生物化学实验室技术考点

生物化学实验室技术考点姓名_________________________地址_______________________________学号______________________密封线1.请首先在试卷的标封处填写您的姓名，身份证号和地址名称。2.请仔细阅读各种题目，在规定的位置填写您的答案。一、选择题1.生物化学实验基本操作

1.1实验室安全规则

A.实验室内应禁止吸烟

B.实验室药品柜必须上锁

C.使用化学试剂时需佩戴防护眼镜

D.以上都是

1.2实验器材的使用方法

A.烧杯可以用来加热

B.移液管在移液时需垂直于液体表面

C.电子天平使用时不能超出其量程

D.以上都是

1.3实验试剂的配制方法

A.配制试剂时应使用玻璃棒搅拌

B.溶液稀释时应先加浓液后加水

C.溶液应避光保存

D.以上都是

1.4实验数据的记录方法

A.实验数据应记录在专用的实验记录本上

B.实验数据应真实、准确、详细

C.实验数据应按时整理归档

D.以上都是

1.5实验废液的处理方法

A.废液应倒入废液桶中

B.不同类型的废液应分开收集

C.废液应定期清理

D.以上都是

1.6实验室基本卫生要求

A.实验室内应保持整洁、有序

B.实验室内应禁止食品和饮料

C.实验室内应定期消毒

D.以上都是

1.7实验室设备的维护与保养

A.实验室设备应定期检查和维护

B.使用设备时应严格按照操作规程

C.设备损坏时应及时报修

D.以上都是

2.酶学实验

2.1酶的催化特性

A.酶的催化活性受温度影响

B.酶的催化活性受pH值影响

C.酶的催化活性受抑制剂影响

D.以上都是

2.2酶的活力测定方法

A.紫外分光光度法

B.比色法

C.定量分析

D.以上都是

2.3酶的动力学分析

A.酶的米氏常数（Km）

B.酶的最大反应速率（Vmax）

C.酶的激活能

D.以上都是

2.4酶的专一性

A.酶对底物有高度专一性

B.酶对产物有高度专一性

C.酶对底物和产物均有高度专一性

D.以上都不对

2.5酶的抑制与激活

A.抑制剂能与酶结合，降低酶活性

B.激活剂能与酶结合，提高酶活性

C.抑制剂和激活剂对酶活性无影响

D.以上都不对

2.6酶的变性与复性

A.酶变性时，酶活性丧失

B.酶复性时，酶活性恢复

C.酶变性和复性对酶活性无影响

D.以上都不对

2.7酶的分离纯化

A.亲和层析

B.离子交换层析

C.膜分离

D.以上都是

3.蛋白质组学实验

3.1蛋白质提取方法

A.磷酸盐缓冲溶液

B.氨水

C.硫酸铵

D.以上都是

3.2蛋白质电泳技术

A.等电聚焦电泳

B.SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳

C.水平凝胶电泳

D.以上都是

3.3蛋白质质谱技术

A.MALDITOFMS

B.ESIMS

C.飞行时间质谱

D.以上都是

3.4蛋白质免疫印迹技术

A.西方印迹法

B.免疫共沉淀

C.蛋白质芯片

D.以上都是

3.5蛋白质结构分析

A.X射线晶体学

B.NMR技术

C.荧光光谱技术

D.以上都是

3.6蛋白质功能研究

A.酶活性测定

B.抗原性测定

C.激活实验

D.以上都是

3.7蛋白质修饰与修饰酶

A.磷酸化

B.乙酰化

C.腐败

D.以上都是

4.核酸技术实验

4.1核酸提取方法

A.离心法

B.沉淀法

C.溶液法

D.以上都是

4.2核酸电泳技术

A.凝胶电泳

