浙江鸭2025版高考生物一轮复习第30讲微生物的利用夯基提能作业本含解析

PAGEPAGE1微生物的利用A组基础过关1.依据分别以尿素为氮源的微生物试验,回答下列问题:(1)写出脲酶降解尿素的反应式:。

(2)该试验分别细菌时用浓度为10-4和10-5土壤稀释液接种,更简洁形成单菌落的是。

(3)A同学筛选出的菌落为150个,其他同学只筛选出50个,并且他在设计试验时并没有设置比照。你认为A同学结果产生的缘由可能有哪些?。如何设计比照试验解除可能影响试验结果的因素:。

(4)涂布平板的全部操作怎样保证无菌?

。

(5)有脲酶的细菌在生态稳态上起什么作用?

。

答案(1)CO(NH2)2+H2O2NH3+CO2(2)10-5土壤稀释液(3)可能是土样不同,也可能是培育基污染或操作失误方案有二:一是由其他同学用与A同学一样的土壤进行试验,假如结果与A同学一样,则证明无误,假如结果不同,则证明A同学存在操作失误或培育基配制有问题;另一种方案是将A同学配制的培育基在不加土样的状况下进行培育,作为空白比照,以证明培育基是否受到污染(4)应从操作的各个细微环节保证“无菌”,都应在火焰旁边进行。例如,酒精灯与培育皿的距离要合适、移液管头不要接触任何其他物质、移液管要在酒精灯火焰四周等(5)假如土壤中有很多尿素,在自然界较高温度下会被水解,水解后的氨使土壤碱化,氨还与其他阴离子物质如SQUOTE、CQUOTE、NQUOTE等形成化合物,则会使土壤板结。有脲酶的细菌使植物废弃物和动物尸体降解,并利用了所形成的氨,有利于自然界中氮的循环解析脲即尿素,是蛋白质降解的产物。有一些细菌含有脲酶可以分解尿素,利用尿素作为其生长的氮源。本试验运用涂布分别法分别以尿素为氮源的微生物,用浓度为10-4和10-5土壤稀释液接种,更简洁形成单菌落的是10-5土壤稀释液。A同学结果产生的缘由可能是土样不同,也可能是培育基污染或操作失误,解除方案有二:一是由其他同学用与A同学一样的土壤进行试验,结果与A同学一样,则证明无误,假如结果不同,则证明A同学存在操作失误或培育基配制有问题;另一种方案是将A同学配制的培育基在不加土样的状况下进行培育,作为空白比照,以证明培育基是否受到污染。2.关于分别以尿素为氮源的微生物试验,请分析回答以下问题:(1)脲酶可以催化尿素分解为,其中碱性物质可以能使酚红指示剂变为。

(2)分别以尿素为氮源的微生物,培育基配制必需加凝固剂,培育基在g/cm2压力下灭菌30分钟,冷却至60℃,加入通过的尿素溶液,混合匀称待用。

(3)为了从土壤中分别得到以尿素为氮源的微生物,分别效果比较好的操作方法是釆用,釆用该方法分别,土壤溶液必需经过处理。

答案(1)NH3和CO2(依次可对换,错答或漏答不得分)红色(2)琼脂糖500、G6玻璃(砂)漏斗过滤(3)涂布分别法稀释解析(1)脲酶可以催化尿素分解为NH3和CO2,其中碱性物质能使酚红指示剂变为红色。(2)分别以尿素为氮源的微生物,培育基配制必需加凝固剂琼脂糖。培育基在500g/cm2压力下灭菌30分钟,冷却至600℃,加入通过G6玻璃(砂)漏斗过滤的尿素溶液,混合匀称待用。(3)涂布分别法是从土壤中分别得到以尿素为氮源的微生物的最简便的方法,采纳该方法分别,土壤溶液必需经过稀释处理。3.回答与微生物的培育和利用有关的问题:(1)微生物在试管中培育时通常加棉塞,四周没有皱褶和缝隙,简洁拔出,但用手提着棉塞时,试管又不能落下。棉塞的作用有两个:一是;二是保证通气良好。制作棉塞所用的棉花不能用脱脂棉,缘由是。

