GAT2060-2023法庭科学毛发中甲基苯丙胺等11种毒品及代谢物的检验液相色谱质谱法

GA/T××××—××××

法庭科学毛发中甲基苯丙胺等11种毒品及代谢物检验

液相色谱-质谱法

1范围

本文件规定了法庭科学领域毛发中甲基苯丙胺等11种毒品及代谢物的液相色谱-质谱(LC-MS)检

验方法。

本文件适用于法庭科学领域毛发中甲基苯丙胺等11种毒品及代谢物的定性分析和定量分析。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文

件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适

用于本文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法

GA/T122毒物分析名词术语

3术语和定义

GA/T122界定的术语和定义适用于本文件。

4原理

以空白样品和添加样品作对照，按平行操作的要求，对毛发中甲基苯丙胺等11种毒品及代谢物（化

合物信息见附录A）进行提取、净化。采用液相色谱‐质谱法检测，以保留时间、质谱特征离子对和离

子对丰度比作为定性判断依据；以色谱峰面积（或峰面积比值）作为定量依据，采用外标法或内标法

进行定量分析。

5试剂和材料

5.1试剂

实验用水应符合GB/T6682中规定的一级水。在分析中使用的试剂均为色谱纯，试剂包括：

a)甲醇；

b)乙腈；

c)丙酮；

d)流动相A（以配制1000mL为例）：称取0.63g甲酸铵，加入100mL水溶解，再加入2.0mL

甲酸，用乙腈定容至1000mL，混匀、超声备用；

e)流动相B（以配制1000mL为例）：称取0.63g甲酸铵，加入100mL水溶解，再加入2.0mL

甲酸，用水定容至1000mL，混匀、超声备用；

f)标准溶液：

1

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1)标准物质储备液：根据甲基苯丙胺等11种毒品及代谢物标准物质的纯度和盐型换算后，