B.沉积电泳

C.滴度电泳

D.以上都是

4.3核酸杂交技术

A.Northern印迹

B.Southern印迹

C.Western印迹

D.以上都是

4.4核酸扩增技术

A.PCR

B.RTPCR

C.定量PCR

D.以上都是

4.5核酸测序技术

A.Sanger测序法

B.测序通量

C.第二代测序

D.以上都是

4.6核酸修饰与修饰酶

A.甲基化

B.乙酰化

C.磷酸化

D.以上都是

4.7核酸结构分析

A.X射线晶体学

B.NMR技术

C.荧光光谱技术

D.以上都是

5.生物大分子结构分析实验

5.1X射线晶体学

A.单晶X射线衍射

B.多晶X射线衍射

C.同位素标记X射线衍射

D.以上都是

5.2荧光光谱技术

A.荧光寿命测定

B.荧光光谱法

C.荧光共振能量转移

D.以上都是

5.3圆二色谱技术

A.环二色谱

B.反式圆二色谱

C.超速圆二色谱

D.以上都是

5.4红外光谱技术

A.傅里叶变换红外光谱

B.红外光谱法

C.光谱法

D.以上都是

5.5紫外光谱技术

A.紫外光谱法

B.紫外可见光谱法

C.分光光度法

D.以上都是

5.6NMR技术

A.核磁共振波谱法

B.核磁共振成像

C.NMR光谱法

D.以上都是

5.7表面等离子共振技术

A.表面等离子共振法

B.表面等离子共振光谱

C.SPR光谱法

D.以上都是

6.生物化学分析方法

6.1紫外分光光度法

A.光吸收法

B.分光光度法

C.紫外可见光谱法

D.以上都是

6.2傅里叶变换红外光谱法

A.傅里叶变换法

B.红外光谱法

C.分光光度法

D.以上都是

6.3高效液相色谱法

A.高效液相色谱法

B.色谱法

C.气相色谱法

D.以上都是

6.4气相色谱法

A.气相色谱法

B.液相色谱法

C.毛细管电泳法

D.以上都是

6.5毛细管电泳法

A.毛细管电泳法

B.电泳法

C.分光光度法

D.以上都是

6.6生物质谱法

A.生物质谱法

B.质谱法

C.红外光谱法

D.以上都是

6.7原子吸收光谱法

A.原子吸收光谱法

B.荧光光谱法

C.分光光度法

D.以上都是

7.生物化学实验报告撰写

7.1实验目的与原理

A.明确实验目的

B.解释实验原理

C.阐述实验方法

D.以上都是

7.2实验方法与步骤

A.详细描述实验步骤

B.介绍实验器材

C.阐述实验注意事项

D.以上都是

7.3实验结果与分析

A.记录实验结果

B.分析实验数据

C.评价实验结果

D.以上都是

7.4实验讨论与结论

A.讨论实验结果

B.分析实验误差

C.得出实验结论

D.以上都是

7.5实验记录与数据

A.记录实验数据

B.数据处理

C.数据分析

D.以上都是

7.6实验改进与展望

A.提出实验改进措施

B.展望实验应用前景

C.分析实验局限性

D.以上都是

答案及解题思路：

1.D.实验室内应禁止吸烟、禁止使用化学试剂时不佩戴防护眼镜、不同类型的废液分开收集、实验室内保持整洁、有序、定期消毒，以及实验室设备定期检查和维护、严格按照操作规程、设备损坏及时报修。

2.D.酶的催化活性受温度、pH值、抑制剂等因素影响，可通过紫外分光光度法、比色法、定量分析等方法测定酶的活力，通过米氏常数（Km）、最大反应速率（Vmax）等参数进行酶的动力学分析，酶具有底物专一性，抑制剂和激活剂可降低或提高酶活性，酶在特定条件下会发生变性和复性，通过亲和层析、离子交换层析、膜分离等方法进行酶的分离纯化。

