2023土壤和沉积物氨基甲酸酯类农药的测定 高效液相色谱 三重四级杆质谱法

土壤和沉积物氨基甲酸酯类农药的测定高效液相色谱-三重四极杆质谱法目 次前言 ii适用范围 1规范性引用文件 1方法原理 1干扰和消除 1试剂和材料 2仪器和设备 2样品 3分析步骤 4结果计算与表示 7精密度和准确度 9质量保证和质量控制 10废物处理 10附录A（规范性附录）方法检出限和测定下限 11附录B（资料性附录）方法精密度和准确度 12i土壤和沉积物氨基甲酸酯类农药的测定高效液相色谱-三重四极杆质谱法适用范围本标准规定了测定土壤和沉积物中15-三重四极杆质谱法。15种氨基甲酸酯类农药的测定。101.01.0μl种氨基甲酸酯类农1～2μg/kg4～8μg/kgA。规范性引用文件GB17378.3 3部分：样品采集、贮存与运输GB17378.5 5部分：沉积物分析HJ494 水质采样技术指导HJ613 土壤干物质和水分的测定重量法HJ783 土壤和沉积物有机物的提取加压流体萃取法HJ/T166 土壤环境监测技术规范方法原理干扰和消除1试剂和材料甲醇（CH3OH）：液相色谱级。二氯甲烷（CH2Cl2）：液相色谱级。乙酸铵（CH3COONH4）：优级纯。（NaO。马弗炉中450℃灼烧4h，稍冷却后置于干燥器中备用。甲醇-二氯甲烷混合溶剂：1+2。用甲醇（5.1）和二氯甲烷（5.2）按1：2体积比混合。甲醇-二氯甲烷混合溶剂：1+9。用甲醇（5.1）和二氯甲烷（5.2）1：9体积比混合。乙酸铵溶液：c（CH3COONH4）=5mmol/L。取192.5g乙酸铵5.3500ml。甲醇-乙酸铵混合溶液：2+3。用甲醇（5.1）和乙酸铵溶液（5.7）按2：3体积比混合。氨基甲酸酯类农药标准贮备液：ρ=100mg/L。直接购买市售有证标准溶液，按标准溶液证书要求保存。氨基甲酸酯类农药标准使用液：ρ=10mg/L。500µl氨基甲酸酯类农药标准贮备液（5.9）5ml容量瓶中，用甲醇（5.1）定容，混匀，置于-186个月。内标标准贮备液：ρ=100mg/L。直接购买市售甲萘威-D7和灭多威-D3有证标准溶液，按标准溶液证书要求保存。内标标准使用液：ρ=10mg/L。取500µl内标标准贮备液（5.11）于5ml容量瓶中，用甲醇（5.1）定容，混匀，置于-18℃冰箱，密封、避光保存，保存期为6个月。固相萃取柱：石墨化炭黑/N-丙基乙二胺复合填料萃取柱（500mg/6ml）或其它性能相近的固相萃取柱。5.14硅藻土：0.6～0.9mm（30～20目。5.15石英砂：150～830µm（200～100目。马弗炉中450℃灼烧4h，稍冷却后置于洁净干燥器中备用。5.16滤膜：0.22µm聚四氟乙烯或其它等效材质。5.17氮气：纯度≥99.99%。5.18氩气：纯度≥99.99%。仪器和设备高效液相色谱-三重四极杆质谱仪。2质谱仪：三重四极杆质谱，配有电喷雾离子源，具备多反应监测功能。色谱仪：具备梯度洗脱功能。1.750mm，2.1mm。也可使用满足分析要求的其它性能相近的色谱柱。冷冻干燥仪。（50ml以下萃取池浓缩装置：氮吹浓缩仪、旋转蒸发仪或其他性能相当的设备。0.01g。一般实验室常用仪器和设备。样品样品采集和保存按照HJ/T166HJ494的相关要求采集水体沉积GB17378.3的相关要求采集海洋沉积物样品。样品采集后，0～4℃密封、避光保存，7d内完成萃取。样品的制备10g（0.01g）的样品。5.15.4提取管中。沉积物样品一份用于测定含水率；另一份用于提取，提取方法参照土壤样品。水分的测定按照HJ613测定土壤样品干物质含量，按照GB17378.5测定沉积物样品含水率。试样的制备提取加压流体萃取采用甲醇-二氯甲烷混合溶剂（5.5）提取样品中氨基甲酸酯类农药，压力10.34Mpa，80ºC5560s，循环萃取3次。或按照HJ783进行萃取条件的设置和优化。索氏提取将滤筒置于索氏提取器回流管中，在圆底溶剂瓶中加入200ml甲醇-二氯甲烷混合溶剂35.，提取12h～6次h注：若经过验证也可使用其它等效提取方法。浓缩用浓缩装置（6.4）将萃取液（7.4.1）浓缩至近1.0ml，待净化。净化用5.0l甲醇5.6以2mmin5.15.0ml甲醇-二氯甲烷混合溶剂（5.6）洗脱萃取柱，收集洗脱液于刻度管中。注：使用不同批次萃取柱净化样品时，需通过实验确定洗脱溶剂用量。净化后浓缩（7.4.3）30ºC20µl内标标准使用（5.1-（5.定容至1.0ml（5.1，待测。处理好的试样应于-18℃以下冰箱冷冻保存，在30d完成分析。7.5空白试样的制备用石英砂（5.15）替代实际样品，按照与试样制备（7.4）相同的步骤制备空白试样。分析步骤参考测量条件色谱条件A甲醇（5.，流动相B571ml/min；进样体积：1.0µl；柱温：45ºC。表1 梯度洗脱程序时间（min）流动相A（%）流动相B（%）040605.09915.59917.04060质谱条件电喷雾源，正离子模式，毛细管电压：3000V，脱溶剂气温度：350ºC，源温：110ºC，脱溶剂气流量：500ml/min，锥孔气流量：50ml/min。检测方式为多反应监测，具体条件见4表2。注：对于不同质谱仪器，参数可能存在差异，测定前应将质谱参数优化到最佳。表2 目标物多反应监测条件编号化合物监测离子对（m/z）锥孔电压（V）碰撞能量（V）1杀线威237.1>71.9*1210237.1>90.112122灭多威163.4>88.4*159163.4>106.015103二氧威224.4>123.4*2515224.4>167.125134涕灭威208.5>116.3*1010208.5>88.91085恶虫威224.4>167.4*189224.1>109.118106克百威222.4>165.4*2515222.4>123.025147残杀威210.5>111.3*2013210.5>168.120128甲萘威202.4>145.2*2018202.4>127.120169乙硫苯威226.4>107.2*159226.4>164.1151210抗蚜威239.5>72.4*1819239.5>182.2181811异丙威194.5>95.0*1512194.5>137.2151212仲丁威208.4>95.3*1512208.4>152.0151513甲硫威226.4>169.4*2013226.4>121.0201214猛杀威208.4>109.4*2015208.4>151.2201615棉铃威400.5>238.2*128400.5>91.1121016灭多威-D3166.1>88.1*15917甲萘威-D7209.0>152.1*2018注：带*为定量离子对。质谱仪的校正按照仪器说明书进行质谱仪质量数和分辨率校正，仪器性能正常后进行测试。5校准标准曲线的建立移取适量的氨基甲酸酯类农药标准使用液（5.10）5ml100µl内标标5.2-5.85系列，标准系列浓度分别为0.02µg/ml、0.05µg/ml、0.10µg/ml、0.20µg/ml0.50µg/ml（此为参考浓度分析，平均相对响应因子计算标准系列第i点中目标物的相对响应因子RRFi，按照公式（1）计算：RRF

