化学农药环境安全评价试验准则 第17部分：天敌赤眼蜂急性毒性试验

GB/T31270.17—XXXX

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定

起草。

本文件是GB/T31270《化学农药环境安全评价试验准则》的第17部分。GB/T31270已经发布了以下

部分：

——第1部分：土壤代谢试验；

——第2部分：水解试验；

——第3部分：水中直接光解试验；

——第4部分：土壤吸附/解吸试验；

——第5部分：土壤淋溶试验；

——第6部分：挥发性试验；

——第7部分：生物富集试验；

——第8部分：水-沉积物系统代谢试验；

——第9部分：鸟类短期饲喂毒性试验；

——第10部分：蜜蜂急性毒性试验；

——第11部分：家蚕急性毒性试验；

——第12部分：鱼类急性毒性试验；

——第13部分：溞类急性活动抑制试验；

——第14部分：藻类生长抑制试验；

——第15部分：蚯蚓急性毒性试验；

——第16部分：土壤微生物毒性试验；

——第17部分：天敌赤眼蜂急性毒性试验；

——第18部分：天敌两栖类急性毒性试验；

——第19部分：非靶标植物影响试验；

——第20部分：家畜短期饲喂毒性试验；

——第21部分：大型甲壳类生物毒性试验；

I

GB/T31270.17—XXXX

——第22部分：土壤表面光解试验；

——第23部分：鸟类急性经口毒性试验。

本文件代替GB/T31270.17-2014《化学农药环境安全评价试验准则第17部分：天敌赤眼蜂急性毒

性试验》，与GB/T31270.17-2014相比，除结构调整和编辑性改动外，主要技术变化如下：

a)更改了适用范围（见第1章，2014年版的第1章）；

b)增加了规范性引用文件一章（见第2章）；

c)更改了术语与定义部分，删除了安全系数、供试物、化学农药、原药、制剂、有效成分的定义，

更改了半致死用量的单位表达方式（见3.1，2014年版的2.1）；

d)更改了试验期间相对湿度的要求（见第5章，2014年版的4.1.5）；

e)更改了仪器设备列表（见第7章，2014年版的4.1.4）；

f)增加了叶片染毒方式（见9.3.3）；

g)更改了限度试验要求（见9.4，2014年版的4.2.4）；

h)更改了试验数据处理方法（见第10章，2014年版的4.3）；

i)更改了试验报告要求，删除了毒性/风险等级划分的要求，细化了仪器设备、试验方法和试验

结果描述要求（见第12章，2014年版的第5章、附录A）。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利，本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。

本文件由中华人民共和国农业农村部提出并归口。

本文件起草单位：农业农村部农药检定所

本文件主要起草人：袁善奎、吴声敢、曲甍甍、林荣华、吕露、陈朗、谭丽超、蓝帅、陈红英、龚

思宇、赵东涛。

本文件及其所代替文件的历次版本发布情况为：

——2014年首次发布为GB/T31270.17-2014。

——本次为第一次修订。

II

GB/T31270.17—XXXX

化学农药环境安全评价试验准则

第17部分：天敌赤眼蜂急性毒性试验

警示——使用本标准的人员应有正规实验室工作的实践经验。本标准并未指出所有可能的安全问

题。使用者有责任采取适当的安全和健康措施，并保证符合国家有关法规规定的条件。

1范围

本文件规定了化学农药赤眼蜂急性毒性试验的试验条件、试剂或材料、仪器设备、样品、试验步骤、

试验数据处理、质量控制、试验报告等的基本要求。

本文件适用于为化学农药登记而进行的赤眼蜂急性毒性测试，不适用于易挥发农药。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，

仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本

文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法

NY/T2882.7农药登记环境风险评估指南第7部分：非靶标节肢动物

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

半致死用量medianlethalrate

引起50%受试生物死亡时的被试物使用量，用LR50表示。

注：单位为克有效成分每公顷（ga.i./hm2）或克被试物每公顷（g被试物/hm2）。

4原理

1

GB/T31270.17—XXXX

将被试物用去离子水、蒸馏水或丙酮等溶剂配制成一系列不同浓度的试验药液，定量均匀加入到一

定面积的指形管中或喷施于叶片表面，晾干后转入赤眼蜂。调查染毒24h内受试赤眼蜂的死亡数，求出

对赤眼蜂的LR50及其95%置信区间。

5试验条件

试验应在25℃±2℃，相对湿度60%～80%，避光条件下进行。

6试剂或材料

试剂

除另有规定外，所有试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水，丙酮（分析纯，C3H6O，CAS号：

