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文档简介

连云港市中医院免疫固定电泳考核一、选择题(每题2分,共20题)1.免疫固定电泳主要用于检测哪种免疫球蛋白缺陷?A.IgA缺乏症B.IgG缺乏症C.IgM缺乏症D.IgD缺乏症2.免疫固定电泳中,哪种缓冲液最常用?A.巴比妥缓冲液B.磷酸盐缓冲液C.Tris缓冲液D.醋酸缓冲液3.免疫固定电泳中,以下哪种方法可提高特异性?A.增加蛋白浓度B.降低电泳电压C.使用亲和层析柱纯化抗体D.延长电泳时间4.免疫固定电泳结果中,M蛋白典型的条带形态是?A.单一狭窄条带B.宽而弥散的条带C.两条或多条平行条带D.毛细血管样条带5.免疫固定电泳中,哪种情况可能导致假阴性结果?A.样本稀释过度B.抗体效价过低C.电泳温度过高D.碱性缓冲液使用不当6.免疫固定电泳适用于哪种疾病的筛查?A.自身免疫性肝病B.多发性骨髓瘤C.溶血性贫血D.过敏性鼻炎7.免疫固定电泳中,以下哪种成分最先迁移?A.IgGB.IgAC.IgMD.补体C38.免疫固定电泳中,电泳方向是?A.从阴极到阳极B.从阳极到阴极C.水平方向D.垂直方向9.免疫固定电泳结果中,寡克隆带的表现是?A.单一清晰条带B.多条细小、弥散条带C.宽大、模糊条带D.无条带出现10.免疫固定电泳与免疫荧光电泳的主要区别是?A.抗体来源不同B.电泳缓冲液不同C.结果判读方式不同D.检测原理不同二、填空题(每空1分,共10空)1.免疫固定电泳中,M蛋白的迁移率取决于其______和______。2.免疫固定电泳前,样本需用______缓冲液进行稀释。3.免疫固定电泳中,抗体固定在______上。4.免疫固定电泳结果中,轻链区通常位于______。5.免疫固定电泳的灵敏度可达______g/L。6.免疫固定电泳中,电泳电压通常为______V。7.免疫固定电泳结果判读需注意______和______。8.免疫固定电泳适用于______和______的检测。9.免疫固定电泳中,M蛋白可分为______、______和______三种类型。10.免疫固定电泳的标准化操作流程包括______、______和______。三、简答题(每题5分,共4题)1.简述免疫固定电泳的原理和操作步骤。2.免疫固定电泳结果中,如何区分M蛋白与背景蛋白?3.免疫固定电泳在连云港地区临床应用的常见场景有哪些?4.免疫固定电泳结果出现假阳性的可能原因及解决方法。四、论述题(每题10分,共2题)1.结合连云港市中医院的实际情况,论述免疫固定电泳在血液科和风湿科的临床意义。2.比较免疫固定电泳与琼脂糖电泳在M蛋白检测中的优缺点,并说明连云港地区医院如何优化检测流程。答案与解析一、选择题答案与解析1.C解析:免疫固定电泳主要用于检测IgM缺乏症,因其分子量较大,在电泳中迁移较慢,易与抗体结合形成条带。2.B解析:磷酸盐缓冲液pH值适中(7.2-7.4),最适合免疫固定电泳中蛋白质的分离和抗体结合。3.C解析:亲和层析柱纯化抗体可提高抗体特异性,减少交叉反应,从而提高检测准确性。4.C解析:M蛋白典型的条带形态为两条或多条平行条带,分别对应重链和轻链。5.A解析:样本稀释过度会导致蛋白浓度过低,抗体无法充分结合,形成假阴性结果。6.B解析:免疫固定电泳主要用于多发性骨髓瘤的筛查,可通过检测异常M蛋白条带进行诊断。7.C解析:IgM分子量最大,电泳时迁移最慢,最先到达检测区域。8.A解析:免疫固定电泳中,蛋白质在电场中从阴极向阳极迁移。9.B解析:寡克隆带表现为多条细小、弥散条带,通常与血液病相关。10.C解析:免疫固定电泳将抗体固定在膜上,直接观察条带;免疫荧光电泳需荧光标记,观察荧光信号。二、填空题答案与解析1.分子量、电荷解析:M蛋白的迁移率受其分子量和净电荷影响,分子量越大,迁移越慢。2.磷酸盐解析:磷酸盐缓冲液(pH7.2-7.4)能维持蛋白质稳定,适合免疫固定电泳。3.膜解析:抗体固定在硝酸纤维膜上,与样本蛋白结合后显色。4.靠近阳极区域解析:轻链分子量较小,电泳时迁移较快,位于条带靠前位置。5.0.01解析:免疫固定电泳灵敏度可达0.01g/L,能检测微量M蛋白。6.50-100解析:电泳电压通常为50-100V,以保证分离效果且不损伤样本。7.条带形态、数量解析:需结合条带形态和数量判断是否存在M蛋白或寡克隆带。8.M蛋白、寡克隆带解析:免疫固定电泳主要用于M蛋白和寡克隆带的检测。9.单克隆、多克隆、混合型解析:M蛋白可分为上述三种类型,对应不同疾病。10.样本制备、电泳、抗体结合解析:标准化操作流程包括前处理、电泳分离和抗体反应。三、简答题答案与解析1.免疫固定电泳的原理和操作步骤原理:利用蛋白质在电场中的泳动性进行分离,同时结合特异性抗体检测M蛋白或寡克隆带。操作步骤:①样本制备(稀释、去垢);②电泳分离(pH8.0缓冲液);③抗体结合(重链、轻链抗体);④显色观察(化学发光或酶标)。2.如何区分M蛋白与背景蛋白M蛋白表现为清晰、集中的条带,背景蛋白呈弥散状;M蛋白条带数量固定(通常2-3条),背景蛋白数量多且模糊。3.免疫固定电泳在连云港地区的应用场景①血液科:多发性骨髓瘤筛查;②风湿科:狼疮性肾炎M蛋白检测;③传染病科:免疫缺陷病辅助诊断。4.假阳性原因及解决方法原因:抗体污染、样本反复冻融、电泳条件不当。解决:严格无菌操作、避免反复冻融、优化电泳参数。四、论述题答案与解析1.免疫固定电泳在连云港临床意义连云港地区血液病和风湿病高发,免疫固定电泳可快速筛查M蛋白和寡克隆带,提高早期诊断率。例如,中医院可通过该技术监测多发性骨髓瘤患者治疗效果,或识别狼疮患者异常免疫反应。2.免疫固定电泳与琼脂糖电泳的比较及优

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