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文档简介
常用层析技术学习目标1、熟悉常见层析技术的分离原理;2、掌握操作要点;3、理解常见层析技术的应用。一、吸附层析原理:任何两个相都可以形成表面,其中一个相的物质或溶解在其中的溶质在此表面密集现象称为吸附,利用吸附剂对不同物质具有不同吸附力使混合物得到分的现象就叫吸附层析。凡能将其他物质聚集到自己表面的物质称吸附剂,包括硅皮、氧化铝、活性炭、淀粉、纤维素及陶土,而聚集于聚集于吸附剂表面的物质称被吸附剂。吸附剂与被吸附剂之间的作用除了物理作用外,还有化学作用,如DNS-氨基酸双向聚酰胺薄膜层析时中被分离的物质之所以能吸附在聚酰胺薄膜上就是由于二者之间形成氢键。二、分配层析技术(液-液层析法)原理:利用混合物在两种不相混溶的液相(固定相和流动相)之间的分配系数的不同而达到分离各组分的目的。纸层析是最广泛的一种分配层析。特点:液-液层析法适合于分离同系物或同分异构体三、排阻层析(凝胶层析)
凡是利用生物大分子的相对分子质量差异进行层析分离的方法,均称之为排阻层析。用于层析的分离介质称为排阻层析介质。
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