(2)测定微生物生长曲线的方法有很多,有血细胞计数板法、平板计数法、法等。制作生长曲线时,以作纵坐标,作横坐标。

(3)牛肉膏蛋白胨培育基是一种应用最广泛和最一般的细菌基础培育基,一般要将pH调至,以利于细菌的生长繁殖。

答案(1)防止杂菌污染脱脂棉易吸水,吸水后简洁引起污染(2)菌落比浊菌数的对数生长时间(3)中性偏碱解析(1)微生物培育过程中棉塞既可以防止杂菌的污染,又可以保证通气良好。因为脱脂棉易吸水,吸水后简洁引起污染,所以制作棉塞所用的棉花不能用脱脂棉。(2)测定微生物生长曲线的方法有很多,有血细胞计数板法、平板菌落计数法、比浊法等。制作生长曲线时,应以菌数的对数为纵坐标,生长时间为横坐标。(3)培育一般细菌时,须要将培育基的pH调至中性偏碱。4.某工厂为了生产耐高温植酸酶饲料添加剂,开展了产该酶菌株的筛选、酶的固定化及其特性分析探讨,其流程如图所示:请回答:(1)土壤悬液首先经80℃处理15分钟,其目的是筛选出①。

(2)在无菌条件下,将经过处理的土壤悬液进行②,然后涂布于含有植酸钠的固体培育基上。培育后视察到③,其四周出现透亮水解圈,圈的直径大小与④强弱有关。

(3)筛选获得的菌株经鉴定后,将优良菌株进行液体扩大培育。培育时须要振荡,其主要目的是⑤。液体培育基与固体培育基相比,不含有的成分是⑥。

(4)在合适条件下,将提纯的植酸酶与海藻酸钠混合后,滴加到肯定浓度的钙离子溶液中,使液滴形成凝胶固体小球。该过程是对酶进行⑦。

A.吸附 B.包埋 C.装柱 D.洗涤(5)温度与植酸酶相对酶活性的关系如图所示。下列叙述错误的是⑧。

A.测试温度中,固定化与非固定化植酸酶的最适温度分别为60℃和45℃B.测试温度范围内,固定化植酸酶的相对酶活性波动低于非固定化植酸酶C.固定化与非固定化植酸酶相比,相对酶活性在80%以上时的温度范围较宽D.65℃时固定化与非固定化植酸酶的相对酶活性因蛋白质变性而位于最低点答案(1)①耐高温菌株(2)②稀释③单菌落④植酸酶的活性(3)⑤供氧⑥琼脂(4)⑦B(5)⑧D解析(1)用80℃高温处理土壤悬液可以筛选出耐高温菌株。(2)无菌条件下经处理的土壤悬液利用涂布分别法进行接种;培育后可视察到有的单菌落四周出现透亮圈,这是由耐高温菌株产生的植酸酶水解形成的,透亮圈越大,说明植酸酶的活性越高。(3)将液体培育基振荡可提高培育液中氧的含量,固体培育基具有固体状态是因为制备培育基时加入了琼脂。(4)将植酸酶与海藻酸钠混合,然后制成凝胶珠,这是利用包埋法制备固定化酶。(5)对比曲线可知,65℃时固定化植酸酶的相对活性并非位于最低点,故选D。5.(2024课标全国Ⅲ,37,15分)回答下列与酵母菌有关的问题:(1)分别培育酵母菌通常运用(填“牛肉膏蛋白胨”“MS”或“麦芽汁琼脂”)培育基,该培育基应采纳灭菌法灭菌。若将酵母菌划线接种在平板上,培育一段时间后可视察到菌落,菌落的含义是。

(2)酵母菌液体培育时,若通入氧气,可促进(填“菌体快速增殖”“乙醇产生”或“乳酸产生”);若进行厌氧培育,可促进(填“菌体快速增殖”“乙醇产生”或“乳酸产生”)。

