饼干王若超知识与技能提升模块尚德蕴能日精日新62课件

饼干主讲教师：王若超知识与技能提升模块——尚德蕴能日精日新样品采集1数据处理4目录CONTENTS饼干样品制备及保存2样品检验3报告填写5样品检验3目录CONTENTS饼干碱度的测定色素的检测糖精钠的测定甜蜜素的测定苯甲酸、山梨酸的测定有机磷含量的测定总砷含量的测定高效液相色谱法原理01试剂及配制02标准溶液配制03材料及仪器设备04分析步骤05计算06饼干-样品检验色素的检测高效液相色谱法>>原理

试剂及配制标准溶液配制材料及仪器和设备分析步骤计算原理：试样用无水乙醇或80%乙醇提取后，经固相萃取柱净化，采用液相色谱检测，以保留时间定性，外标法定量。饼干-样品检验色素的检测高效液相色谱法>>原理

试剂及配制标准溶液配制材料及仪器和设备分析步骤计算甲醇(CH3OH)：色谱纯无水乙醇(CH3CH2OH)：色谱纯冰乙酸(CH3COOH)乙酸铵(CH3COONH4)饼干-样品检验色素的检测高效液相色谱法>>原理

试剂及配制标准溶液配制材料及仪器和设备分析步骤计算试剂配制：乙酸-乙酸铵溶液(pH=5)：准确称取0.77g乙酸铵置于1L容量瓶内，加900mL水溶解，用冰乙酸调节pH=5.0，加水定容至1L，混匀，经0.45μm微孔滤膜过滤后使用。甲醇溶液(20%)：量取甲醇20mL，加水稀释并定容至100mL，混匀。甲醇溶液(40%)：量取甲醇40mL，加水稀释并定容至100mL，混匀。乙醇溶液(80%)：量取乙醇800mL，加水稀释并定容至1L，混匀。饼干-样品检验色素的检测饼干-样品检验色素的检测高效液相色谱法>>原理

试剂及配制标准溶液配制材料及仪器和设备分析步骤计算标准品：红曲红素标准品(C23H26O5，CAS号：874807-57-5)，纯度≥99.0%

红曲素标准品(C21H26O5，CAS号：21516-68-7)，纯度≥97.0%红曲红胺标准品(C23H27NO4，CAS号：126631-93-4)，纯度≥99.0%饼干-样品检验色素的检测高效液相色谱法>>原理

试剂及配制标准溶液配制材料及仪器和设备分析步骤计算标准溶液配制：红曲红素、红曲素、红曲红胺混合标准储备溶液：分别准确(精确至0.01mg)称取红曲红素0.25g、红曲素2.5mg、红曲红胺5.0mg于50mL小烧杯中，加甲醇溶解，用甲醇转移到50mL容量瓶中，定容，混匀，于4℃保存，其中红曲红素质量浓度为5000μg/mL、红曲素为50μg/mL、红曲红胺为100μg/mL。红曲红素、红曲素、红曲红胺混合标准曲线工作液：分别吸取混合标准储备溶液0.50mL、1.00mL、2.00mL、5.00mL、10.00mL于25mL容量瓶中，用甲醇溶液定容至刻度，混匀，于4℃保存。饼干-样品检验色素的检测高效液相色谱法>>原理

试剂及配制标准溶液配制材料及仪器和设备分析步骤计算材料：HLB固相萃取柱（N-乙烯吡咯烷酮和二乙烯基苯聚合物，200mg/6mL。使用前依次用5mL甲醇、5mL水活化。）饼干-样品检验色素的检测高效液相色谱法>>原理

试剂及配制标准溶液配制材料及仪器和设备分析步骤计算仪器和设备：高效液相色谱仪（配置紫外可见检测器）分析天平：感量为0.01mg和0.01g离心机：转速≥4000r/min高速均质器高速粉碎机

旋转蒸发仪固相萃取装置有机相型微孔滤膜：孔径0.45μm饼干-样品检验色素的检测高效液相色谱法>>原理

试剂及配制标准溶液配制材料及仪器和设备分析步骤计算饼干-样品检验色素的检测高效液相色谱法>>原理

试剂及配制标准溶液配制材料及仪器和设备分析步骤计算试样处理及保存试液制备仪器参考条件标准曲线的制作试样溶液的测定样品经高速粉碎机粉碎、分装，于室温下避光密闭保存。饼干-样品检验色素的检测高效液相色谱法>>原理

试剂及配制标准溶液配制材料及仪器和设备分析步骤计算试样处理及保存试液制备仪器参考条件标准曲线的制作试样溶液的测定5g均匀试样(精确至0.01g)50mL离心管20mL80%乙醇溶液15000r/min均质提取2min上清液①②③4000r/min离心3min④⑤50mL容量瓶残渣⑥20mL80%乙醇溶液上清液重复提取1次⑦⑧③④无水乙醇定容提取饼干-样品检验色素的检测高效液相色谱法>>原理

试剂及配制标准溶液配制材料及仪器和设备分析步骤计算试样处理及保存试液制备仪器参考条件标准曲线的制作试样溶液的测定净制流速：1mL/min~2mL/min弃去流出液⑧5mL甲醇洗脱25mL刻度离心管45℃氮吹干2mL20%甲醇溶液⑨0.45μm有机滤膜⑩④提取液20mL100mL鸡心瓶无水乙醇10mL60℃±2℃旋转浓缩至近干2mL20%甲醇溶液洗涤鸡心瓶2次①②③⑤5mL40%甲醇溶液淋洗⑥弃去流出液⑦预活化的HLB固相萃取柱待净化液饼干-样品检验色素的检测高效液相色谱法>>原理

试剂及配制标准溶液配制材料及仪器和设备分析步骤计算试样处理及保存试液制备仪器参考条件标准曲线的制作试样溶液的测定色谱柱：高纯度球形多孔硅胶多点键合C18色谱柱，柱长250mm，内径4.6mm，粒径5μm，或同等性能的色谱柱；流动相：A：乙酸-乙酸铵溶液(pH=5)，B：甲醇，梯度洗脱见表1；柱温：40℃；进样量：20μL；检测波长：红曲红胺为264nm，红曲红素和红曲素为390nm。饼干-样品检验色素的检测高效液相色谱法>>原理

试剂及配制标准溶液配制材料及仪器和设备分析步骤计算试样处理及保存试液制备仪器参考条件标准曲线的制作试样溶液的测定将混合标准系列工作液及混合标准储备液分别注入高效液相色谱仪中，测定相应的峰高或峰面积。以标准工作液的浓度为横坐标，以峰面积为纵坐标，绘制标准曲线(标准图谱见图A.1)。饼干-样品检验色素的检测高效液相色谱法>>原理

试剂及配制标准溶液配制材料及仪器和设备分析步骤计算试样处理及保存试液制备仪器参考条件标准曲线的制作试样溶液的测定将试样溶液注入高效液相色谱仪中，得到峰面积，根据标准曲线得到待测液中红曲色素的浓度。如果样品中红曲色素的含量超出标准曲线线性范围，用20%甲醇溶液稀释待测样品溶液，使待测液中红曲色素浓度在线性范围内。饼干-样品检验色素的检测高效液相色谱法>>原理

试剂及配制标准溶液配制材料及仪器和设备分析步骤计算试样中红曲色素的含量按式(1)计算式中：X—试样中红曲色素的