广西《多肉植物玉露组织培养技术规程》编制说明

广西地方标准《多肉植物玉露组织培养技术规程》（征求意见稿）编制说明一、任务来源及起草单位根据广西壮族自治区质量技术监督局《关于下达2017年第四批广西地方标准制定（修订）项目计划的通知》，我单位申报的《多肉植物玉露组织培养技术规程》获立项，立项编号：2017-0485。本标准由广西壮族自治区农业科学院提出，广西壮族自治区农业科学院花卉研究所负责起草。二、编制目的玉露（Haworthiacooperivar.pilifera）为百合科（Liliaceae）十二卷属（Haworthia）中软叶类多肉植物，原产于南非，植株低矮，叶片呈莲座状紧凑排列，叶色碧绿，叶片顶端具晶莹剔透的“透明窗”，故名为“玉露”，它是百合科中极具特色的花卉品种，外表华丽又可爱，具有良好的市场前景，倍受园艺工作者和花卉爱好者的青睐。由于十二卷属植物的自交不亲和性，现在市场上的玉露多为园艺种和杂交种。近年来，中国和日本园艺工作者将从海外引进的玉露品种通过层层筛选，选择特征明显的优秀良种，再经过不同品种间相互授粉、育苗、选种的过程培育出了部分精品玉露，为保证这些精品玉露的优良性状，通常采用叶插、分株和底座繁殖等繁殖方式，这些繁殖方法容易损害母本、繁殖系数小、繁殖速度慢、存在一定变异性、受季节限制大、小苗不易成活且生长缓慢，既无法达到高效繁育的目的更无法满足市场需求，导致其价格居高不下。组织培养技术具有繁殖速度快、繁殖系数大，繁殖后代整齐一致，节约空间、能保持原优良性状及不受季节的限制等诸多优点，是种苗商品化繁殖的最有效途径之一。组织培养正是解决玉露有性繁殖中出现的各类问题的重要手段；因此，制定玉露组织培养技术规程，可为其种苗高效繁育提供技术依据，是解决市场对其优质种苗供需矛盾的有力途径，有利于资源的利用及挖掘。目前国内对该物种的组织培养研究较少，国家暂无该种的相关标准，我区亦无相关标准的制定颁布，本标准的拟定、颁布填补了这一空白。三、编制过程（一）前期研究工作：标准起草单位自2013年期收集多肉植物资源，随后开展了多肉植物的栽培以及离体培养等多方面的研究。在组织培养上，已建立了一些种类的多肉植物离体快繁体系。前期的理论研究与栽培实践工作为本标准的制定打下了坚实基础。（二）2017年自治区质量技术监督局下达地方标准编制任务。为做好《多肉植物玉露组织培养技术规程》广西地方标准的编制工作，广西农科院花卉研究所成立了以宋倩、闫海霞、陶大燕、黄昌艳等为首、共8人组成的标准起草工作小组；及时部署了制标工作方案、进行小组成员分工及标准起草工作时间安排表，全面启动了该地方标准的编制工作。（三）2019年至2020年，标准起草工作小组成员在前期研究工作以及实际操作的基础上，对玉露组培快繁技术进行系统总结，并查阅了大量的文献资料，确定了广西地方标准《多肉植物玉露组织培养技术规程》的基本内容和思路，形成了标准的基本构架。（四）2020年12月，在基本构架的基础上，经起草小组成员反复地讨论修改，最终完成了《多肉植物玉露组织培养技术规程》广西地方标准的征求意见稿。（五）2021年1-3月，《多肉植物玉露组织培养技术规程》（征求意见稿）报送广西壮族自治区质量技术监督局，并进行网上征求意见。联系各领域专家，对《多肉植物玉露组织培养技术规程》（征求意见稿）进行意见征求。四、编制原则与依据（一）编制原则。规程编制遵循“科学、适度、可行”原则，既考虑规程的前瞻性又顾及生产实际，通过充分听取各方意见，确保规程可以作为政府部门监督、生产指导的依据，在生产上切实可行。