(3)制作面包时,为使面包松软通常要在面粉中添加肯定量的酵母菌,酵母菌引起面包松软的缘由是。

答案(1)麦芽汁琼脂高压蒸汽由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体(2)菌体快速增殖乙醇产生(3)酵母菌分解葡萄糖会产生CO2,CO2使面包松软解析(1)常用含葡萄糖较多的麦芽汁琼脂培育基分别培育酵母菌。培育基常采纳高压蒸汽灭菌法灭菌。菌落是由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体。(2)有氧气存在时,酵母菌有氧呼吸产生的大量能量可用于快速增殖;无氧气存在时,酵母菌进行无氧呼吸产生乙醇和CO2。(3)酵母菌进行细胞呼吸可产生CO2,故用酵母菌制作的面包会变得松软。6.(2024课标全国Ⅰ,37,15分)某些土壤细菌可将尿素分解成CO2和NH3,供植物汲取和利用。回答下列问题:(1)有些细菌能分解尿素,有些细菌则不能,缘由是前者能产生。能分解尿素的细菌不能以尿素的分解产物CO2作为碳源,缘由是。但可用葡萄糖作为碳源,进入细菌体内的葡萄糖的主要作用是(答出两点即可)。

(2)为了筛选可分解尿素的细菌,在配制培育基时,应选择(填“尿素”“NH4NO3”或“尿素+NH4NO3”)作为氮源,不选择其他两组的缘由是。

(3)用来筛选分解尿素细菌的培育基含有KH2PO4和Na2HPO4,其作用有(答出两点即可)。

答案(1)脲酶分解尿素的细菌是异养生物,不能利用CO2来合成有机物为细胞生命活动供应能量,为其他有机物的合成供应原料(2)尿素其他两组都含有NH4NO3,能分解尿素的细菌和不能分解尿素的细菌都能利用NH4NO3,不能起到筛选作用(3)为细菌生长供应无机养分,作为缓冲剂保持细胞生长过程中pH稳定解析(1)能分解尿素的细菌体内应含有脲酶;能分解尿素的细菌是异养型生物,不能利用CO2来合成有机物,可用葡萄糖等有机物作为碳源。进入细菌体内的葡萄糖既能为细胞生命活动供应能量,又可为其他有机物的合成供应原料。(2)筛选可分解尿素的细菌,应选择以尿素为唯一氮源的培育基,而能分解尿素的细菌和不能分解尿素的细菌都能利用NH4NO3,其他两组不能起到筛选作用。(3)用来筛选分解尿素细菌的培育基含有KH2PO4和Na2HPO4,这两种物质既可为细菌生长供应无机养分,又可作为缓冲剂保持细胞生长过程中pH相对稳定。7.如图为“大肠杆菌的培育和分别”试验的基本流程,请回答下列问题:A.配制培育基→B.灭菌→C.培育(液体培育基)→D.划线分别和培育(固体培育基)→E.菌种短期保存(1)A过程配制的是通用的细菌培育基,称为培育基。配制时除了加入特定的养分物质以外,还要加入肯定量的氯化钠,以维持。对培育基酸碱度的调整,应当在B过程的(填“前面”或“后面”)。

(2)E过程所需的温度是。

(3)D过程后,一个菌体便会形成一个,这种分别方法是的通用方法,也是筛选特定菌株的最简便方法之一。

(4)C过程培育的目的是。

答案(1)LB液体渗透压前面(2)4℃(3)(单)菌落消退污染杂菌(纯化菌种)(4)菌种扩大培育解析(1)LB液体培育基是通用的细菌培育基,LB固体平面培育基则用于划线分别,氯化钠充当溶质的作用是维持培育基的渗透压,调整好酸碱度后才能进行灭菌,若灭菌后再调整酸碱度,又会产生新的污染。(2)在液体培育基的基础上加入肯定量的琼脂就成了固体培育基,将培育好的菌种置于4℃冰箱中保存。(3)通过划线分别后一个菌体就会繁殖出一个菌落。(4)为保证菌体的数量,划线分别前一般用液体培育基进行菌种的扩大培育。8.为了从土壤中分别出以尿素为氮源的微生物,某小组做了相关试验,其基本流程如下。请据图回答下列问题:(1)试验流程中,物质甲是。为了体现尿素培育基的分别效果,需设置比照组,比照组的培育基是培育基,该培育基常用的灭菌方法是。

