AbMole小课堂丨Pexidartinib（PLX3397）：在肿瘤免疫微环境、肿瘤抑制、神经免疫上的应用研究

AbMole小课堂丨Pexidartinib（PLX3397）：在肿瘤免疫微环境、肿瘤抑制、神经免疫上的应用研究Pexidartinib（PLX3397，AbMole，M4867）是一种口服小分子多靶点酪氨酸激酶抑制剂，通过选择性抑制集落刺激因子1受体（CSF1R）、干细胞因子受体（KIT）及FMS样酪氨酸激酶3内部串联重复突变（FLT3-ITD），在肿瘤免疫微环境调控、肿瘤抑制及神经免疫等交叉领域展现出独特作用。Pexidartinib（PLX3397）的作用机制CSF-1R在多种细胞的生长、存活、分化及功能调节中发挥着关键作用。在正常生理状态下，CSF-1与其受体CSF-1R结合，激活下游一系列信号转导途径，包括RAS-MAPK、PI3K-AKT和JAK-STAT等通路，进而调控细胞的多种生物学行为。当Pexidartinib（PLX3397，AbMole，M4867）作用于细胞时，它能够与CSF-1R的ATP结合位点紧密结合，阻断ATP与受体的结合，从而抑制CSF-1R的磷酸化及后续的信号转导过程。在一些以巨噬细胞为研究对象的体外实验中，加入Pexidartinib后，巨噬细胞对CSF-1刺激的响应被削弱，表现为细胞增殖速度减缓，细胞周期相关蛋白的表达发生改变，这充分证明了Pexidartinib对CSF-1R信号通路的有效阻断[1]。KIT和FLT3则在细胞的生长、分化及造血过程中扮演着重要角色。KIT信号通路的异常激活与多种细胞的异常增殖和分化相关，而FLT3的内部串联重复（ITD）突变在一些血液系统疾病中较为常见，会导致该信号通路的持续激活。Pexidartinib能够通过抑制KIT和FLT3的激酶活性，阻断其下游信号转导。用Pexidartinib处理FLT3突变的细胞系时发现，FLT3下游的STAT5磷酸化水平明显下降，细胞的增殖能力显著降低。在一些白血病细胞模型中，Pexidartinib能够抑制KIT和FLT3的活性，影响细胞内相关信号分子的磷酸化状态，进而诱导细胞凋亡或改变细胞的分化方向[2]。此外，Pexidartinib可以通过抑制KIT信号通路，减少相关细胞中BCL-2蛋白的表达，促进细胞凋亡的发生[2]。Pexidartinib（PLX3397）的科研应用Pexidartinib（PLX3397）用于调节肿瘤免疫微环境肿瘤免疫微环境（TumorImmuneMicroenvironment,TIME）是肿瘤组织内部及周围由免疫细胞、细胞因子、血管网络、细胞外基质等共同构成的动态生物环境，其核心特征是免疫抑制（促进肿瘤逃避免疫系统）、参与肿瘤的发生和转移。巨噬细胞在TIME中主要有两种形态，即具有抗肿瘤活性的M1型和促进肿瘤生长、转移及免疫逃逸的M2型。TIME中的CSF-1（集落刺激因子因子1）可促进免疫抑制性M2表型巨噬细胞的募集和分化。许多细胞实验表明，Pexidartinib（PLX3397，AbMole，M4867）能够有效抑制巨噬细胞向M2型极化，并降低肿瘤组织中M2型巨噬细胞的数量。Pexidartinib处理后，M2型巨噬细胞相关基因如CD206、CCL-2的mRNA表达下降，而M1型巨噬细胞相关基因如IL-1β、iNOS、CD80的mRNA表达相对增加。这些结果一致表明，Pexidartinib能够对肿瘤免疫微环境产生积极的调节作用[1]。Pexidartinib（PLX3397）用于急性髓性白血病（AML）的研究对于FLT3-ITD突变的急性髓性白血病（AML），研究发现FLT3-ITD阳性AML细胞能够极化M2样白血病相关巨噬细胞（M2-LAM），并抑制其吞噬活性，而M2-LAM能通过激活FLT3信号通路保护AML细胞免受FLT3抑制剂的影响。Pexidartinib作为FLT3/CSF1R双重抑制剂，能够有效抑制M2-LAM，并延长MOLM-13小鼠模型的生存期。此外，也有研究构建了以FLT3配体为识别域的CAR-巨噬细胞，与Pexidartinib联合使用，在体外实验中，CAR-巨噬细胞能够有效吞噬MOLM-13细胞，这为FLT3-ITD阳性AML的抑制提供了一种新的、有前景的联合策略。Pexidartinib在其中发挥了关键的调节肿瘤微环境中巨噬细胞功能的作用，与CAR-巨噬细胞治疗协同抑制AML细胞的生长[3]。Pexidartinib（PLX3397）用于多种肿瘤的细胞和动物模型抑制研究Pexidartinib（PLX3397，AbMole，M4867）在多种类型的肿瘤细胞中表现出了强大的抑制活性。例如在卵巢癌的研究中发现，CSF-1R高表达与肿瘤体积增大、淋巴结转移增多、以及小鼠生存期显著缩短密切相关。体外实验中，Pexidartinib能够有效抑制卵巢癌细胞的增殖，诱导细胞周期停滞在G1期，促进细胞凋亡，抑制克隆形成，减少细胞迁移和侵袭能力。在ID8卵巢癌小鼠模型中，Pexidartinib与紫杉醇联合使用，显著抑制了肿瘤生长，减少了腹水生成，并延长了小鼠的生存期[4]。