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文档简介
1、植物组织培养的原理是?课前提问:2、植物组织培养的过程?3、植物细胞培养的概念是?动物细胞培养动物细胞核移植动物细胞融合动物细胞工程技术动物细胞工程动物细胞工程的基础地位第1课时
动物细胞培养12了解动物细胞培养的基本概念学习目标能准确说出动物细胞培养的主要步骤和条件3理解动物细胞培养的应用及其在生物技术中的重要性一、动物细胞培养概念:
从动物体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞,然后在适当的培养条件下,让这些细胞生长和增殖的技术。动物体组织单个细胞细胞生长和增殖取出分散适宜条件二、动物细胞培养的条件1、营养(液体培养基)+合成培养基血清等天然成分二、动物细胞培养的条件2、无菌、无毒的环境定期更换培养液,以便清除代谢物,防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害。①培养液、培养用具:灭菌处理;②在无菌环境下进行操作;二、动物细胞培养的条件3、适宜的温度、pH和渗透压二、动物细胞培养的条件95%空气
+
5%CO2的CO2培养箱CO2培养箱维持培养液的pH
O2:细胞代谢所必需
(有氧呼吸)培养皿松盖培养瓶4、适宜的气体环境1.什么是细胞贴壁、接触抑制,原代培养和传代培养?2.为什么动物细胞培养过程将组织分散成单个细胞?可用什么方法?3.为什么要进行分瓶培养?怎么处理?阅读教材P44-45“动物细胞培养的过程”,思考下列问题:三、动物细胞培养的过程三、动物细胞培养的过程第一步:取动物组织并剪碎第二步:分散成单个细胞并制成细胞悬液第三步:转入特定培养液进行原代培养第四步:分装,进行传代培养原因是:幼龄动物细胞的分化程度低,细胞增殖能力更强,
更容易培养。
三、动物细胞培养的过程动物组织?第一步:取动物组织并剪碎幼龄?老龄?2、方法是?1、分散成单个细胞原因是?二、动物细胞培养的过程第二步:分散成单个细胞并制成细胞悬液需要注意?胃蛋白酶?时间和浓度(1)悬浮生长类:体外培养细胞类型:二、动物细胞培养的过程(2)贴壁生长类:(大多数)悬浮生长类贴壁生长类体外培养的动物细胞,一段时间后细胞通常会停止分裂增殖①会因细胞密度过大
②有害代谢物积累③培养液中营养物质缺乏①会因细胞密度过大
②有害代谢物积累③培养液中营养物质缺乏④接触抑制现象刚开始铺展贴壁生长贴壁生长并进行有丝分裂单层相互接触出现接触抑制思考:接触抑制现象与细胞膜哪种成分有关?体现了细胞膜的什么功能?与细胞膜上的糖蛋白有关;
体现了进行细胞间信息交流的功能接触抑制二、动物细胞培养的过程思考“细胞增殖到互相接触的时候,细胞膜识别了这种信息,就会使细胞停止分裂繁殖,出现接触抑制的现象”。试结合上述解释,举例说明哪种细胞无接触抑制现象,并阐述原因。癌细胞;癌细胞的细胞膜上糖蛋白等物质减少单层细胞多层细胞悬浮生长类贴壁生长类体外培养的动物细胞,一段时间后细胞通常会停止分裂增殖①会因细胞密度过大
②有害代谢物积累③培养液中营养物质缺乏①会因细胞密度过大
②有害代谢物积累③培养液中营养物质④接触抑制现象故需
传代培养原代培养:指分瓶之前,动物组织经处理后的初次培养。传代培养:分瓶后的细胞培养。二、动物细胞培养的过程第三步:转入特定培养液进行原代培养第四步:分装,进行传代培养①悬浮生长类:直接用离心法收集。②贴壁生长类:重新用胰蛋白酶等处理,使之分散成单个细胞,然后再用离心法收集。再进行分瓶培养收集细胞的方法二、动物细胞培养的过程第四步:分装,进行传代培养1.什么是细胞贴壁、接触抑制,原代培养和传代培养?2.为什么动物细胞培养过程将组织分散成单个细胞?可用什么方法?3.为什么要进行分瓶培养?怎么处理?三、动物细胞培养的过程归纳总结:植物组织培养和动物细胞培养的比较比较项目植物组织培养动物细胞培养原理培养基性质培养基特有成分培养过程培养结果培养目的相同点获得细胞或细胞产物常用固体培养基完整植株动物血清常用液体培养基细胞增殖植物细胞的全能性获得大量细胞快速繁殖等植物激素①培养过程中细胞都进行有丝分裂,不涉及减数分裂;②均需无菌操作,需要适宜的温度、pH等条件。原代培养、传代培养脱分化、再分化动物细胞培养动物细胞培养的概念和原理动物细胞培养的条件动物细胞培养的过程原理:细胞的增殖在适当的培养条件下,让这些细胞生长和增殖的技术(1)营养条件(2)无菌、无毒的环境(3)温度、pH和渗透压(4)气体环境取动物组织单个细胞细胞悬液原代培养传代培养课堂小结
现学现用1、在将动物组织块分散成单个细胞时,可以使用胰蛋白酶。由此判断以下推测不合理的是()
A.动物细胞之间可能依靠蛋白质相互联系
B.处理时一定要注意处理时间、加酶量
C.胰蛋白酶一定不会对动物细胞造成损伤
D.动物细胞培养液的pH应与胰蛋白作用的适宜pH基本一致c2、
一般来说,动物细胞体外培养需要满足以下条件()①无毒的环境②无菌的环境③只使用合成培养基④温度与动物的体温相近⑤因在CO2培养箱中培养,故不需要O2
⑥多数动物细胞培养在7.2~7.4的pH环境
A.①②④⑤⑥B.①②③④C.①②③⑤⑥D.①②④⑥D
现学现用3.关于动物细胞培养的条件,下列叙述正确的是()
A.动物细胞培养基中加入血清的主要目的是补充细胞所需的未知成分
B.动物细胞培养可以在液体培养基或固体培养基中进行
C.动物细胞培养需要在无菌、无毒环境中进行,该条件只受环境因素的影响
D.动物细胞培养无需考虑渗透压问题4.航天员叶光富和王亚平在天宫课堂上展示了培养的心肌细胞跳动的视频。下列相关叙述正确的是(
)A.培养心肌细胞的器具和试剂都要先进行高压蒸汽灭菌B.培养心肌细胞的时候既需要氧气也需要二氧化碳C.心肌细胞在培养容器中通过有丝分裂无限增殖D.心肌细胞在神经细胞发出的神经冲动的支配下跳动AB
现学现用5.某研究小组准备对某种动物的肝细胞进行动物细胞培养,下列有关说
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