TNAIA0357-2025谷物籽粒霉菌毒素检测技术规程

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T/NAIA0357-2025-01-14发 2025-01-31实宁夏化学分析测试协 发T/NAIA0357-T/NAIA0357- GB/T1.1-20201部分：标准化文件的结构和起草规T/NAIA0357-T/NAIA0357-酰化衍生物（DON、3-ADON、15-ADON）、玉米赤霉烯酮（ZEN）A（OTA）、T-2毒素（T-2）、黄曲霉毒素（AFTB1、AFTB2）的超高效液相色谱-质谱联用（UPLC-MS/MS）测定的样品制备、方法步骤和技术要点。GB GB5009.22食品安全国家标准食品中黄曲霉毒素B族和GGB5009.240GB/T5009.1 食品卫生检验方法理化部分总则GB/T5491 粮食、油料检验扦样、分样法GB/T6682 GB/T 饲料中黄曲霉毒素B1GB/T 饲料中玉米赤霉烯酮的测定免疫亲和柱净化-GB/T 饲料中T-2毒素的测定免疫亲和柱净化-ppb级别，如果没有足够大的采样量，会造GB/T5491方法执行。0-4℃冷藏短期保存或-20℃保存。除非另有说明，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T66821.5g3.5g1.0g80%乙腈溶液（8+2，体积比）：20mL80mL乙腈（6.1.1）50%乙腈溶液（5+5，体积比）：50mL50mL乙腈（6.1.1）乙酸铵-甲酸水溶液（2mmol/L）：称取0.1542g乙酸铵（6.1.4），用0.1%甲酸水溶液溶解并稀释至1000mL，摇匀。0.1%甲酸甲醇溶液（体积分数）：1mL甲酸（6.1.3）用甲醇（6.1.2）1000FB2标准品（C34H59NO14，CAS：116355-84-1）：纯度≥97.9%FB3标准品（C34H59NO14，CAS：136379-59-4）：纯度≥98.5%DON标准品（C15H20O6，CAS：51481-10-8）：纯度≥99.38%3-ADON标准品（C17H22O6，CAS：50722-38-8）：纯度≥99.0%15-ADON标准品（C17H22O7，CAS：88337-96-6）：纯度≥99.8%ZEN标准品（C18H22O5，CAS：17924-92-4）：纯度≥99.7%OTA标准品（C20H18ClNO6，CAS：303-47-9）：纯度≥99.0%T-2标准品（C24H34O9，CAS：21259-20-1）：纯度≥96.55%AFTB1标准品（C17H12O6，CAS：1162-65-8）：纯度≥98.0%AFTB2标准品（C17H14O6，CAS：7220-81-7）：纯度≥98.0%注：11FB1、FB2、FB30.005、0.02、0.1、0.5、1.0mg/L浓度系列；DON、3-ADON、15-ADON0.02、0.2、0.5、1.0、2.0mg/L浓度系列；AFTB1、AFTB20.001、0.005、0.01、0.05、0.1mg/L浓度系列；ZEN、T-2、OTA0.005、0.01、0.05、0.1、0.5mg/L浓度系列的混合标准工作溶液。高效液相色谱-质谱/质谱仪：配有电喷雾离子源（ESI）0.01g0.0001g高速粉碎机：10000r/min离心机：4000r/min离心管：50mL滤膜：0.22μmpH1kg，全部用谷物高速粉碎机（7.3）2准确称取样品2g~2.5g（0.01g）50mL离心管，加入20.00mL提取液（6.2.1），40min，加入混合净化材料（6.1.5），1min4000r/min5min3.00mL15mL离心管中，经氮气吹干后，用1.50mL定容液（6.2.2）30s0.22μm（7.9）色谱柱：T3柱，100mm×2.1mm1.8μm柱温：40进样量：2μL。d）1。A：乙酸铵-甲酸水溶液（6.2.3）。B：0.1%甲酸甲醇溶液（6.2.4）表 流动相、流速及梯度洗脱参考条时间/流速/AB23表 保留时间定性离子对定量离子对碰撞能量AFTAFTT-2表 ESI-监测模式分析参保留时间定性离子对定量离子对碰撞能量----420%10%8.3.1、8.3.2液相色谱串联质谱仪分析条件下，将混合标准系列溶液由低到高浓度进11种毒素色谱峰的峰面积与浓度作图，得到标准曲线回归方程，其线性相关系0.99。8.3.1、8.3.28.2处理得到的待测溶液进样，试按式（1）XACSV1ASm

X——试样中霉菌毒素的含量，单位为毫克每千克A——V1——试样中加入的提取溶液体积，单位为毫升V2——分取溶液体积，单位为毫升V3——定容溶液体积，单位为毫升CS——标准工作液中霉菌毒素的浓度，单位为微克每毫升AS——m——试样的质量，单位为克（g）15%。FB1、FB2、FB3、ZEN、OTA、T-2、AFTB1、AFTB20.001