参麦注射液对急性心肌梗死大鼠心室重构的影响

参麦注射液对急性心肌梗死大鼠心室重构的影响〔作者:___________单位:___________:___________〕

温晓竞陈彦静李建东马建伟张晓云【摘要】目的：探讨参麦注射液对急性心肌梗死〔AMI〕大鼠心室重构的影响。方法：通过结扎冠状动脉前降支建立AMI模型大鼠，AMI后24h存活的48只大鼠随机分为四组：AMI后1周模型组；AMI后参麦注射液治疗1周组；AMI后2周模型组；AMI后参麦注射液治疗2周组。另设1周、2周假手术组各8只。治疗组每日腹腔注射参麦注射液1次，AMI模型组和假手术组大鼠腹腔注射等量的生理盐水。测量各组心室重构参数。结果：与假手术组比拟，AMI后1周时，心室腔已明显扩大〔P005〕；到梗死后2周时，心室腔内径扩大更明显，与假手术组相比有显著性差异〔P001〕，且心室重量指数〔VWI〕比假手术组明显增加〔P005〕。参麦注射液治疗2周后可改善心梗后心室重量指数增加、心室腔扩大的病理变化〔P005〕。结论：参麦注射液能改善大鼠AMI后心室重构。

【关键词】参麦注射液；急性心肌梗死；心室重构

【ABSTRACT】Objective:ToinvestigatetheeffectsofShenmaiinjectiononventricularremodelingafteracutemyocardialinfarction(AMI)inrats.Methods:AMIwasestablishedbyligatingtheanteriordescendingcoronaryarteryinmaleSDrats.Twentyfourhoursaftertheprocedure,the48survivingratswereseperatedrandomlyintoAMIoneweekgroup、AMItwoweekgroup、Shenmaiinjectiontreatmentoneweekandtwoweekgroups(n=12).Oneweekshamoperatedandtwoweekshamoperatedgroupsweretakenrandomlyasnoninfarctioncontrol.Aftertreatedwiththedrugandplacebobyintraperitonealinjection(IP),theventricularremodelingofoneweekandtwoweekgroupswasassessed.Results:Comparedwithshamoperatedgroup,leftventriculardiameter(LVD)wasincreasedsignificantlyinAMIgroupafteraweek〔P005〕；LVDandventricularweightindex(VWI)wereallincreasedsignificantly〔P005or001〕inAMIgroupaftertwoweeks.IncomparisonwithAMIgroup,LVDandVWIwerealldecreasedsignificantlyinShenmaiinjectiontreatmentgroupaftertwoweeks〔P005〕.Conclusion:ShenmaiinjectioncanpreventleftventricularremodelingafterAMIinrats.

【KEYWORDS】Shenmaiinjection;Acutemyocardialinfarction;Ventricularremodeling

参麦注射液源自古方生脉散，具有益气复脉、养阴生津的成效，临床上广泛用于治疗心脑血管疾病。近年来的研究发现，参麦注射液具有扩张冠状动脉，增加冠脉血流量，促进损伤的DNA合成，加速心肌修复的作用，还可以改善心肌缺氧，增加心肌收缩力。但关于参麦注射液对急性心梗后心室重构作用的深入研究较少，尤其对心梗后早期重构的干预研究缺乏。因此本实验着重研究参麦注射液对心梗后早期左心室重构发生、开展的影响特点，探讨参麦注射液改善心梗后心室重构的机制，为其更广泛深入的临床应用提供科学的实验依据。

1材料和方法

11材料

111实验动物健康雄性10～12周龄SD大鼠70只，体重250～280g，由中国科学院动物研究所维通利华实验动物中心提供。

112药品和试剂参麦注射液〔杭州正大青春保药业，10ml/支，含红参、麦冬各1g〕；氨基甲酸乙酯〔北京化学试剂公司〕；青霉素注射液〔华北制药股份〕。

113主要器械和仪器眼科手术器械一套；AP641G压力放大器〔NIHONKOHDEN，Japan〕；压力换能器〔NIHONKOHDEN，Japan〕；MD200－1上皿电子天平〔上海电子天平厂〕；电子天平〔Sartorius，Germany〕；多导生理记录及分析系统〔北京微信斯达〕。