(2)下表中有四种培育基,为了分别出以尿素为氮源的微生物,应采纳的培育基是。

培育基蛋白胨葡萄糖NaClK2HPO4酚红琼脂糖琼脂水尿素A-+++++-++B-+++++-+-C+-++++-++D-++++-+++(3)制备菌液时,步骤乙的操作是。

A.灭菌B.稀释C.过滤D.扩大培育(4)为了统计每克土壤样品中以尿素为氮源的微生物的数目,接种时宜采纳法。将相同浓度的土壤稀释液分别接种在试验组和比照组培育基上,在℃的恒温培育箱中培育24~48h,视察、比较菌落数,发觉比照组培育基中菌落的数目比试验组。

答案(1)无菌水LB(全养分)固体高压蒸汽灭菌(2)A(3)B(4)涂布分别37多解析(1)题图为从土壤中分别出以尿素为氮源的微生物的过程。土壤需用无菌水(物质甲)进行溶解。分别以尿素为氮源的微生物时,需设置比照组,该组所采纳的培育基为LB全养分固体培育基,运用之前需采纳高压蒸汽灭菌。(2)分别以尿素为氮源的微生物,需在培育基中添加尿素,并以尿素为唯一氮源;尿素培育基除以尿素作为氮源外,不能含有其他含氮化合物,蛋白胨和琼脂中都含有含氮化合物。(3)获得土壤悬液后进行梯度稀释,以便进行涂布分别。(4)划线分别和涂布分别均能分别微生物,但是若要统计微生物的数目,应采纳涂布分别法。通过涂布分别,将菌种接种到培育基表面,然后将培育基倒置于37℃恒温培育箱中培育24~48h后进行视察,由于自然界中能够分解尿素的微生物数量较少,因此,对比后会发觉比照组(LB全养分培育基)的菌落数远多于试验组(尿素培育基)的。9.人工瘤胃仿照了牛羊等反刍动物的胃,可用来发酵处理秸秆,提高秸秆的养分价值。为了增加发酵效果,探讨人员从牛胃中筛选纤维素酶高产菌株,并对其降解纤维素实力进行了探讨。请回答下列问题:(1)在样品稀释和涂布平板步骤中,下列选项不须要的是(填序号)。

①酒精灯②培育皿③显微镜④无菌水(2)在涂布平板时,滴加到培育基表面的菌悬液量不宜过多的缘由是。

(3)向试管内分装含琼脂的培育基时,若试管口粘附有培育基,须要用酒精棉球擦净的缘由是。

(4)刚果红可以与纤维素形成红色复合物,但并不与纤维素降解产物纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。探讨人员在刚果红培育基平板上,筛到了几株有透亮降解圈的菌落(见图)。图中降解圈大小与纤维素酶的有关。图中降解纤维素实力最强的菌株是(填图中序号)。

(5)探讨人员用筛选到的纤维素酶高产菌株J1和J4,在不同温度和pH条件下进行发酵,测得发酵液中酶活性的结果见下图,推想菌株更适合用于人工瘤胃发酵,理由是

。

答案(1)③(2)培育基表面的菌悬液会出现积液,导致菌体积累,影响分别效果(3)避开培育基污染棉塞(4)量与活性①(5)J4发酵过程会产热和产酸,J4菌株在较高温度和酸性环境下酶的活性更高解析本题考查微生物培育与分别的相关学问。(1)样品稀释需用无菌水,在培育基中涂布接种时需在酒精灯的火焰旁进行。(2)涂布平板时,滴加到培育基表面的菌液一般为0.1mL,量过大将导致菌体密度过大而影响分别效果。(3)分装含琼脂的培育基时,试管口粘有培育基易造成杂菌滋生,故应用酒精棉球擦净。(4)纤维素酶活性越大,菌落四周被分解的纤维素量也越大,菌落四周的透亮圈也就越大。故图中降解纤维素实力最强的菌株为①。(5)发酵过程中由于呼吸作用产生较多的热量和有机酸,故应选择较高温度和酸性环境中活性较高的J4酶。B组实力提升1.(2024江苏单科,31,8分)酵母的蛋白质含量可达自身干重的一半,可作为饲料蛋白的来源。有些酵母可以利用工业废甲醇作为碳源进行培育,这样既可削减污染又可降低生产成本。探讨人员拟从土壤样品中分别该类酵母,并进行大量培育。如图所示为操作流程,请回答下列问题:(1)配制培育基时,依据培育基配方精确称量各组分,将其溶解、定容后,调整培育基的,刚好对培育基进行分装,并进行灭菌。