iISi

（1）iISi iA式中：ARRFi—标准系列中第i点目标物的相对响应因子；Ai—标准系列中第i点目标物的峰面积；AISi—内标物的峰面积；ISi—/ml；iiµml。目标物的平均相对响应因子RRF，按照公式（2）计算：nn RRFi1 （2）n式中：RRF—目标物的平均相对响应因子；RRFi—标准系列中第i点目标物的相对响应因子；n—标准系列点数，5。试样测定按照与标准曲线建立（8.2.1）相同的步骤进行试样（7.4）的测定。空白试验按照与试样测定（8.3）相同的步骤进行空白试样（7.5）的测定。6结果计算与表示定性分析0.1minS/N（目标物在仪器中的信号/仪器噪声）3。样品中某组分定性离子的相对丰度与浓度接近的标准溶液中定性离子相对丰度Kstd进行比较，偏差符合表3规定，即可判定为样品中存在目标物。15种氨基甲酸酯类农药及2种内标物总离子流图见图1。样品中某组分定性离子的相对丰度Ksam按照公式（3）计算：Ksam

21

100%

（3）式中：Ksam─样品中某组分定性离子的相对丰度，%；2（或峰高；1（。标准溶液中某组分定性离子的相对丰度Kstd按照公式（4）计算：Kstd

d21

100%

（4）式中：Kstd─标准溶液中某组分定性离子的相对丰度，%；2─（；1─（。表3 定性确认时相对离子丰度的最大允许偏差/%指标评价标准KstdKstd>5020<Kstd≤5010<Kstd≤20Kstd≤10Ksam的最大允许偏差±20±25±30±50定量分析用平均相对响应因子计算试样中目标物浓度按照公式（5）进行计算：i xISi