3.D.蛋白质提取方法包括磷酸盐缓冲溶液、氨水、硫酸铵等，蛋白质电泳技术包括等电聚焦电泳、SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳、水平凝胶电泳等，蛋白质质谱技术包括MALDITOFMS、ESIMS、飞行时间质谱等，蛋白质免疫印迹技术包括Western印迹、免疫共沉淀、蛋白质芯片等，蛋白质结构分析包括X射线晶体学、NMR技术、荧光光谱技术等，蛋白质功能研究包括酶活性测定、抗原性测定、激活实验等，蛋白质修饰与修饰酶包括磷酸化、乙酰化、腐败等。

4.D.核酸提取方法包括离心法、沉淀法、溶液法等，核酸电泳技术包括凝胶电泳、沉积电泳、滴度电泳等，核酸杂交技术包括Northern印迹、Southern印迹、Western印迹等，核酸扩增技术包括PCR、RTPCR、定量PCR等，核酸测序技术包括Sanger测序法、测序通量、第二代测序等，核酸修饰与修饰酶包括甲基化、乙酰化、磷酸化等，核酸结构分析包括X射线晶体学、NMR技术、荧光光谱技术等。

5.D.生物大分子结构分析实验包括X射线晶体学、荧光光谱技术、圆二色谱技术、红外光谱技术、紫外光谱技术、NMR技术、表面等离子共振技术等。

6.D.生物化学分析方法包括紫外分光光度法、傅里叶变换红外光谱法、高效液相色谱法、气相色谱法、毛细管电泳法、生物质谱法、原子吸收光谱法等。

7.D.生物化学实验报告撰写包括实验目的与原理、实验方法与步骤、实验结果与分析、实验讨论与结论、实验记录与数据、实验改进与展望等部分。二、填空题1.生物化学实验的基本操作有哪些？