(2)取步骤②中不同梯度的稀释液加入标记好的无菌培育皿中,在步骤③中将温度约(在25℃、50℃或80℃中选择)的培育基倒入培育皿混匀,冷凝后倒置培育。

(3)挑取分别平板中长出的单菌落,按步骤④所示进行划线。下列叙述合理的有。

a.为保证无菌操作,接种针、接种环运用前都必需灭菌b.划线时应避开划破培育基表面,以免不能形成正常菌落c.挑取菌落时,应挑取多个菌落,分别测定酵母细胞中甲醇的含量d.可以通过逐步提高培育基中甲醇的浓度,获得甲醇高耐受株(4)步骤⑤中,为使酵母数量快速增加,培育过程中需保证足够的养分和供应。为监测酵母的活细胞密度,将发酵液稀释1000倍后,经等体积台盼蓝染液染色,用25×16型血细胞计数板计数5个中格中的细胞数,理论上色细胞的个数应不少于,才能达到每毫升3×109个活细胞的预期密度。

答案(1)pH高压蒸汽(湿热)(2)50℃(3)a、b、d(4)氧气无30解析本题主要考查微生物的培育与计数的相关学问。(1)培育基在定容后、分装前须要调整pH;分装后还须要进行高压蒸汽(湿热)灭菌。(2)倒平板时温度不宜过高,以防烫伤;同时温度也不能太低,以防培育基凝固而无法形成平板,因此倒平板时温度应选择50℃左右。(3)平板划线时,需保证无菌操作,以防混入杂菌而影响分别结果。因此操作过程中所用的接种针、接种环在运用之前都必需灭菌;划线时不能划破培育基表面,以免影响菌落的正常形态进而影响后期视察;挑取菌落时,应挑取单个菌落;通过逐步提高培育基中甲醇的浓度,可获得利用甲醇实力强的菌株,即甲醇高耐受株。(4)⑤为扩大培育过程,欲使酵母数量快速增加,应为酵母菌供应足够的养分和O2。台盼蓝染液能将死的酵母菌染成蓝色,而活的酵母菌不能被染色。假设5个中方格中有x个活酵母菌,由题意可知:[(x×5)÷10-4]×1000×2=3×109,由此解得x=30。2.(2024课标全国Ⅰ,37,15分)将马铃薯去皮切块,加水煮沸肯定时间,过滤得到马铃薯浸出液。在马铃薯浸出液中加入肯定量蔗糖和琼脂,用水定容后灭菌,得到M培育基。回答下列问题:(1)M培育基若用于真菌的筛选,则培育基中应加入链霉素以抑制的生长,加入了链霉素的培育基属于培育基。

(2)M培育基中的马铃薯浸出液为微生物生长供应了多种养分物质,养分物质类型除氮源外还有(答出两点即可)。氮源进入细胞后,可参加合成的生物大分子有(答出两点即可)。

(3)若在M培育基中用淀粉取代蔗糖,接种土壤滤液并培育,平板上长出菌落后可通过加入显色剂筛选出能产淀粉酶的微生物。加入的显色剂是,该方法能筛选出产淀粉酶微生物的原理是

。

(4)甲、乙两位同学用稀释涂布平板法测定某一土壤样品中微生物的数量,在同一稀释倍数下得到以下结果:甲同学涂布了3个平板,统计的菌落数分别是110、140和149,取平均值133;乙同学涂布了3个平板,统计的菌落数分别是27、169和176,取平均值124。有人认为这两位同学的结果中,乙同学的结果可信度低,其缘由是