67-64-1）。

供试生物

宜选用松毛虫赤眼蜂（Trichogrammadendrolimi）、玉米螟赤眼蜂（Trichogrammaostriniae）、

稻螟赤眼蜂（Trichogrammajaponicum）等。

寄生用卵

柞蚕（Antheraeapernyi）卵或米蛾（Corcyracephalonica）卵。

植物叶片

根据试验目的选择适宜种类的植物叶片，要求新鲜、清洁、无污染。

7仪器设备

指形管（内径1cm～2cm，高5cm～10cm）。

容量瓶。

培养皿（直径≥6cm）。

结晶皿（直径≥6cm）。

玻璃环（直径5cm，高4cm）。

2

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电子天平（感量0.001g或0.0001g）。

人工气候箱。

移液器。

温湿度记录仪。

滚管机。

喷雾塔（需喷雾均匀，可定量计算）等。

8样品

被试物为农药原（母）药或制剂。试验开始前，应了解被试物以下信息：

a)纯度；

b)水中溶解度；

c)有机溶剂中溶解度；

d)饱和蒸气压；

e)水中稳定性；

f)光解稳定性；

g)热稳定性；

h)正辛醇/水分配系数；

i)GAP信息。

9试验步骤

预培养

将寄生有赤眼蜂的柞蚕卵或米蛾卵置于试验条件下培养孵化，受试赤眼蜂应满足以下条件：

a)寄生卵来源于同一批次；

b)寄生卵于同一时间开始孵化；

c)赤眼蜂羽化48h内。

预试验

3

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按正式试验条件，以较大的间距至少设置3个处理组开展试验，并设空白对照，确定正式试验浓度

范围。对照组和各浓度组可设1个～3个重复，每重复至少50头赤眼蜂。

正式试验

9.3.1试验设计

根据预试验结果，按一定比例间距设置至少5个处理组（几何级差≤2.2）。同时设置空白对照。如

使用有机溶剂溶解或助溶，还需增设溶剂对照。处理组和对照组均设3个重复，每重复80头～120头赤眼

蜂。

9.3.2试验药液配制

将被试物溶于丙酮、去离子水、蒸馏水等溶剂中，必要时可使用有机溶剂助溶。有机溶剂的加入量

不应显著影响赤眼蜂的存活率。采用植物叶片染毒法时，不应使用丙酮等易燃溶剂溶解被试物并喷雾染

毒。

9.3.3染毒

9.3.3.1染毒方法选择

根据试验目的选择指形管染毒法或植物叶片染毒法。

9.3.3.2指形管染毒法

在指形管中定量加入配制好的试验药液，宜使用滚管机等机械使药液在指形管中充分滚动，直至晾

干制成均匀药膜管。药膜管制作过程中不应加热。将赤眼蜂移入药膜管中爬行1h后转入未染毒指形管，

饲喂10%蜂蜜水，并用黑布等封紧管口，平放后置于培养设备中，随机摆放。

9.3.3.3植物叶片染毒法

9.3.3.3.1喷雾设备调试

使用喷雾设备将去离子水或蒸馏水喷雾至叶片，测定着药量。调整喷嘴类型与孔径、喷雾压力等参

数，使连续3次着药量测定结果处于6μL/cm2～9μL/cm2且相对标准偏差（RSD）＜10%。

9.3.3.3.2叶片染毒

将植物叶片称重后置于喷雾装置中，喷施配制好的试验药液，再次称重。晾干后，移入结晶皿或培

4

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养皿等器皿中。将距底部3mm以上内壁均匀涂布有滑石粉或聚四氟乙烯的玻璃环置于叶片上，与叶片接