在黑色素瘤小鼠模型中，Pexidartinib同样表现出良好的抗肿瘤效果：在B16F10小鼠黑色素瘤模型中，Pexidartinib能够减少免疫抑制性巨噬细胞在全身和肿瘤局部的积累[5]。在结直肠癌相关研究中，Pexidartinib也显示出对肿瘤生长和转移的抑制作用，在小鼠结直肠癌腹膜内转移模型中，使用肿瘤微环境响应性靶向纳米颗粒共同递送表达IL-12基因和Pexidartinib，实验组小鼠腹腔肿瘤重量最低，转移性结节显著减少[6]。除了上述细胞和动物模型外，Pexidartinib还能用于骨肉瘤、前列腺肿瘤细胞、结直肠癌等模型的研究[7]。Pexidartinib（PLX3397）用于神经免疫学研究神经免疫系统是中枢神经系统（CNS）维持稳态的核心调控网络，其异常激活与神经退行性疾病、神经创伤及神经肿瘤的发生发展密切相关。小胶质细胞作为CNS内的固有免疫细胞，通过动态调控炎症反应、突触修剪和神经修复，在神经免疫过程中扮演关键角色。集落刺激因子1受体（CSF-1R）信号通路在小胶质细胞的存活、增殖和极化中起决定性作用，而Pexidartinib（PLX3397，AbMole，M4867）作为高选择性CSF-1R酪氨酸激酶抑制剂，通过靶向该通路重塑神经免疫微环境，为神经免疫疾病的机制研究和干预策略提供了新视角[8]。范例详解CancerLett.2022Feb28;527:174-190.上海交通大学、南京医科大学的实验人员在上述研究中探讨了三阴性乳腺癌（TNBC）中的Hippo/YAP信号通路，及其对肿瘤免疫微环境的调控作用。研究发现Hippo通路与TNBC预后不良及免疫微环境高度相关，其关键分子TAZ的高表达会减少CD8阳性T细胞的浸润、增加肿瘤相关巨噬细胞（TAMs）浸润，形成免疫抑制微环境。在分子机制上，科研人员发现TAZ通过直接调控IL-34和PD-L1的转录，促进TAMs的增殖和迁移，同时抑制T细胞的免疫功能；此外，TAMs分泌的TGF-β1会反促TAZ表达，形成正反馈loop，加剧肿瘤进展。研究团队还设计并验证了如下的抑制策略：通过将CSF-1R抑制剂（Pexidartinib）与PD-L1抗体联合使用，可显著减少TAMs浸润、增加CD8阳性T细胞的浸润，逆转免疫抑制微环境，协同抑制TNBC生长和转移。在上述实验中，科研人员使用了由AbMole提供的Pexidartinib（PLX3397，AbMole，M4867）[1]。图SEQ图\*ARABIC1.CSF-1R阻断通过逆转免疫抑制肿瘤微环境使TNBC对PD-L1抗体敏感ADDINEN.CITEADDINEN.CITE.DATA[1]参考文献及鸣谢Z.Wang,F.Wang,X.Y.Ding,etal.,Hippo/YAPsignalingchoreographsthetumorimmunemicroenvironmenttopromotetriplenegativebreastcancerprogressionviaTAZ/IL-34axis,Cancerletters527(2022)174-190.A.P.Schade,D.A.Smith,L.M.Klinghoffer,etal.,PLX3397,anovelCSF1R,KIT,andFLT3inhibitor,isactiveinmodelsofhumanacutemyeloidleukemia,Leukemia27(2013)2218-2227.J.H.Park,Y.J.Kim,S.H.Lee,etal.,FLT3ligand-targetedCAR-macrophagescombinedwithPLX3397enhancephagocytosisandanti-leukemicactivityinFLT3-ITD+AML,Bloodadvances5(2021)3452-3465.Y.Liu,H.Zhang,X.Li,etal.,CSF-1RinhibitorPLX3397enhancespaclitaxelefficacyinovariancancerbyreprogrammingtumor-associatedmacrophages,Journalofexperimental&clinicalcancerresearch40(2021)324.S.A.Condeelis,J.M.Pollard,Macrophagesandmetastasis:implicationsfornewcancertherapies,Naturereviewscancer16(2016)709-723.X.Zhang,L.Chen,Y.Wang,etal.,Tumormicroenvironment-responsivenanoparticlesco-deliveringIL-12plasmidandPLX3397forcombinatorialimmunotherapyofcolorectalcancer,Journalofcontrolledrelease332(2021)600-613.W.D.Tap,H.Gelderblom,E.Palmerini,etal.,Pexidartinibversusplaceboforadvancedtenosynovialgia