（5）AIS

RRF式中：im/；Ax—目标物的峰面积；AIS—内标物的峰面积；7IS0.2/m；RRF—目标物的平均相对响应因子。

17

1616

1515

1414

1313

1212

1111

1010

99

88

77

66

55

44

33

22

11

8用标准曲线计算当目标物采用标准曲线进行校准时，试样中目标物浓度i结果计算土壤样品中目标物的质量浓度按照公式（6）进行计算：1iwi11i

（6）m1wdmm式中：w1i—土壤样品中第i种目标物浓度，µg/kg；1i—土壤试样中第i种目标物浓度，mg/L；1m；m1—土壤样品湿重，g；wdm—土壤干物质含量，%。沉积物样品中目标物的质量浓度按照公式（7）进行计算：2iw2i22i

（7）2m2O)2m—i种目标物浓度，µg/kg；2i—沉积物试样中第i种目标物浓度，mg/L；V2—沉积物试样定容体积，ml；m2—沉积物样品湿重，g；HOwHO2—沉积物水分含量，%。结果表示测定结果小数点位数与方法检出限保持一致，最多保留3位有效数字。精密度和准确度精密度40μg/kg、2μg/kg的统一沉积物样品62.4%～17%，2.3%～21%；实验室间相对标准偏差范围分别为：9.8%～22%，6.7%～21%；重复性限分别为：8µg/kg～11µg/kg，1µg/kg；再现性限分别为：13µg/kg～22µg/kg，1µg/kg。精密度结果参见附录B。9准确度六家实验室对氨基甲酸酯类农药浓度均小于检出限的沉积物统一样品进行加标分析测40μg/kg2加标回收率最终值分别为：（85.4±36）%～（113±34）%，（92.6±17）%～（110±46）%。准确度结果参见附录B。质量保证和质量控制空白试验20个样品或每批次（20个样品/批）1个实验室空白，空白测试结果应低于方法检出限。校准r≥0.995，标准系列目标物相对响应因子的相对标准偏差≤20%。20（20个样品/批）进行1次连续校准，测定结果相对偏差应≤20%，否则需重新建立标准曲线。平行样每20个样品或每批次（少于20个样品/批）至少分析1个平行样，平行样相对偏差≤30%。基体加标20个样品或每批次（20个样品/批）1个基体加标样，加标回收率应45%～160%之间。废物处理实验中产生的废液和废物应集中收集，并做好相应标识，委托有资质的单位进行处理。10附录A（规范性附录）方法检出限和测定下限101.01.0μl种氨基甲酸酯类农A.1。表A.1方法检出限和测定下限序号化合物英文名称CASNo.检出限（µg/kg）测定下限（µg/kg）1杀线威Oxamyl23135-22-0282灭多威Methomyl16752-77-5283二氧威Dioxacarb6988-21-2144涕灭威Aldicarb116-06-3145恶虫威Bendiocarb22781-23-3146克百威Carbofuran1563-66-2147残杀威Propoxur114-26-1148甲萘威Carbaryl63-25-2149乙硫苯威Ethiofencarb29973-13-51410抗蚜威Pirimicarb23103-98-21411异丙威Isoprocarb2631-40-52812仲丁威Fenobucarb3766-81-21413甲硫威Mercaptodimethur2032-65-71414猛杀威Promecarb2631-37-01415棉铃威Alanycarb83130-01-21411附录B（资料性附录）B.1给出B.2给出方法准确度指标。表B.1方法的精密度序号化合物平均值（µg/kg）实验室内相对实验室间相对标准偏差重复性限r（µg/kg）再现性限R（µg/kg）加标浓度：40µg/kg1杀线威382.6～171810222灭多威454.6～121311193二氧威403.7～11158184涕灭威412.5～13129165恶虫威372.4～14149176克百威453.1～11159217残杀威424.0～10169218甲萘威402.9～151110169乙硫苯威344.5～112292210抗蚜威414.5～9.51581911异丙威412.7～1111101512仲丁威413.5～101481713甲硫威393.8～8.69.881314猛杀威433.4～151291715棉铃威406.0～14111116加标浓度：2µg/kg1杀线威27.2～2119112灭多威24.4～1610113二氧威24.1～1716114涕灭威24.9～9.513115恶虫威25.4～138.6116克百威23.1～1421117残杀威24.1～9.411118甲萘威23.5～7.015119乙硫苯威24.8～11151110抗蚜威22.9～8.0111111异丙威23.8～16121112仲丁威22.3～12111113甲硫威23.8～8.89.31114猛杀威23.4～5.66.71115棉铃威25.7～15111112表B.2方法的准确度化合物样品浓度（µg/kg）加标回收率范围P（%）P(%)SP(%)加标回收率最终值p2S（%）P加标浓度：40µg/kg1杀线威<276.6～12395.61895.6±362灭多威<291.1303二氧威<179.2～11510115101±304涕灭威<189.0～11810312103±2