触处用对赤眼蜂无明显影响的胶水等材料固定。将赤眼蜂和带10%蜂蜜水的小纸条或脱脂棉置于玻璃环

内的叶片上，玻璃环盖上盖子后移入培养设备中，随机摆放。

9.3.4观察与记录

染毒后24h检查并记录赤眼蜂的中毒症状、异常行为及死亡数，采用指形管染毒法时，还应在1h

后转出染毒指形管时进行观察和记录。

限度试验

按NY/T2882.7的要求计算处理组用量。限度试验设置1个处理组，同时设空白对照。被试物使用有

机溶剂溶解或助溶时，还需增设溶剂对照。处理组和对照组均设3个重复，每个重复80头～120头赤眼蜂。

处理组赤眼蜂的校正死亡率＜50%时，无需进行正式试验。

10试验数据处理

以表格形式总结数据，给出每个观察时间，处理组和对照组中每个重复的受试赤眼蜂数量、死亡

率和中毒症状等。

选择适宜的统计方法计算LR50及其95%置信区间。

11质量控制

试验结束时，对照组死亡率≤10%。

12试验报告

试验报告至少应包括下列内容：

a)被试物：

1)通用名、化学名称、化学文摘登录号（CAS号）、结构式、纯度；

2)来源、批次、有效期、稳定性；

3)物理性状、水中溶解度及其他相关的理化性质。

b)供试生物：

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1)名称；

2)来源；

3)寄主；

4)培养情况等。

c)试验条件：

1)温度；

2)相对湿度；

3)光照等。

d)仪器设备：

1)名称；

2)规格；

3)型号；

4)生产商/制造商；

5)涉及喷雾设备时，应给出喷雾压力、喷雾体积、沉降时间等。

e)试验方法：

1)试验日期；

2)浓度设置，包括处理组和对照组数量、重复数、每重复受试赤眼蜂数量；

3)试验药液配制；

4)染毒方法，包括指形管或叶片药膜制备方法、药液用量、药膜接触时间；

5)观察与记录时间、频率和方法，包括接入数、死亡数、中毒症状、异常情况（若有）等；

6)数据处理，包括LR50（24h）值及其95%置信区间的统计方法。

f)质量控制。

g)试验结果：

1)对照组死亡及异常反应；

2)处理组中毒症状与死亡结果；

22

3)分别以ga.i./hm和g被试物/hm计的LR50（24h）值及其95%置信区间等。

6

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参考文献

[1]EuropeanandMediterraneanPlantProtectionOrganization(EPPO).Guidelingforthe

evaluationofside-effectsofplantprotectionproductsSide-effectsonTrichogramma

cacoeciae[J].BulletinOEPP/EPPOBulletin,1993,23:329-352.

7

ICS65.020

CCSB17

中华人民共和国国家标准

GB/T31270.17—XXXX

代替GB/T31270.17-2014

`

化学农药环境安全评价试验准则

第17部分：天敌赤眼蜂急性毒性试验

Testguidelinesonenvironmentalsafetyassessmentforchemicalpesticides—

Part17:Trichogrammaacutetoxicitytest

（征求意见稿）

在提交反馈意见时，请将您知道的相关专利连同支持性文件一并附上。

XXXX-XX-XX发布XXXX-XX-XX实施

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化学农药环境安全评价试验准则

第17部分：天敌赤眼蜂急性毒性试验

警示——使用本标准的人员应有正规实验室工作的实践经验。本标准并未指出所有可能的安全问

题。使用者有责任采取适当的安全和健康措施，并保证符合国家有关法规规定的条件。

1范围

本文件规定了化学农药赤眼蜂急性毒性试验的试验条件、试剂或材料、仪器设备、样品、试验步骤、

试验数据处理、质量控制、试验报告等的基本要求。

本文件适用于为化学农药登记而进行的赤眼蜂急性毒性测试，不适用于易挥发农药。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，

仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本

文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法

NY/T2882.7农药登记环境风险评估指南第7部分：非靶标节肢动物

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

半致死用量medianlethalrate

引起50%受试生物死亡时的被试物使用量，用LR50表示。

注：单位为克有效成分每公顷（ga.i./hm2）或克被试物每公顷（g被试物/hm2）。

4原理

1

GB/T31270.17—XXXX

将被试物用去离子水、蒸馏水或丙酮等溶剂配制成一系列不同浓度的试验药液，定量均匀加入到一

定面积的指形管中或喷施于叶片表面，晾干后转入赤眼蜂。调查染毒24h内受试赤眼蜂的死亡数，求出

对赤眼蜂的LR50及其95%置信区间。

5试验条件

试验应在25℃±2℃，相对湿度60%～80%，避光条件下进行。

6试剂或材料

试剂

除另有规定外，所有试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水，丙酮（分析纯，C3H6O，CAS号：

67-64-1）。

供试生物

宜选用松毛虫赤眼蜂（Trichogrammadendrolimi）、玉米螟赤