各称取适量，分别用乙腈配制成1.0mg/mL的标准物质储备液，-18℃以下保存，有效期

6个月。或采用市售标准溶液；

2)单一标准工作溶液：移取甲基苯丙胺等11种毒品及代谢物标准物质储备液各适量，分

别用乙腈配制成5.0μg/mL和1.0μg/mL的单一标准工作溶液，0℃~4℃保存，有效期1

个月；

3)混合标准工作溶液：移取甲基苯丙胺等11种毒品及代谢物标准物质储备液各适量，用

乙腈配制成5.0μg/mL的混合标准工作溶液，0℃~4℃保存，有效期1个月。实验中所用

其他浓度的混合标准工作溶液均由1.0mg/mL标准物质储备液配制得到；

4)内标储备液：根据甲基苯丙胺-d5等11种氘代内标物的纯度和盐型换算后，各称取适量，

用乙腈配制成1.0mg/mL内标储备液，-18℃以下保存，有效期6个月。或采用市售标准

溶液。

5)混合内标工作溶液：移取甲基苯丙胺-d5等11种毒品及代谢物内标储备液各适量，用甲

醇配制成20.0ng/mL的混合内标工作溶液，-18℃以下保存，有效期1个月。

5.2材料

材料包括：

a)具盖研磨管；

b)具盖离心管；

c)容量瓶；

d)有机系微孔滤膜：0.22µm；

e)一次性使用无菌注射器：1mL。

6仪器和设备

仪器和设备包括：

a)液相色谱-串联质谱仪：配有电喷雾离子源（ESI）；

b)电子天平：实际分度值（d）小于或等于0.01mg；

c)超声波清洗机；

d)振荡器；

e)球磨机或冷冻研磨机；

f)移液器。

7操作方法

7.1定性分析

7.1.1样品前处理

7.1.1.1检材样品

7.1.1.1.1清洗

取适量毛发置于具盖离心管中，加入20mL水，振荡1min，弃去水液，加入20mL丙酮，振荡1min，

弃去丙酮液，重复使用水和丙酮各清洗一次，清洗后的毛发晾干备用。

注：清洗用水和丙酮体积可根据实际情况调整。

2

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7.1.1.1.2提取

将7.1.1.1.1中晾干后的毛发剪碎约1mm，称取约20mg置于具盖研磨管中，加入1mL甲醇，将

毛发研磨至粉末状，上清液经有机系微孔滤膜过滤。移取300μL滤液和300μL乙腈至玻璃进样瓶中，

混匀，作为检材样品提取液，供仪器检测。

7.1.1.2质控样品

取空白毛发样品，按照7.1.1.1.1清洗、晾干，剪碎约1mm后，平行称取两份，每份约20mg。分

别置于具盖研磨管中，一份作为空白样品，一份添加目标物单一标准工作溶液或混合标准工作溶液，

作为添加样品（添加样品的浓度见附录C表C.3），与检材样品平行操作，得到空白样品提取液和添

加样品提取液，供仪器检测。

7.1.2仪器检测

7.1.2.1液相色谱‐质谱仪条件

以下为参考条件（可根据不同品牌仪器和不同样品等实际情况进行调整）：

a)色谱柱：AtlantisPremierBEHZ-HILIC柱，(2.1mm×100mm，1.7μm)或其他等效色谱柱；

注：AtlantisPremierBEHZ-HILIC为Waters公司产品的商品名称，给出这一信息是为了方便本标准的使用

者，并不是表示对该产品的认可。如果其他等效产品具有相同的效果，则可使用这些等效产品。

b)柱温：40℃；

c)进样体积：1μL；

d)洗脱：梯度洗脱，条件见表1；

e)流速：0.4mL/min；

表1梯度洗脱条件

时间

流动相A流动相B

min

0.0100%0%

0.5100%0%

5.080%20%

6.080%20%

6.1100%0%

8.0100%0%

f)扫描方式：正离子扫描；

g)检测方式：多反应监测（MRM）；

h)电喷雾电压：5500V；

i)离子源温度：550℃；

j)去簇电压：30V；

k)碰撞气：氩气（Ar）；

l)定性定量离子对、参考保留时间和碰撞能量条件见表2。

3

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表2定性定量离子对、参考保留时间和碰撞能量条件

参考保留时间碰撞能量

目标物定量离子对定性离子对

mineV

136.1>91.023

苯丙胺136.1>91.01.56

136.1>119.013

150.0>119.016

甲基苯丙胺150.0>119.01.57

150.0>91.026

180.1>163.031

3,4-亚甲二氧基苯丙胺180.1>163.01.53

180.1>133.025

194.1>163.018

3,4-亚甲二氧基甲基苯丙胺194.1>163.01.54

194.1>105.034

286.1>165.037

吗啡286.1>165.02.36

286.1>201.059

328.1>165.052

O6-单乙酰吗啡328.1>165.01.77

328.1>211.137

238.0>125.040

氯胺酮238.0>125.01.37

238.0>207.020

224.0>124.946

去甲氯胺酮224.0>124.91.08

224.0>207.023

304.1>182.128

可卡因304.1>182.11.57

304.1>104.934

290.1>168.127

苯甲酰爱康宁290.1>168.12.08

290.1>104.941

264.0>58.150

曲马多264.0>58.11.48

264.0>246.216

141.1>124.18

苯丙胺-d5141.1>124.11.56

141.1>96.015

155.1>96.217

甲基苯丙胺-d5155.1>96.21.57

155.1>124.210

184.1>167.28

3,4-亚甲二氧基苯丙胺-d4184.1>167.21.53

184.1>107.122

198.1>167.212

3,4-亚甲二氧基甲基苯丙胺-d4198.1>167.21.54

198.1>107.124

289.1>201.226

吗啡-d3289.1/201.22.35

289.1>165.138

331.1>165.244

O6-单乙酰吗啡-d3331.1>165.21.77

331.1>211.126

242.1>129.130

氯胺酮-d4242.1>129.11.38

242.1>211.212

228.1>129.124

去甲胺酮-d4228.1>129.11.09

228.1>211.110

4

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表2定性定量离子对、参考保留时间和碰撞能量条件(续)