①洗涤与干燥

②称量与溶解

③显微镜操作

④试剂配制

⑤分离与纯化

⑥检测与鉴定

2.酶的催化特性包括哪些方面？

①高效性

②特异性

③可调节性

④较为温和的反应条件

⑤酶原激活

3.蛋白质电泳技术有哪些分类？

①根据电泳介质分类：琼脂糖电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳等

②根据分离原理分类：等电聚焦电泳、SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳等

③根据蛋白质性质分类：分子量分级电泳、等电点分级电泳等

4.核酸杂交技术有哪些应用？

①基因表达分析

②基因定位与克隆

③检测病原微生物

④病理诊断与基因检测

5.生物大分子结构分析实验有哪些技术？

①X射线晶体学

②核磁共振波谱学

③蛋白质质谱分析

④荧光共振能量转移

⑤表面等离子共振

6.紫外分光光度法的原理是什么？

紫外分光光度法是利用分子吸收紫外可见光的特性来定量分析物质的含量。其原理是基于分子中的电子在紫外可见光照射下从基态跃迁到激发态时，会吸收特定波长的光。

7.实验报告的撰写包括哪些内容？

①实验目的与背景

②实验原理与理论依据

③实验材料与试剂

④实验方法与步骤

⑤实验结果与分析

⑥讨论与结论

⑦参考文献

答案及解题思路：

1.答案：洗涤与干燥、称量与溶解、显微镜操作、试剂配制、分离与纯化、检测与鉴定。

解题思路：根据生物化学实验的基本步骤和操作，列出常见的基本操作。

2.答案：高效性、特异性、可调节性、较为温和的反应条件、酶原激活。

解题思路：回顾酶学的基本知识，总结酶的催化特性。

3.答案：根据电泳介质分类、根据分离原理分类、根据蛋白质性质分类。

解题思路：了解蛋白质电泳技术的分类方法，根据分类依据进行总结。

4.答案：基因表达分析、基因定位与克隆、检测病原微生物、病理诊断与基因检测。

解题思路：根据核酸杂交技术的应用领域，列举其主要应用。

5.答案：X射线晶体学、核磁共振波谱学、蛋白质质谱分析、荧光共振能量转移、表面等离子共振。

解题思路：根据生物大分子结构分析实验的常用技术，列出相关技术名称。

6.答案：紫外分光光度法是利用分子吸收紫外可见光的特性来定量分析物质的含量。

解题思路：解释紫外分光光度法的原理，即分子吸收特定波长的光。

7.答案：实验目的与背景、实验原理与理论依据、实验材料与试剂、实验方法与步骤、实验结果与分析、讨论与结论、参考文献。

解题思路：根据实验报告的撰写规范，列出实验报告应包含的内容。三、判断题1.实验室安全规则中，禁止将实验器材随意摆放。

答案：正确

解题思路：实验室安全规则要求实验器材必须按照规定摆放，以防止实验过程中发生意外伤害，保证实验环境的安全。

2.酶的催化活性与温度无关。

答案：错误

解题思路：酶的催化活性受温度影响较大，在一定温度范围内，酶活性温度的升高而增加，但超过一定温度后，酶活性会下降甚至失活。

3.蛋白质电泳技术中，SDSPAGE适用于蛋白质的分离纯化。

答案：正确

解题思路：SDSPAGE（聚丙烯酰胺凝胶电泳）是一种常用的蛋白质分离技术，通过SDS（十二烷基硫酸钠）处理，使蛋白质分子带负电荷，从而实现蛋白质的分离。

4.核酸杂交技术可以用于基因表达分析。

答案：正确

解题思路：核酸杂交技术是一种检测和定量基因表达的方法，通过将探针与目标DNA或RNA进行杂交，可以分析基因表达水平。

5.X射线晶体学是研究生物大分子结构的常用技术。

答案：正确

解题思路：X射线晶体学是研究生物大分子结构的重要技术之一，通过X射线衍射实验，可以解析生物大分子的三维结构。

6.紫外分光光度法适用于所有物质的定量分析。

答案：错误

解题思路：紫外分光光度法是一种常用的定量分析方法，但并非适用于所有物质，具有紫外吸收特性的物质才能进行定量分析。

7.实验报告的撰写应简洁明了，重点突出。

答案：正确

解题思路：实验报告的撰写应遵循简洁明了、重点突出的原则，以便读者快速了解实验目的、方法、结果和结论。四、简答题1.简述实验室安全规则。

实验室安全规则包括：

进入实验室前，必须穿戴实验服、防护眼镜和必要的防护手套。

严格遵循实验操作规程，不得擅自改动实验步骤。

使用化学品时，必须了解其特性，并遵循相应的安全操作规程。

实验室内禁止吸烟、饮食和饮水。

不得将实验器材随意放置，必须归位。

发生意外情况时，应立即停止实验，及时报告并采取相应措施。

2.简述酶的催化特性。

酶的催化特性包括：

高效性：酶的催化效率远高于无机催化剂。

