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DB15Detectionformoldcountinani2020-02-25发布内蒙古自治区市场监督管理局发布本标准起草单位：中华人民共和国呼和浩特海关、内蒙古自I动物垫料中霉菌检测GB/T6682分析实验室用水规格和GB/T8170数值修约规则与极限数值的表下列术语和定义适用于本文件。动物垫料animalbedding用于吸收动物排泄物，使动物保持舒适生活环境的铺垫物。包括动物笼内非直接与动物机体接触的铺垫菌落形成单位colonyformingunit（CFU）在琼脂平板上经过一定温度和时间培养后形成的每一个菌落，是计算细菌或霉菌数目的单位。4设备和材料4.7无菌试管：18mm×180m14.9无菌平皿：15mm×90m4.11无菌量筒。4.14无菌棉签。4.15无菌镊子。4.16无菌剪刀。5培养基和试剂样品采集应遵循随机性、代表性的原则。采样过程遵循无菌操作程序，防止一切可能的外来污染。对送检样品包装内不同部位样品进行随机多点取样至少250g，充分混匀后称取25g颗粒状或粉末状垫料样品，加入225mL无菌稀释液（磷酸盐缓冲液或生理盐水），充分振摇或均质1min～2min，制成1：10的样品匀液。无菌操作将灭菌规格板（5cm×5cm）放在平面垫料表面，用浸有无菌稀释液（磷酸缓冲液或生理盐水）的棉拭子，在规格板内来回均匀涂抹整个方格3次，并随之转动棉拭子，然后用灭菌剪刀剪去棉拭子与手接触的部分，将棉拭子头置入装有25mL无菌稀释液的无菌锥形瓶中，根据样品面积大小重复采样1～4个规格板面积，采样量见表1，相应地将棉拭子头置入25mL～100mL的无菌稀释液中，充分振摇制成样品原液（1mL原液对应的样品面积为1cm2）。取1mL样品原液注入含有9mL无菌稀释液的试管中，制成1：10的样品匀液。212346.2.4及时将20mL～25mL冷却至46℃±1℃的马铃薯葡萄糖琼脂或孟加拉红琼脂(可置于46℃±1℃恒温水浴箱中保温)倾注平皿，并转动平皿使其用肉眼观察，必要时可用放大镜或低倍镜，记录稀释倍数和相应的霉菌菌落数，以菌落形成单位……………（1）N——样品中霉菌数；37.1.3若所有平板上菌落数均大于1507.1.4若所有平板上菌落数均小于17.2.3若空白对照平板上有霉菌菌落出现，则此次检测结4培养基和试剂A.1培养基制备及质量保证A.2生理盐水A.2.1成分A.2.2制法氯化钠加入1000mL蒸馏水中，搅拌至完全溶解，分装后，121℃高压灭菌1A.3磷酸盐缓冲液A.3.1成分gA.3.2制法贮存液：称取34.0g的磷酸二氢钾溶于500mL蒸馏水中，用大约175mL的1mol/L氢氧化钠A.4孟加拉红培养基5A.4.2制法A.5马铃薯葡萄糖

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