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文档简介
ICS65.020.01
B15
DB52
贵州省地方标准
DB52/T1501.9—2020
农作物抗病性鉴定技术规范
第9部分:玉米抗大斑病
Technicalspecificationforevaluationofcropresistancetodiseases
Part9:Maizeresistancetonorthernleafblight
2020-05-22发布2020-09-01实施
贵州省市场监督管理局发布
DB52/T1501.9—2020
农作物抗病性鉴定技术规范第9部分:玉米抗大斑病
1范围
本部分规定了玉米抗大斑病(Exserohilumturcicum(Pass.)LeonardetSuggs)的鉴定方法与
抗病性评价。
本标准适用于贵州区域种植的玉米品种(系)、种质资源对大斑病抗病性的鉴定和评价。
2规范性引用文件
下列文件对于本标准的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅所注日期的版本适用于本标
准。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
GB/T8321.10农药合理使用准则
NY/T496肥料合理使用准则通则
NY/T1248.1玉米抗病虫性鉴定技术规范第1部分:玉米抗大斑病鉴定技术规范
3术语和定义
下列术语和定义适用于本文件。
3.1
玉米大斑病northerncornleafblight
由大斑突脐孢菌(Exserohilumturcicum(Pass.)LeonardetSuggs)引起的以叶部产生大型病斑
症状为主的玉米病害。
3.2
接种体inoculum
通过人工接种多种贵州玉米大斑病菌的带菌高粱粒。
3.3
病圃diseasenursery
在玉米大斑病常年发生较重区域选择作为玉米大斑病抗性鉴定的地块。
3.4
人工接种artificialinoculation
在适宜条件下,通过人为接种的方式将人工培养或收集的病原物置于植物适当部位并使之发病的过
程。
1
DB52/T1501.9—2020
3.5
投芯接种fillingheartinoculation
将带菌高粱粒投入玉米小喇叭口心叶中进行接种。
4鉴定方法
4.1接种体制备
4.1.1病原物分离、纯化和保存
采用常规组织分离法或单孢分离法从贵州各玉米主产区采集具有典型症状的发病植株分离、纯化和
保存病原物。病原物经形态学和分子生物学鉴定确认为大斑突脐孢菌(Exserohilumturcicum(Pass.)
LeonardetSuggs)后,进行纯化,再回接到玉米上确认其致病性,满足柯赫氏法则。病原物保存在
4℃马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA)(配方:马铃薯200g、葡萄糖20g、琼脂20g和蒸馏水1000ml)
斜面上或者-20℃滤纸片上备用。
4.2接种体扩繁
接种用病原物应采用贵州各玉米主产区分离得到的多种强致病性菌株。
将在PDA斜面上或者-20℃滤纸片上保存的贵州各玉米主产区分离得到的多种强致病病原物接种于
PDA平板上进行活化,活化5天后再续代培养7天,之后分别将各病原物混匀后接种于经高温灭菌的高粱
粒上(高粱粒培养基制备方法为:高粱粒煮30min~40min,装入三角瓶中121℃灭菌1h,冷却后备
用),23℃~25℃条件下培养5天~7天,待菌丝布满高粱粒,向三角瓶中加入少量无菌水,用灭菌
玻璃棒搅拌打断菌丝,摇匀,放在23℃~25℃具有较高湿度的环境中黑光灯照射培养5天~7天,镜检
大量产孢后备用。
4.3病圃设置
4.3.1病圃选择
病圃设在具备良好的自然发病环境,选择排灌方便、肥力均匀的地块,按NY/T1248.1的规定执行。
4.3.2田间设置
鉴定小区行长5m~6m,行距0.7m,穴播,每行13穴,每穴2株。鉴定资源时,每份参鉴材料种植
2行,留苗50株以上,不设置重复。土壤肥力水平和耕作管理与大田生产相同,管理中肥料的使用应符
合NY/T496的规定。参鉴材料随机排列或顺序排列,每50份参鉴材料设1组已知抗病、感病和高感对照
材料。在玉米整个生长期不使用杀菌剂,虫、草害防治中农药的使用应符合GB/T8321.10的规定。
4.4人工接种
4.4.1接种时期
接种时间为玉米小喇叭口期。
4.4.2接种方法
接种采用带菌高粱粒投芯接种方法,及将带菌高粱粒接种于玉米心叶内,5粒/株。接种时间选择