参考保留时间碰撞能量

目标物定量离子对定性离子对

mineV

307.1>185.216

可卡因-d3307.1>185.21.57

307.1>105.036

293.1>171.318

苯甲酰爱康宁-d3293.1>171.32.08

293.1>105.036

267.2>58.118

曲马多-d3267.2>58.11.49

267.2>249.212

7.1.2.2进样

分别吸取空白样品提取液、添加样品提取液、检材样品提取液、标准工作溶液，按7.1.2.1仪器条

件进样分析。进样顺序和进样次数应确保结果有效。

7.2定量分析

7.2.1样品前处理

7.2.1.1外标‐单点校正法

取按照7.1.1.1.1清洗、晾干后的毛发检材样品，剪碎约1mm后，平行称取两份，每份20mg，分别

置于具盖研磨管中，按照7.1.1.1.2操作，得到检材样品提取液，供仪器检测。

取按照7.1.1.1.1清洗、晾干后的空白毛发样品，剪碎约1mm后，平行称取三份，每份20mg，一份

作为空白样品，另两份添加目标物标准工作溶液，与检材样品平行操作，得到空白样品提取液和添加

样品提取液，供仪器检测。检材样品中目标物含量应为添加样品中目标物含量的（100±50）%。

7.2.1.2外标‐校准曲线法

取按照7.1.1.1.1清洗、晾干后的毛发检材样品，剪碎约1mm后，平行称取两份，每份20mg，分别

置于具盖研磨管中，按照7.1.1.1.2操作，得到检材样品提取液，供仪器检测。

取按照7.1.1.1.1清洗、晾干后的空白毛发样品，剪碎约1mm后，平行称取多份，每份20mg，一份

作为空白样品，其他添加目标物标准工作溶液，配制成系列浓度的添加样品，与检材样品平行操作，

得到添加样品提取液，供仪器检测。标准曲线应不少于5个浓度点，每个浓度点平行分析两份样品。

检材样品中目标物的含量应在线性范围内，相关系数（r）不小于0.997。

7.2.1.3内标‐单点校正法

取按照7.1.1.1.1清洗、晾干后的毛发检材样品，剪碎约1mm后，平行称取两份，每份20mg，分别

置于具盖研磨管中，添加混合内标工作溶液1mL，使内标物含量为1ng/mg，将毛发研磨至粉末状，上

清液经有机系微孔滤膜过滤。移取300μL滤液和300μL乙腈至玻璃进样瓶中，混匀，作为检材样品提取

液，供仪器检测。

取按照7.1.1.1.1清洗、晾干后的空白毛发样品，剪碎约1mm后，平行称取三份，每份20mg，一份

作为空白样品，另两份添加目标物标准工作溶液，与检材样品平行操作，得到空白样品提取液和添加

样品提取液，供仪器检测。检材样品中目标物含量应为添加样品中目标物含量的（100±50）%。

7.2.1.4内标‐校准曲线法

5

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取按照7.1.1.1.1清洗、晾干后的毛发检材样品，剪碎约1mm后，平行称取两份，每份20mg，分别

置于具盖研磨管中，添加混合内标工作溶液1mL，使内标物含量为1ng/mg，将毛发研磨至粉末状，上

清液经有机系微孔滤膜过滤。移取300μL滤液和300μL乙腈至玻璃进样瓶中，混匀，作为检材样品提取

液，供仪器检测。

取按照7.1.1.1.1清洗、晾干后的空白毛发样品，剪碎约1mm后，平行称取多份，每份20mg，一份

作为空白样品，其他添加目标物标准工作溶液，配制成系列浓度的添加样品，与检材样品平行操作，

得到添加样品提取液，供仪器检测。标准曲线应不少于5个浓度点，每个浓度点平行分析两份样品。

检材样品中目标物的含量应在线性范围内，相关系数（r）不小于0.997。

定量分析方法的适用性见附录B。

7.2.2仪器检测

7.2.2.1仪器条件

同7.1.2.1。

7.2.2.2进样

分别吸取空白样品提取液、检材样品提取液、添加样品提取液，按7.1.2.1仪器条件进样分析。每

份检材样品提取液和添加样品提取液各进样分析2～3次。

7.2.3计算

7.2.3.1含量计算

7.2.3.1.1外标-单点校正法

记录检材样品提取液和添加样品提取液中目标物的保留时间和峰面积值，按公式（1）计算检材

样品中目标物的含量。

………......................................................................(1)

