卫生杀虫剂药效试验及评价杀蝇幼剂

1卫生杀虫剂药效试验及评价杀蝇幼剂本文件规定了卫生杀虫剂杀蝇幼剂室内和现场药效试验的方法和评价指标。本文件适用于杀蝇幼剂的室内和现场药效试验及评价。2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T23796—2009GB/T38739—2020NY/T1151.5—2014NY/T1964.1—2010病媒生物密度监测方法蝇类卫生杀虫药剂安全使用准则灭幼剂类农药登记用卫生杀虫剂室内药效试验方法及评价农药登记用卫生杀虫剂室内试验试虫养殖方法第5部分：蚊幼防治剂第1部分：家蝇3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.1杀蝇幼剂flylarvicides用于杀灭或阻止蝇幼正常生长发育的化学杀虫剂、微生物类杀虫剂及昆虫生长调节剂等药物。[来源：GB/T38739—2020，3.1，有修改]3.2相对杀灭率therelativeofkillingflylarvae将杀蝇幼剂区药剂处理前后的实际蝇幼密度，用对照区蝇幼蝇幼密度的自然变化系数予以校正，反映蝇幼数量减少值的百分率。[来源：NY/T1151.5—2014，3.1，有修改]3.3相对羽化抑制率therelativeinhibitionrateofeclosion将杀蝇幼剂区的成蝇羽化数与处理前蝇幼密度之比，用对照区成蝇自然羽化数与蝇幼密度之比予以校正，反映蝇幼数量减少值的百分率。[来源：NY/T1151.5—2014，3.2，有修改]4室内药效试验4.1供试靶标实验室饲养的敏感品系家蝇（Muscadomestica）幼虫，2龄末或3龄初，生长健康。24.2试验环境条件温度：25℃~27℃,相对湿度：50%~70%。4.3试验容器塑料圆碗，容积为500毫升。4.4药剂配制设置喷洒量为1L/m2，使药剂能充分渗透到幼虫活动处。根据试验药剂的推荐用药量稀释药剂，备4.5试验步骤4.5.1在试验容器中加入幼虫饲料（50g麦麸和2.5g奶粉混匀，加90mL清水搅拌均匀），铺平，厚度约5cm。4.5.2向试验容器中投放100条生理状态一致的试虫。待试虫恢复正常活动后，根据试验容器面积在饲料表面均匀喷洒稀释药液，并以喷洒等量清水作为空白对照。测试应设置不少于3次重复。用纱布覆盖试验容器，在试验环境条件下进行饲养。4.5.3化学或微生物杀虫剂，于施药后24h、48h、72h分别观察并记录幼虫死亡数，观察期限内化蛹的试虫计入活虫数。4.5.4昆虫生长调节剂，施药后逐天将蝇蛹及死亡幼虫捡出并计数，直至所有幼虫化蛹或死亡。蝇蛹放入饲养笼中，环境条件按照NY/T1964.1—2010中第4章规定的饲养条件设置，观察记录蝇蛹羽化数，至施药后第12天。4.5.5幼虫变为浅褐色且轻触无反应或变为黑色均判定为死亡。4.6结果计算4.6.1死亡率将化学或微生物杀虫剂重复测试所得数据的均值，按式（1）和式（2）计算空白对照组和试验组死应进行校正；空白对照组死亡率>20%，试验无效。式中：M——死亡率，%；K——死亡幼虫数，单位为只；N——处理总虫数，单位为只。式中：M1——校正死亡率，%；Mt——试验组死亡率，%；3Mc——空白对照组死亡率，%。4.6.2羽化抑制率将昆虫生长调节剂重复测试所得数据的均值，按式（3）和式（4）计算空白对照组未羽化率和试验组羽化抑制率、校正羽化抑制率，结果保留2位小数。空白对照组未羽化率<5%，无需校正；空白对照组未羽化率在5%~20%，应进行校正；空白对照组未羽化率>20%，试验无效。式中：P——羽化抑制率或未羽化率，%；S——羽化数，单位为只；N——处理总虫数，单位为只。式中：P1——校正羽化抑制率，%；Pt——试验组羽化抑制率，%；Pc——空白对照组未羽化率，%。4.7评价标准化学或微生物杀虫剂根据死亡率评价对蝇幼虫的室内药效，死亡率≥90%为合格。昆虫生长调节剂根据羽化抑制率评价对蝇幼虫的室内药效，羽化抑制率≥90%为合格。5现场试验5.1供试靶标现场孳生，主要蝇种宜属于家蝇属（Musca）。5.2场所要求试验场所适合靶标蝇幼虫孳生，且有蝇幼虫孳生。5.3药剂配制设置喷洒量为1L/m2，使药剂能充分渗透到幼虫活动处。根据试验药剂的推荐用药量稀释药剂，备5.4试验步骤5.4.1取试验场所有蝇幼虫孳生的孳生物，堆积4堆在闲置的地面上，每堆面积约1m2，厚度约10cm。其中3个为试验组，1个为空白对照组。45.4.2堆积孳生物静置至少30分钟后进行幼虫密度调查，以梅花形布点的方式选取堆积孳生物上5个10cm×10cm的点，快速挑出点中所有的孳生物，逐一记录孳生物中的幼虫数量，计数后将孳生物与幼虫填回原位。按照GB/T23796—2009中3.4.3.2描述的计算公式，计算处理前每堆孳生物的蝇幼虫密度（单位为条每处或只每堆）。5.4.3密度调查完成后，每个试验组均匀喷洒稀释后的药液，空白对照组均匀喷洒等量清水。施药后用16目以上的防虫网盖住堆积的孳生物，避免孳生物中的幼虫羽化后飞离防虫网和环境蝇类飞入防虫5.4.4化学或微生物杀虫剂，于施药后48h、72h分别调查处理后孳生物的蝇幼虫密度（单位为条每处），计算各观察时段的相对杀灭率。5.4.5昆虫生长调节剂，于施药后第3d开始逐天检查防虫网内的成蝇数量，用手处死并记录成蝇羽化数，观察至空白对照组连续2天无成蝇羽化。将总羽化数作为处理后密度（单位为只每堆计算相对羽化抑制率。5.4.6根据试验场所当地天气预报，记录试验过程中每天天气情况及温湿度。5.5结果计算将现场试验重复测试所得数据的均值，按式（5）计算相对杀灭率（相对羽化抑制率），结果保留2位小数。式中：IE——相对杀灭率（相对羽化抑制率），%；Ta——试验区处理后平均密度，单位为条每处或只每堆；Tb——试验区处理前平均密度，单位为条每处或只每堆；Ca——空白对照区处