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文档简介

152024-02-23发布本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分:标准化文件的结构和起草规则》的规定本文件由内蒙古自治区畜牧业标准化技术委员会(SAM/TC1I绵羊瘤胃微生物储备糖原的测定方法GB/T6682分析实验室用水规格和微生物储备糖原microbialreservecarbohyd存糖原的形式储备多量碳水化合物,称为微生物储备糖),125.8无氮PBS缓冲液:准确称取665于90ml双蒸水中,用盐酸调节pH至6.80,定容至100mL。至溶液清亮,然后用塑料管量取上层清液108mL,用无二氧化碳的水稀释至1000mL,摇匀即可。6.2分析天平,感量0.0001g。6.3量筒,规格100mL和1000mL。6.4分液漏斗,规格250mL。6.5生化培养箱,控温范围0℃~50℃。6.7低温冰箱,温度范围:-20℃~4℃。6.8高速冷冻离心机,温度范围:-20℃~40℃,转速:200rpm~15000rpm。6.9恒温水浴锅,精度±0.5℃。通过瘤胃瘘管或口腔瘤胃液取样器采集瘤胃内容物,取200mL瘤胃内容物放置于39℃预热的暖水瘤胃混合液置于生化培养箱中39℃培养,45min后草渣颗粒上升到顶层,通过漏斗口获得下层瘤10000rpm离心10min,去除上清液后留取下层固体,获得混合瘤胃微生物,储存在-20℃备用。获得的混合瘤胃微生沉淀重悬于1mL水中,沸水浴15min使糖苷酶失活,10000rpm离心13置于冰水内冷却至室温;加完后,将试管放入沸水中水浴15min,水浴液面略高于试管中试剂液面,待反应完成后冰水中冷却至室温,然后于620nm波长处比色测定吸光8.1糖原含量以W表示,数值以mg/mL计,按公式(1)进行计算:1/10——表示由10mL瘤胃内容

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