12方法

121动物模型建立按照Olivetti等[1~3]方法稍加改进，结扎大鼠左冠状动脉前降支〔LAD〕建立急性心肌梗死〔AMI〕模型：SD大鼠用007mlkg-1氨基甲酸乙酯溶液麻醉后，固定于鼠板。手术部位脱毛，碘酒、酒精消毒，沿左侧胸骨旁斜行切口，上界为两前肢后缘连线，下界为第5肋间，依次切开皮肤、浅筋膜和深筋膜，并用止血钳钝性别离胸大肌和前锯肌交界处，在靠胸骨缘处用止血钳钝性别离第3、4肋间进胸，翻开胸腔，剪开心包膜，挤压出心脏，在左心耳与肺动脉圆锥之间找到冠状动脉，在动脉起始点下方2~3mm处，用6―0号丝线结扎冠状动脉，迅速将心脏放回胸腔，逐层缝合肌肉和皮肤，局部消毒抗菌。术中肉眼观察，结扎冠脉左前支后，其血液供给区心脏外表颜色由红变为灰白，青紫。手术前后均记录体表心电图，以Ⅱ导ST段弓背向上抬高02mV以上为结扎成功的标志。参照AMIlavetz方法[4]，选择符合标准者进入实验。另设1周、2周假手术〔Sham,SH〕组，各8只。假手术组除不结扎冠状动脉外，其余操作与AMI模型组动物相同。于术后给予青霉素4万U，肌肉注射，1次/d，共3d。动物清醒后按常规饲养。

122实验分组术后24h存活的48只心肌梗死大鼠随机分为：①AMI1周组：急性心肌梗死〔AMI〕后1周模型组；②SM1周组：AMI后参麦注射液治疗1周组；③AMI2周组：AMI后2周模型组；④SM2周组：AMI后参麦注射液治疗2周组。每组12只。动物给药方案：各组给药时间皆自造模当日开始，参麦注射液给药量是依据人正常用量的5倍[5]量确定的。每日腹腔注射1次，连续给药至取材时为止；模型组和假手术组大鼠腹腔注射等量的生理盐水。

123心室重量及心室重量指数的测定待血流动力学指标测定完成后，迅速翻开胸腔摘取心脏，在冰生理盐水中洗去血液，去除心室周围组织，用电子天平(精确到001mg)称取心室重量(HW)，分别与体重相除，计算心室重量指数(VWI：HW/体重)。

124左室截面直径的测定参照张沛等[6]的方法测量，测完心脏重量后，迅速置于4%多聚甲醛固定液固定心肌组织。固定一周后，于长轴中点垂直横切心脏〔包括左室梗死区、非梗死区心肌组织〕，直接法测量左室腔内径(D)，即分别测定最短径(DAMIN)和最长径(DMAN)，取其几何平均值。

13统计学方法使用SPSS统计软件系统，所测数据以平均值±标准差表示，多组比拟采用方差分析，并做两组间两两比拟，P005为有显著性差异。

2结果

21实验动物一般情况AMI组大鼠均出现进食量减少，精神状况差，活动减少，口鼻及肢体远端紫绀，1周时一般情况稍有好转，但仍不及假手术组和参麦注射液治疗组，1周、2周取材时体重均明显降低。实验过程中，所有因手术、麻醉意外等原因死亡的，以及术后存活时间未达取材时间要求的动物，均不列入实验观察工程内。最终获得完整实验资料的大鼠46只，其中AMI1周组8只，SM1周组9只，AMI2周组6只，SM2周组8只，假手术1周〔SH1周〕组7只，假手术2周〔SH2周〕组8只。

22急性心梗后大鼠ECG的改变术前心电图正常，术后即刻ST段弓背抬高，术后24h心电图出现病理性q波，ST段抬高。参麦注射液组随治疗时间增加，ST段抬高逐渐减轻。

23心室重构肉眼观察结果假手术组大鼠心脏体积正常，颜色鲜红，外表光滑，无任何斑点；冠脉结扎术后1周，可见大鼠心脏左心室游离壁梗死区局部颜色变淡，变薄；术后2周时，可见大鼠心脏左心室游离壁局部的梗死区呈灰白色。参麦注射液治疗组均较相应的模型组好转。

24心室重构参数的变化如表1所示，与相对应假手术组比，急性心肌梗死后1周、2周模型组大鼠体重均减轻，虽无统计学差异，但也从一个侧面反映出心肌梗死对机体全身的严重损害。参麦注射液治疗后，大鼠体重较相对应的模型组有所恢复，说明参麦注射液发挥了其机体整体调节方面的作用优势。通过分别测定不同组别心脏的最短径(DAMIN)和最长径(DMAN)，取其几何平均值，求得左室腔内径(LVD)。从结果来看，急性心肌梗死后一周时，心室腔已明显扩大，与假手术组相比有显著性差异〔P005〕；到梗死后两周时，心室腔内径扩大更明显，与假手术组相比有显著性差异〔P001〕，且心室重量指数〔VWI〕比假手术组明显增加〔P005〕。参麦注射液治疗1周后，与模型组比拟无显著性差异〔P005〕；参麦注射液治疗2周后可改善心梗后心室重量指数增加、心室腔扩大的病理变化〔P005〕。表1参麦注射液对大鼠急性心肌梗死后心室重构参数的影响(略)