。

答案(1)细菌选择(2)碳源、无机盐蛋白质、核酸(3)碘液淀粉遇碘液显蓝色,产淀粉酶的菌落四周淀粉被水解,形成透亮圈(4)乙同学的结果中,1个平板的计数结果与另2个相差悬殊,结果的重复性差解析本题主要考查微生物的培育与应用。(1)链霉素可抑制细菌生长,从功能上看,添加链霉素的培育基属于选择培育基。(2)微生物正常生长须要的养分物质有无机盐、氮源、碳源等。氮源进入细胞后,可以用于合成含氮大分子物质,如核酸、蛋白质等。(3)淀粉遇碘液显蓝色,若淀粉被水解,则产淀粉酶的菌落四周的淀粉被水解,形成以菌落为中心的透亮圈。(4)用稀释涂布平板法统计菌落数目时,为保证统计结果的精确性,一般选择菌落数在30~300的平板进行计数,取结果差别不大组别的平均值,进而得出计数结果。而乙同学的结果中,1个平板的计数结果与另2个相差悬殊,即乙同学的结果可信度低。3.农业生产上有一种广泛运用的除草剂在土壤中不易被降解,长期运用会污染土壤。为修复被污染的土壤,可按图示程序选育出能降解该除草剂的细菌。已知该除草剂(含氮有机物)在水中溶解度低,含肯定量该除草剂的培育基不透亮。请分析回答:(1)微生物接种是微生物学探讨中最常用的基本操作技术,该技术的核心是。

(2)在选育过程中,应将土壤浸出液接种于以该除草剂为唯一的培育基上。通过比较单菌落四周的大小,可筛选出高效的目的菌。试验结果如上图显示的A~E五种菌株中,是最志向菌株。

(3)若想对初步筛选得到的目的菌进行纯化并计数,可采纳的接种方法是。将1mL土壤溶液分别稀释10倍和100倍,每种稀释度各在3个平板上分别接入0.1mL稀释液,经过适当培育后,6个平板上的菌落数分别为59、57、58和2、7、5,空白比照组的平板上没有菌落,则每升土壤溶液中活菌数的理论值为个。事实上每升土壤溶液中的活菌数比通过统计所得的这一数值要大,因为。

(4)科研人员用放射线处理该细菌,获得突变株A和B,然后对突变株A和B进行试验,结果如下表所示:接种的菌种一般培育基试验处理及结果A不生长添加养分物质甲,能生长B不生长添加养分物质乙,能生长A+B能生长不添加养分物质甲、乙,能生长请分析突变株A和B混合在一起接种于一般培育基中能生长的最可能缘由。。

答案(1)防止杂菌污染(无菌操作)(2)氮源透亮圈E(3)稀释涂布平板法5.8×106统计结果是用菌落数来表示的,当两个或多个细菌连在一起时,平板上视察到的只是一个菌落(4)突变株A生长须要养分物质甲,突变株B可以供应;突变株B生长须要养分物质乙,突变株A可以供应解析(1)微生物接种技术的核心是防止杂菌污染。(2)已知该除草剂为含氮有机物,在水中溶解度低,含肯定量该除草剂的培育基不透亮;降解该除草剂的细菌能分解培育基中的该除草剂,使培育基中出现透亮圈。可见,在选育能降解该除草剂的细菌的过程中,应将土壤浸出液接种于以该除草剂为唯一氮源的培育基上。通过比较单菌落四周透亮圈的大小,可筛选出高效的目的菌。试验结果图显示的A~E五种菌株中,E菌落四周的透亮圈最大,因此E是最志向菌株。(3)对初步筛选得到的目的菌进行纯化并计数,可采纳稀释涂布平板法进行接种。统计菌落数目时,一般选择菌落数在30~300的平板进行计数,因此应选择稀释度为10倍的、分别接入0.1mL稀释液的3个平板上的菌落数(分别为59、57、58)进行统计,则每升土壤溶液中活菌数的理论值为[(59+57+58)÷3]×10÷(0.1×10-3)=5.8×106个。由于统计结果是用菌落数来表示的,当两个或多个细菌连在一起时,平板上视察到的只是一个菌落,所以事实上每升土壤溶液中的活菌数比通过统计所得的这一数值要大。(4)分析表中信息可知:突变株A生长须要养分物质甲,突变株B生长须要养分物质乙,据此可推知,突变株A和B混合在一起接种于一般培育基中能生长的最可能缘由是:突变株A生长须要养分物质甲,突变株B可以供应;突变株B生长须要养分物质乙,突变株A可以供应。4.为了调查某河流的水质状况,某探讨小组测定了该河流水样中的细菌含量,并进行了细菌分别和培育等工作。回答下列问题:(1)该小组采纳稀释涂布平板法检测水样中细菌含量。为了检测培育基平板灭菌是否合格,可在涂布接种前,;然后,将1mL水样稀释1000倍,在3个平板上用涂布法分别接入0.1mL稀释液;经适当培育后,3个平板上的菌落数分别为39、38和37,据此可得出每升水样中的活菌数为。