特异性：酶对底物具有高度专一性。

可调节性：酶的活性可以受到外界因素的影响而发生变化。

可逆性：酶在催化反应前后，其本身不发生变化。

3.简述蛋白质电泳技术的原理和应用。

蛋白质电泳技术的原理：

利用电场力使蛋白质带电粒子在凝胶电泳介质中移动，根据蛋白质带电性质、分子量和迁移速度的差异，将蛋白质分离。

应用：

蛋白质纯度鉴定

蛋白质结构分析

基因表达分析

4.简述核酸杂交技术的原理和应用。

核酸杂交技术的原理：

利用核酸序列的互补性，将探针与待测核酸序列进行杂交，从而检测待测核酸序列的存在。

应用：

DNA/RNA定性、定量检测

基因表达分析

基因突变检测

5.简述生物大分子结构分析实验的常用技术。

生物大分子结构分析实验的常用技术包括：

X射线晶体衍射

核磁共振波谱法

荧光光谱法

电子显微镜技术

6.简述紫外分光光度法的原理和应用。

紫外分光光度法的原理：

利用待测物质在紫外可见光区具有特定的光吸收特性，通过测定其吸光度，可以定量分析待测物质的浓度。

应用：

物质的定量分析

物质的定性鉴定

基因表达分析

7.简述实验报告的撰写步骤。

实验报告的撰写步骤：

实验目的：阐述实验的目的和意义。

实验原理：介绍实验的理论依据。

实验方法：详细描述实验步骤和仪器设备。

实验结果：记录实验数据，并进行必要的分析和讨论。

实验结论：总结实验结果，并得出结论。

答案及解题思路：

1.答案：实验室安全规则包括穿戴实验服、遵守实验操作规程、使用化学品时了解其特性、禁止在实验室内吸烟和饮食、归位实验器材、遇到意外情况及时报告等。

解题思路：回忆实验室安全知识，结合实际案例进行分析。

2.答案：酶的催化特性包括高效性、特异性、可调节性和可逆性。

解题思路：了解酶的催化作用特点，结合实例说明。

3.答案：蛋白质电泳技术的原理是利用电场力使蛋白质带电粒子在凝胶电泳介质中移动，根据蛋白质带电性质、分子量和迁移速度的差异进行分离。应用包括蛋白质纯度鉴定、蛋白质结构分析和基因表达分析等。

解题思路：掌握蛋白质电泳技术的原理和应用，结合实际案例进行分析。

4.答案：核酸杂交技术的原理是利用核酸序列的互补性，将探针与待测核酸序列进行杂交，从而检测待测核酸序列的存在。应用包括DNA/RNA定性、定量检测、基因表达分析和基因突变检测等。

解题思路：了解核酸杂交技术的原理和应用，结合实际案例进行分析。

5.答案：生物大分子结构分析实验的常用技术包括X射线晶体衍射、核磁共振波谱法、荧光光谱法和电子显微镜技术。

解题思路：掌握生物大分子结构分析实验的常用技术，结合实际案例进行分析。

6.答案：紫外分光光度法的原理是利用待测物质在紫外可见光区具有特定的光吸收特性，通过测定其吸光度，可以定量分析待测物质的浓度。应用包括物质的定量分析、物质的定性鉴定和基因表达分析等。

解题思路：了解紫外分光光度法的原理和应用，结合实际案例进行分析。

7.答案：实验报告的撰写步骤包括实验目的、实验原理、实验方法、实验结果和实验结论。

解题思路：熟悉实验报告的撰写步骤，结合实际案例进行分析。五、论述题1.论述实验室安全的重要性。

实验室安全是生物化学实验顺利进行的基础，它关系到实验人员的身体健康和生命安全，以及实验结果的准确性。实验室安全的重要性体现在以下几个方面：

保障实验人员的人身安全，防止意外伤害和中毒；

保护实验设备免受损害，保证实验的顺利进行；

维护实验室的环境，避免对环境造成污染；

保证实验数据的准确性，提高科研工作的质量。

2.论述酶在生物化学实验中的应用。

酶在生物化学实验中具有重要作用，主要应用

催化反应：酶能催化各种生物化学反应，加速反应速率，提高实验效率；

特异性：酶具有高度特异性，能选择性地催化特定底物，便于实验操作；

灵活性：酶在不同条件下具有不同的催化活性，便于调整实验条件；

应用广泛：酶在生物化学、药物研发、食品安全等领域具有广泛应用。

3.论述蛋白质电泳技术在生物化学实验中的应用。

蛋白质电泳技术在生物化学实验中的应用主要包括：

分离蛋白质：根据蛋白质的分子量、电荷等特性进行分离；

定量分析：通过蛋白质条带强度分析蛋白质含量；

蛋白质鉴定：根据蛋白质的分子量和条带位置鉴定蛋白质种类；

交互分析：通过蛋白质电泳与质谱技术联用，进行蛋白质鉴定和功能分析。

4.论述核酸杂交技术在生物化学实验中的应用。

核酸杂交技术在生物化学实验中的应用主要包括：

基因克隆与表达：用于筛选和鉴定目的基因；

诊断检测：用于疾病检测、遗传病诊断等；

基因功能研究：用于研究基因表达调控、信号传导等；

分子标记：用于遗传多样性分析、基因定位等。

5.论述生物大分子结构分析实