乙酰胆碱的释放，导致弛缓性麻痹。（眼：复视、斜视）（咽：声嘶、吞咽困难）（四肢：瘫痪）（膈肌：呼吸衰竭）所致疾病1.肉毒食物中毒：食物污染芽胞，单纯性毒素中毒，无细菌感染（经几小时至3d潜伏期，开始出现恶心、呕吐（胃肠道症状可不明显）、头痛、乏力等，继而出现特有的神经麻痹症状和体征。（食品：国内：发酵豆制品、面制品；国外：罐头、香肠、腊肉制品）2.婴儿肉毒病：6个月内婴儿（肠道缺乏拮抗菌群）。3.创伤肉毒中毒三、微生物学检查标本：剩余食物，粪便。

标本先加热后培养，粪便、食物等标本中的细菌检测可先80℃加热10分钟,杀死标本中所有的细菌繁殖体，再用加热标本进行厌氧培养分离本菌

毒素检查PCR快速检测四、防治原则1.加强食品卫生管理和监督，提高防范意识（低温保存食物，高温破坏毒素）。2.尽早根据症状作出诊断，迅速注射A、B、E三型多价抗毒素，同时加强护理和对症治疗。艰难梭菌C.difficile菌体：粗大杆菌，有鞭毛，无荚膜芽胞：位于菌体次级端染色：革兰阳性致病性及致病物质：抗生素相关性腹泻，假膜性肠炎防治：规范使用抗生素，紧急情况用敏感抗生素口服正常菌群制剂属人体内的正常菌群，包括革兰阳性和革兰阴性的球菌和杆菌。在人体正常菌群中占绝大优势。在某些特定状态下，这些厌氧菌作为条件致病菌可导致内源性感染。无芽胞厌氧菌致病性属正常菌群，引起内源性感染感染条件

寄居部位改变宿主免疫力下降菌群失调+局部厌氧微环境与混合感染的需氧菌或兼性厌氧菌协同作用内源性感染，可及全身，多呈慢性。无特定病型，大多为化脓性感染。分泌物或脓液粘稠，有恶臭，有时有气体。使用氨基糖苷类抗生素长期无效。分泌物直接涂片可见细菌，普通培养法无细菌生长。感染特征感染类型1.败血症2.中枢神经系统感染3.口腔与牙齿感染4.呼吸道感染5.腹部和会阴部感染6.女性生殖道感染标本采集从感染中心处采取

无菌切取或活检得到的组织标本从感染深部吸取渗出物或浓汁采取后立刻放入厌氧标本瓶中，迅速送检直接涂片镜检分离培养与鉴定三、微生物学检查提高机体的免疫力等，减少条件感染发生的条件。2.