(2)该小组采纳平板划线法分别水样中的细菌。操作时,接种环通过灭菌,为了将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个菌落,在其次次及以后的划线时,肯定要。示意图A和B中,表示的是用稀释涂布平板法接种培育后得到的结果。通常,对获得的纯菌种可以依据对细菌进行初步的鉴定和分类。

(3)该小组将得到的菌株接种到液体培育基中并混匀,一部分进行静置培育,另一部分进行振荡培筹。结果发觉:振荡培育的细菌比静置培育的细菌生长速度快。分析其缘由是:振荡培育能提高培育液中的含量,同时可使菌体与培育液充分接触,提高的利用率。

答案(1)随机取若干灭菌后的空白平板先行培育一段时间3.8×108(2)灼烧从上一次划线的末端起先划线B菌落的形态、大小等菌落特征(3)溶解氧养分物质解析(1)为了确定培育基的灭菌是否合格,可以随机取若干灭菌后的空白平板培育一段时间,视察培育基上是否有菌落生成。由题意知1mL水样中的菌落数是(39+38+37)÷3÷0.1×1000=3.8×105,每升水样中的活菌数为3.8×105×103=3.8×108个。(2)接种环用灼烧法进行灭菌。在其次次及以后划线时,总是从上一次划线的末端起先划线,这样做的目的是:通过划线次数的增加,将聚集的菌体渐渐稀释分散,使每次划线时菌体的数目渐渐削减,以便获得由单个细胞繁殖而来的单个菌落。图A是用划线分别法接种培育后得到的结果,图B表示的是用涂布分别法接种培育后得到的结果。可以依据菌落的形态、大小等特征对细菌进行初步的鉴定和分类。(3)振荡培育可以增加液体培育基的氧气含量,促进好氧型微生物的生长;同时还能使菌体与培育液充分接触,提高养分物质的利用率。5.大肠杆菌是生活在人和高等动物体内的一种常见细菌,在饮用水的检测中常用它作为水源是否受到污染的指示菌,在遗传学上常作为试验材料,在基因工程中常用它作为受体细胞。请回答下列有关大肠杆菌的问题:(1)在大肠杆菌培育过程中,除考虑养分条件外,还要考虑和渗透压等条件。由于该细菌具有体积小、结构简洁、变异类型简洁选择、易培育、等优点,因此常作为遗传学探讨的试验材料。

(2)在微生物培育操作过程中,为防止杂菌污染,需对培育基和培育皿进行;操作者的双手须要进行清洗和消毒;空气中的细菌可用紫外线杀灭,其缘由是紫外线能损伤DNA的结构,还能。

