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15DeterminationofImazethapyrresidueinalfalfa-Highperformanceliq2022-06-24发布DB15/T2602—2022 1 1 1 1 1 2 2 2 3 4 5IDB15/T2602—2022本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定本文件由内蒙古自治区畜牧业标准化技术委员会（SAM/TC1DB15/T2602—2022苜蓿中咪草烟残留量的测定高效液相色谱法GB/T6682分析实验室用水规格和试验）：）：）：）：）：）：125.10甲醇一碳酸钠溶液(1+1,v/v):量取100mL甲醇，加入100mL碳酸钠溶液(5.9),混匀。5.11磷酸溶液(1+9,v/v):量取10mL磷酸，用水稀释定容至100mL。5.15标准品：咪草烟(C15H19N303):纯度不小于95%,或经国家认证并授予标准物质证书的标准物的标准储备液，保存于-18℃冰箱内，可使用6个月。5.17标准使用液：准确吸取0.10mL咪草烟的标准储备液(5.16)至10mL容量瓶内，用甲醇稀释定容至刻度，配制成10.0μg/mL的标准溶液，于-18℃冰箱内避光保存，可使用1个月。5.18标准系列工作液：分别吸取浓度为10.0μg/mL咪草烟标准液0.25mL、0.50mL、1.00mL、5.20微孔过滤膜(尼龙):13mm×0.22μm。6.1高效液相色谱仪：配有紫外检测器(或二极管阵列检测器)。6.2电子天平：感量0.01mg和0.01g。6.3离心机：转速大于等于4000r/min。6.9样品筛：筛孔尺寸1.0mm。加入30mL的甲醇一碳酸钠溶液(5.10),混匀，超声提取30min,用磷酸溶液(5.11)调至pH=2.5,于4000r/min离心10min,收集上清液于分液漏斗中，用50mL二氯甲烷(5.4)萃取两次(25mL+25mL),3强阳离子交换固相萃取柱SCX(5.19)净化，用1mL水、1mL甲醇(5.2)活化固相萃取柱，试样全部过柱，用1mL水、1mL甲醇(5.2)淋洗固相萃取柱，再用6mL氨水-甲醇(5.12)洗脱，收集流出液于10mL比色管中，整个固相萃取过程流速不超过1mL/min。洗mL水-甲醇(5.13)溶解、涡旋混匀，过0.22μm微孔过滤膜(5.20),待测。b)流动相：A:乙酸(5.14)+B:乙腈(5.1)=60+40(v/v);按照8.3.1测定条件，将标准工作液(5.18)注入以标准工作液(5.18)的浓度为横坐标，以峰面积为纵坐标，绘制标准曲线。按照8.3.1测定条件，将待测样品溶液注入高效液相色谱仪中进行测试。待测样品溶液中目标物质试样中咪草烟含量X按式(1)计算：DB15/T2602—2022V——试样溶液定容体积，mL；m——试样的称样量，g。注：测定结果用算术平均值表示，保留两位有效数字。4DB15/T2605(资料性)高效液相色

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