在雨后或阴天的傍晚。
2
DB52/T1501.9—2020
4.4.3接种后管理
接种前应先进行田间浇灌或在雨后进行接种,接种后若遇持续干旱,应及时进行田间浇灌,保证满
足病害发生所需的条件(人工接种前后保证田间湿度90%以上)。
4.5调查时间
在玉米进入乳熟期及乳线在2/3以上时进行调查,同一批次接种应在同一天进行调查。
4.6调查方法
每份鉴定材料调查每行的第3、5、7、9和11穴,每穴调查发病较重的1株,每份材料2行,共调查
10株,调查每株玉米果穗的上、下方各3片叶中发病较重的3片叶,及每份材料共调查30片叶,根据病
害症状描述和病害级别划分标准逐株逐片进行调查并记载病级,并将结果记入表B.1(附录B)。
田间症状描述见附录A.2,病情分级划分见表1。
表1玉米抗大斑病病情分级
叶片病害级别症状描述
0叶片上无病斑
1叶片上有零星病斑,病斑占叶面积少于或等于5%
3叶片上有少量病斑,占叶面积6%~10%
5叶片上有较多病斑,占叶面积11%~30%
7叶片上有大量病斑,病斑相连,占叶面积31%~70%
9叶片病斑占叶面积70%以上,叶片枯死
4.7计算公式
通过对玉米鉴定材料群体中个体植株发病程度的综合计算,确定各鉴定材料的病情指数。病情指数
采用公式1计算,得到的值采用四舍五入法保留小数点后2位有效数字。
(各级代表值各级病叶数)
病情指数(DI)100..................(1)
调查总叶数9
5抗病性评价
5.1有效性判别
当病圃中的感病对照材料达到7级或高感对照材料达到9级,该批次抗大斑病鉴定视为有效。
5.2抗病性评价
依据鉴定材料的病情指数(DI)所在范围确定抗病性级别,划分范围标准见表2,依据抗病性级别
确定其对大斑病的抗性水平,并将结果记入表B.2(附录B)。
3
DB52/T1501.9—2020
表2玉米对大斑病抗病性评价分级
抗病性级别病情指数(DI)抗病性评价
1≤10高抗(HR)
310<DI≤30抗病(R)
530<DI≤50中抗(MR)
750<DI≤70感病(S)
9DI>70高感(HS)
4
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AA
附录A
(资料性附录)
玉米大斑病病原、田间症状及发生流行规律
A.1病原
玉米大斑病病原菌为:大斑突脐孢菌Exserohilumturcicum(Pass.)LeonardetSuggs。
A.2田间症状
该病主要侵害叶片、叶鞘和苞叶,以叶片受害最重。通常先从下部叶片开始发病逐渐蔓延到上部叶
片,也有少数从中部叶片开始发生,其最明显的特征是在叶片上形成大型的梭状病斑,病斑初期为灰绿
色或水浸状的小斑点,几天后病斑沿叶脉迅速扩大,成熟病斑长梭型,一般长度在50mm以上。病斑的
大小、形状、颜色及反应因品种抗病性不同而不同,主要有三种类型:
a)黄褐色,中央灰褐色,病斑较大,出现在感病品种上。气候潮湿时,病斑上可产生大量灰黑色
霉层;
b)黄褐色或灰绿色,外围有明显的黄色褪绿圈,病斑较小;
c)紫红色,周围有黄色或淡褐色褪绿圈。
A.3发生流行规律
玉米大斑病的病原菌大斑突脐孢菌能在病残体内越冬,病残体内会残留大量的休眠菌丝体,另外一
些分生孢子也能在病残体上越冬,第二年在玉米的生长期内,残留在病残体上的越冬菌原菌会产生孢子,
随风飘散,或者随雨水飞溅到玉米叶片上,在湿度、温度适合时,就会在叶片上大量萌发,再进行繁殖,
导致玉米植株发病,形成病斑后,温湿条件适合又会大量产生分生孢子,在空中飘散,随气流传播,进
行多次再侵染,造成病害流行。当温度达到25℃左右时,病原菌的分生孢子便会产生,一般在15℃以
下时,湿度低于60%时,则病害会受到抑制。
5
DB52/T1501.9—2020
BB
附录B
(规范性附录)
玉米抗大斑病抗病性鉴定记载、评价表
B.1玉米大斑病抗病性鉴定田间调查记载表
见表B.1。
表B.1玉米大斑病抗病性鉴定田间调查记载表
播种(移栽)日期:鉴定地点:
经纬度:海拔:接种日期:
调查人:记录人:调查日期:
叶片病害级别
鉴定编号调查总叶数
0级1级3级5级7级9级
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
…
注:调查时根据调查标准逐株逐叶进行,用“正”字法进行记载叶片病害级别。
6
DB52/T1501.9—2020
B.2玉米大斑病抗病性评价表
见表B.2。
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