式中：

ω—检材样品中目标物的含量；

A—检材样品提取液中目标物的峰面积的平均值；

A′—添加样品提取液中目标物的峰面积的平均值；

ω′—添加样品中目标物的含量。

7.2.3.1.2外标-校准曲线法

记录检材样品提取液和添加样品提取液中目标物的保留时间和峰面积值，以添加样品提取液中目

标物的峰面积为纵坐标、添加样品提取液中目标物的含量为横坐标进行线性回归，得到线性方程。根

据检材样品提取液中目标物的峰面积值，按公式（2）计算出检材样品中目标物的含量。

yb

ω............................................................................(2)

a

式中：

ω—检材样品中目标物的含量；

y—检材样品提取液中目标物的峰面积的平均值；

a—线性方程的斜率；

b—线性方程的截距。

6

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7.2.3.1.3内标-单点校正法

记录检材样品提取液和添加样品提取液中目标物和内标的保留时间和峰面积值，按公式（3）计

算检材样品中目标物的含量。

.............................................................................(3)

式中：

ω—检材样品中目标物的含量；

A—检材样品提取液中目标物的峰面积平均值；

A′—添加样品提取液中目标物的峰面积平均值；

Ai—检材样品提取液中内标物的峰面积平均值；

Ai′—添加样品提取液中内标物的峰面积平均值；

ω’—添加样品中目标物的含量。

7.2.3.1.4内标-校准曲线法

记录检材样品提取液和添加样品提取液中目标物和内标的保留时间和峰面积值，以添加样品提取

液中目标物与内标物的峰面积比为纵坐标、添加样品提取液中目标物的含量为横坐标进行线性回归，

得到线性方程。根据检材样品提取液中目标物及内标物的峰面积值，按公式（4）计算出检材样品中

目标物的含量。

yb

ω............................................................................(4)

a

式中：

ω—检材样品中目标物的含量；

y—检材样品提取液中目标物与内标物的峰面积比值的平均值；

a—线性方程的斜率；

b—线性方程的截距。

7.2.3.2相对相差计算

记录7.2.3.1中计算得到的检材样品中目标物的含量，按公式（5）计算相对相差：

-

RD=12100%..............................................................(5)