（二）技术依据。组培快繁是多肉植物玉露优质种苗生产的有效途径之一。本标准提出的玉露的组培快繁技术是根据多次重复实验研究总结出来的。1外植体灭菌与接种方法：取健壮、无病虫害成熟叶片、花梗，在超净工作台上清洗灭菌后切成小块，接种在初代培养基上。结果：可用分别取叶片和花梗获得无菌外植体：用中性洗涤剂浸泡5min～10min，然后在自来水下流水冲洗30min。在超净工作台上，用75％酒精浸泡25s～30s，用无菌水冲洗3遍～5遍。用0.5％次氯酸钠溶液浸泡4min～6min，用无菌水冲洗3遍～5遍。将叶片切成2.0cm×2.0cm小块，花梗切成长1.5cm～3.0cm小段，接种在初代培养基上。2初代诱导方法：将不同部位的外植体接种在MS培养基上，20d观察生长情况。结果：将不同部位外植体接种在MS培养基上，通过诱导可获得愈伤组织，叶片和花梗的愈伤诱导率分别为100%、91.67%、，分化数分别为为0.29、0.12；不定芽的增殖系数分别为7.10、3.19。由此表明叶片和花梗通过诱导愈伤组织可获得组培小苗。3愈伤组织的分化 方法：将切割好的愈伤组织块，接入添加了不同种类和浓度激素的MS培养基中，35d后统计其愈伤组织分化数，筛选出最适愈伤分化培养基。结果：将切割好的愈伤组织块，接入添加了不同种类和浓度激素的MS培养基中，最适宜的愈伤分化培养基为MS培养基＋0.05mg/LNAA＋0.40mg/LIBA＋30g/L白砂糖＋3.5g/L～4.0g/L琼脂，pH值为5.8～6.0。4增殖培养方法：将初代培养获得的小芽切取下来，接在添加有不同种类和浓度激素的MS培养基中，30d后统计并筛选出最佳增殖培养基培养基。结果：将段经过初代培养获得的小芽切取下来，接在添加有不同种类和浓度激素的MS培养基中，适宜的增殖培养基为MS培养基＋0.20mg/L6-BA＋0.40mg/LIBA＋30g/L白砂糖＋3.5g/L～4.0g/L琼脂，pH值为5.8～6.0或MS培养基＋0.20mg/L6-BA＋0.02mg/LNAA＋30g/L白砂糖＋3.5g/L～4.0g/L琼脂，pH值为5.8～6.0。5生根培养方法：将长约3cm的小苗，转接于含有不同激素组合配比的MS培养基上，15d后观察生根情况，筛选出最适宜的激素组合配比。结果：适宜的生根培养基为1/2MS培养基＋0.10mg/LNAA＋30g/L白砂糖＋3.5g/L～4.0g/L琼脂，pH值为5.8～6.0。6炼苗移栽方法：将已经生根的组培苗放在室温中5d～7d后除去瓶盖继续放置1d～2d，加入少量水将培养基软化后取出，冼净基部培养基，用800～1000倍的多菌灵溶液浸泡10min，移栽到基质上，浇透定根水，15d后统计移栽成活率。结果：移栽基质为泥炭、珍珠岩、蛭石1:1:1。移栽后的玉露可在10d成活，移栽成活率达到100%。7移栽后管理：水分管理做到见干浇水，保持基质湿润。大约经过7d即可恢复生长。病虫害防治要遵循预防为主，综合防治的原则。并及时清除杂草以及各种叶片（枯叶、黄叶、落叶、病叶），防止病菌传染。五、与现行法律、法规和强制性标准的关系本标准（征求意见稿）根据GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》规定的格式编写，遵循《中华人民共和国标准化法》等国家相关的法规和强制性标准，内容和要求参考了相关法律法规，引用了现行有效的国家标准、行业标准，与这些文件的制定不存在矛盾，协调一致。引用的具体