3讨论

参麦注射液由人参和麦冬两味药组成。人参性甘微苦，温，归脾、肺经。功能大补元气，固脱生津，安神。麦冬性甘微苦，寒，归肺、胃、心经。人参麦冬二药合用，共奏益气养阴，生津复脉之功。现代医学已经研究出其中人参的有效成分为人参皂甙和人参多糖。大量的动物实验证实，人参皂甙具有保护心肌毛细血管内皮细胞，减轻线粒体损伤，促进心肌细胞DNA合成，对缺氧时代谢和超微结构损伤均有保护作用。并能促进心肌毛细血管内皮细胞释放血管舒张因子―NO，扩张冠脉血管，增加冠脉血流量，并能防止心肌的再灌注损伤[7]。抑制Na+/K+ATP酶活性，使细胞内Ca2+水平上升而有正性肌力作用。动物实验证明，麦冬能显著提高动物的耐缺氧能力和增加冠脉流量，对心肌缺血有明显保护作用，并能抗心律失常及改善心肌收缩力[8]。因此，用人参和麦冬制成的注射液，其药性相辅相成，具有改善心肌的营养性血流量，扩张冠脉血管，改善心肌代谢，增强机体耐缺氧能力。心室重构是心力衰竭的共同的病理学特征，从心脏重量及几何构型来看，大量研究资料已证实，早期重构发生于梗死后几小时至6周，主要是梗死扩展〔InfarctExpansion，IE〕引起的区域性室壁扩张。近来Korup[9]等报道，根据连续心脏超声检查AMI患者一些参数演变特点，发现AMI后3h内，左心室即有扩张。梗死段膨展、非梗死段心肌的反响性肥厚及扩张，导致心室扩大和几何形态改变，一起构成早期重构的结构特点。而心肌梗死后左室容积增加是远期发生心脏性死亡最重要的危险因子，研究还发现左室容积是影响心肌梗死后生存率的决定因素，进行性左室扩张为更加高危险状态。本研究结果显示，AMI后一周时，心脏/重量指数、左心腔直径较假手术组增加，到心肌梗死两周时，与假手术组相比，心脏/重量指数、左心腔直径增加，并有显著性差异。结果与卜聪亚等[2]和秦涛等[10]的报道一致。参麦注射液治疗两周后，即明显改善AMI后心脏/重量指数、左心腔直径病理性增高，说明参麦注射液可以改善AMI后心室重构，降低AMI急性期心功能的损害，有利于改善心功能远期预后。已有研究说明AMI后心室重构中心肌细胞凋亡起了非常重要的作用，其机制与TNFα过度表达有关[11]；还与PTEN表达降低，p13K/Akt信号通路激活有关[12]。现已明确，心室重构及肥厚使RAAS反响性激活，AngⅡ分泌过多，从而促进胶原的合成，导致了AMI后胶原的沉积，使心脏功能紊乱，心肌僵硬度增加[13]。我们以前的工作说明，参麦注射液对AngⅡ诱导的培养心肌细胞凋亡有明显抑制作用[14]。故推测参麦注射液缓解AMI后心室重构的作用可能与抑制心肌细胞凋亡和AngⅡ的作用有关。本研究显示，参麦注射液能明显缓解大鼠AMI后的心室重构，改善心功能，说明参麦注射液对心力衰竭患者有益，为临床研究提供了实验依据。

参考文献

1OlivettiG,CapassoJM,MeggsLG,etal.Cellularbasisofchronicventricularremodelingaftermyocardialinfarctioninrats[J].CircRes，1991,68:856869

2卜聪亚,陈运贞.大鼠急性心肌梗死后gp130基因异常表达的意义及氯沙坦干预的影响[J].中华心血管病杂志，2004,32(5):446450

3徐叔云，卞如濂，陈修.药理实验方法学[M].第3版.北京:人民卫生出版社，2002.10521054

4FisbeinMC,MelecanD,MarkoPR,etal.Experimentalmyocardialinfarctionintherats[J].AmJPathol，1978,90:5770

5徐叔云，卞如濂，陈修.药理实验方法学[M].第3版.北京:人民卫生出版社，2002.202204

6张沛,杨跃进,宋来凤,等.小剂量依那普利对大鼠急性心肌梗死左室重构和功能的影响[J].中华老年心脑血管病杂志,2000,2〔5〕:408411

7丁训左.参