式中：

RD—相对相差；

ω1、ω2—两份检材样品中目标物的含量；

ω—两份检材样品中目标物含量的平均值。

8结果评价

8.1定性结果评价

8.1.1阳性结果评价

在相同条件下进行样品测定时，检材样品中目标物的色谱峰保留时间与标准工作溶液一致（相对

误差在±2.5%之内）、目标物的定性离子对（至少两对）与标准工作溶液一致，且离子对丰度比与浓

度接近的标准工作溶液相比，相对偏差不超过表3规定的范围，空白样品无干扰，则可判断检材样品

中检出目标物。

7

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表3离子对丰度比的最大允许相对偏差范围

离子对丰度比＞50%＞20％～50％＞10％～20％≤10%

最大允许相对偏差±20％±25％±30%±50%

8.1.2阴性结果评价

检材样品未出现与目标物标准工作溶液一致的色谱峰，且添加样品中出现与目标物标准工作溶液

一致的色谱峰，空白样品无干扰，则可判断检材样品中未检出目标物。

8.2定量结果评价

如果检材样品中目标物含量的RD小于或等于20%，定量数据可靠，其含量按两份检材的平均值计

算。如果检材样品中目标物含量的RD大于20%，定量数据不可靠，应按7.2重新提取检验。

方法的定性适用性见附录B，相关资料、谱图及检出限见附录C。

8

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附录A

（资料性）

化合物基本信息

甲基苯丙胺等11种毒品及代谢物的基本信息见表A.1。

表A.111种毒品及代谢物的基本信息

编号中文名称CAS编号分子式

1苯丙胺300-62-9C9H13N

2甲基苯丙胺537-46-2C10H15N

33,4-亚甲二氧基苯丙胺4764-17-4C10H13NO2

43,4-亚甲二氧基甲基苯丙胺42542-10-9C11H15NO2

5吗啡57-27-2C17H19NO3

6

6O-单乙酰吗啡2784-73-8C19H21NO4

7氯胺酮6740-88-1C13H16ClNO

8去甲氯胺酮35211-10-0C12H14ClNO

9可卡因50-36-2C17H21NO4

10苯甲酰爱康宁519-09-5C16H19NO4

11曲马多27203-92-5C16H25NO2

9

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附录B

（资料性）

定量分析方法的适用性

毛发空白样品应选择未经染色、涂抹发胶、喷洒定型摩丝等人工处理过的健康志愿者的黑色毛发。

当毛发空白样品和毛发检材样品的基质比较接近时，例如毛发空白样品和毛发检材样品提取液均

为无色透明液体，或毛发检材样品不存在明显的染色、涂抹发胶、喷洒定型摩丝等情况，可以任意选

用外标法或内标法进行定量分析。

当毛发空白样品和毛发检材样品的基质差异较大时，例如毛发空白样品提取液为无色透明液体但

毛发检材样品提取液呈现不同颜色，或毛发检材样品存在明显的染色、涂抹发胶、喷洒定型摩丝等情

况，应选用内标法进行定量分析。

10

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附录C

（资料性）

11种毒品及代谢物相关资料、谱图、检出限

C.1相关资料

中文名：苯丙胺；英文名：Amphetamine；化学名:1-苯基-2-丙胺；分子式:C9H13N；分子量:135.21。

苯丙胺是一种中枢兴奋药和抗抑郁症药物，是一系列对中枢神经具有显著兴奋作用的合成药物（统称

苯丙胺类）的原型，具有成瘾性。

中文名：甲基苯丙胺；英文名：Methamphetamine；化学名:N-甲基-1-苯基-2-丙胺；分子式:C10H15N；

分子量:149.23。甲基苯丙胺是一种中枢神经兴奋剂，具有欣快、警觉及抑制食欲的作用，重复使用会

成瘾。

中文名：3,4-亚甲二氧基苯丙胺；英文名：3,4-Methylenedioxyamphetamine；化学名:1-(1,3-苯并

二氧杂环戊-5-基)-2-丙胺；分子式:C10H13NO2；分子量:179.22。3,4-亚甲二氧基苯丙胺具有精神致幻作

用和快感作用，重复使用会成瘾。

中文名：3,4-亚甲二氧基甲基苯丙胺；英文名：3,4-Methylenedioxymethamphetamine；化学名:N-

甲基-1-(1,3-苯并二氧杂环戊-5-基)-2-丙胺；分子式:C11H15NO2；分子量:193.24。3,4-亚甲二氧基苯丙胺

具有精神致幻作用和快感作用，具有很强的精神依赖性特征，重复使用会成瘾。

中文名：吗啡；英文名：Morphine；化学名:17-甲基-4,5α-环氧-7,8二脱氢吗啡喃-3,6α-二醇；分

子式:C17H19NO3；分子量:285.34。吗啡具有极强的镇痛作用，对呼吸中枢和咳嗽中枢有抑制作用。