(3)培育大肠杆菌时,在接种前须要检测培育基是否被污染。对于固体培育基应采纳的检测方法是将未接种的培育基在相宜的温度下放置适当的时间,。

(4)通常对获得的纯菌种还可以依据菌落的形态、大小、硬度和颜色等对细菌进行初步的鉴定(或分类)。

(5)若用大肠杆菌进行试验,运用过的培育基及其培育物必需经过处理后才能丢弃,以防止培育物的扩散。

答案(1)温度、酸碱度(pH)生活周期短(或繁殖快)(2)灭菌使蛋白质变性(3)视察培育基上是否有菌落产生(4)菌落特征(5)灭菌解析(1)培育微生物,不但须要相宜的养分物质,还须要考虑微生物生长所需的温度、pH和渗透压等条件。大肠杆菌是体积小、结构简洁的原核生物,具有繁殖周期短、易培育等特点,通常作为生物遗传学探讨的材料。(2)消退杂菌的污染是微生物培育的关键,不但须要对培育基和培育皿进行灭菌,还要对试验者的双手用70%酒精擦拭消毒,而空气中的微生物常采纳紫外线杀菌(主要原理是紫外线损伤DNA,并使蛋白质变性)。(3)对大肠杆菌等微生物培育时,检测培育基是否灭菌彻底最简便的方法是将灭菌后未接种的培育基在相宜的温度下培育一段时间,若出现菌落,说明培育基被污染,灭菌不彻底,反之说明培育基灭菌彻底。(4)不同菌种形成的菌落存在差异,可以通过菌落的形态、大小、硬度和颜色等菌落特征对细菌进行初步的鉴定。(5)微生物培育结束后,为防止培育对象对环境造成污染和扩散,运用过的培育基及其培育物必需经过高压蒸汽灭菌处理后才能丢弃。6.据报道,一些企业生产的速冻食品中检出金黄色葡萄球菌超标,加上熟卤制品的大肠杆菌超标,“细菌门”事务引起公众普遍关注。金黄色葡萄球菌能分解卵黄中的卵磷脂,在含卵黄的固体培育基上形成的菌落四周会出现特有的乳白色的乳浊环。请回答下列问题:(1)某生物爱好小组欲检测某果汁类食品中是否含有金黄色葡萄球菌以及该菌的含量。配制培育基:称取适量的牛肉膏、蛋白胨、NaCl、琼脂等,加入蒸馏水,搅拌加热至完全溶解后①,分装到锥形瓶后利用②进行灭菌,在无菌状态下加入卵黄液(100mL10%灭菌NaCl溶液中加一个鸡蛋黄,振荡匀称)摇匀后马上倒平板。

接种:该小组采纳涂布分别法检测果汁样品的细菌含量。在涂布接种前,随机取若干灭菌后的空白平板先行培育了一段时间,这样做的目的是③;然后,将1mL果汁样品稀释10倍,在3个平板上用涂布法分别接入0.1mL稀释液。

培育及结果:将培育皿④放入恒温培育箱中经适当培育,3个平板上的菌落数分别为19、18和17。据此可得出每升果汁样品中的活菌数为⑤。

(2)示意图A和B中⑥表示的是用涂布分别法接种培育后得到的结果。

(3)下列有关涂布分别法的操作正确的是⑦。

A.在超净工作台中进行接种时应关闭紫外灯B.接种前需先稀释,然后过滤除去杂菌C.在每个固体培育基表面都可形成单菌落D.玻璃刮刀浸泡在70%的酒精中灭菌,不用灼烧(4)菌种保存:在无菌条件下将单菌落用接种环取出,再用划线法接种在⑧上,在37℃下培育24h后,置于4℃冰箱中保存。

答案(1)①调整pH②高压蒸汽灭菌锅③检测培育基平板灭菌是否合格④倒置⑤1.8×106(2)⑥B(3)⑦A(4)⑧斜面解析(1)培育基配制好后应调整酸碱度(pH),分装到锥形瓶后利用高压蒸汽灭菌锅进行灭菌;涂布接种前,将制好的空白平板先培育一段时间,目的是检测培育基是否被杂菌污染;接种后,培育皿须要倒置培育,防止皿盖上凝集的水滴滴落造成污染;0.1mL稀释液(稀释10倍)含细菌数约为18个,得出每升果汁含有活菌数1.8×106个。(2)图中A为划线分别得到的结果,B为涂布分别得到的结果。(3)在超净工作台进行接种操作时应关闭紫外灯,A正确;涂布分别前需稀释,但不能过滤除菌,B错误;并不是在每个固体培育基表面都可以形成单菌落,C错误;玻璃刮刀浸泡后须要灼烧,D错误。(4)纯化的菌种保存在斜面上。7.烧伤病人简洁感染绿脓杆菌,引起化脓性感染,比阿培南、美罗培南、头孢菌素和碳青霉烯类抗生素都是抗