中文名：O6-单乙酰吗啡；英文名：6-Acetylmorphine；化学名:17-甲基-4,5α-环氧-7,8二脱氢吗啡

6

喃-6α-乙酰氧-3-醇；分子式:C19H21NO4；分子量:327.37。O-单乙酰吗啡是海洛因在体内的主要代谢物

之一，在人体内的半衰期约为35分钟，随后快速代谢成吗啡。

中文名：氯胺酮；英文名：Ketamine；化学名:2-(2-氯苯基)-2-(甲氨基)环己酮；分子式:C13H16ClNO；

分子量:237.73。氯胺酮具有麻醉作用和肌肉松弛作用，可以辅助麻醉性能较弱的麻醉剂进行麻醉。

中文名：去甲氯胺酮；英文名：Norketamine；化学名:2-(2-氯苯基)-2-(氨基)环己酮；分子

式:C12H14ClNO；分子量:223.71。去甲氯胺酮是氯胺酮在体内的主要代谢物之一。

中文名：可卡因；英文名：Cocaine；化学名:8-甲基-3-(苯甲酰氧基)-8-氮杂双环[3,2,1]辛烷-2-甲

酸甲酯；分子式:C17H21NO4；分子量:303.35。可卡因是一种长效酯类局麻药，具有良好的表面麻醉作

用，对中枢神经系统有高度毒性，可刺激大脑皮层，产生视、听、触等幻觉。

中文名：苯甲酰爱康宁；英文名：Benzoylecgonine；化学名:8-甲基-3-(苯甲酰氧基)-8-氮杂双环[3,2,1]

辛烷-2-甲酸；分子式:C16H19NO4；分子量:289.33。苯甲酰爱康宁是可卡因在体内的主要代谢物之一。

中文名：曲马多；英文名：Tramadol；化学名:1-(间-甲氧基苯基)-2-[(二甲氨基)-甲基]-环己醇；分

子式:C16H25NO2；分子量:263.38。曲马多是一种非阿片类中枢性镇痛药，有镇咳作用，其作用强度为

吗啡的1/10-1/8。

C.2相关谱图

甲基苯丙胺等11种毒品及代谢物，以及11种氘代标准物质的相关谱图见C.1~图C.44。

11

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20211124-018F1:MRMof2channels,ES+

2136.05>119

AM3.071e+005

100

1.56

13741.61

306418

%

0.70

0min

0.250.500.751.001.251.501.752.002.252.502.753.003.253.503.754.004.254.504.75

图C.1空白加标毛发样品（0.2ng/mg）分析得到的苯丙胺MRM色谱图（136.1/119.0）

20211124-018F1:MRMof2channels,ES+

2136.05>90.95

AM4.050e+005

100

1.561.77

15297.00

394741

%0.700.76

0.000.87

0.260.40

0min

图C.2空白加标毛发样品（0.2ng/mg）分析得到的苯丙胺MRM色谱图（136.1/91.0）

20211124-018F3:MRMof2channels,ES+

2149.969>118.973

MA1.068e+006

100

1.57

42986.73

1065252

%

0min

0.250.500.751.001.251.501.752.002.252.502.753.003.253.503.754.004.254.504.75

图C.3空白加标毛发样品（0.2ng/mg）分析得到的甲基苯丙胺MRM色谱图（150.0/119.0）

20211124-018F3:MRMof2channels,ES+

2149.969>90.947

MA2.193e+006

100

1.57

92254.22

2182862

%

1.97

0min

图C.4空白加标毛发样品（0.2ng/mg）分析得到的甲基苯丙胺MRM色谱图（150.0/91.0）

20211124-018F5:MRMof2channels,ES+

2180.08>133

MDA9.246e+004

100

1.53

3428.50

92124

%

3.47

0.550.690.861.661.853.353.554.054.27

0min

0.250.500.751.001.251.501.752.002.252.502.753.003.253.503.754.004.254.504.75

图C.5空白加标毛发样品（0.2ng/mg）分析得到的MDAMRM色谱图（180.1/133.0）

20211124-018F5:MRMof2channels,ES+

2180.08>162.99

MDA5.633e+005

100

1.53

20515.76

545302

%

0.76

0.882.003.03

0min

图C.6空白加标毛发样品（0.2ng/mg）分析得到的MDAMRM色谱图（180.1/163.0）