上饶市人民医院免疫组化技术考核

上饶市人民医院免疫组化技术考核一、单选题（每题2分，共20题）1.免疫组化技术中，最常用的封闭抗体是？A.山羊血清B.小鼠IgGC.牛血清白蛋白D.鸡血清2.在免疫组化染色中，用于增强信号的非生物素化酶是？A.辣根过氧化物酶（HRP）B.碱性磷酸酶（AP）C.葡萄糖氧化酶D.酪氨酸酶3.免疫组化染色中，如果背景过深，可能的原因是？A.抗体浓度过高B.封闭不充分C.DAB浓度过低D.温度控制不当4.免疫组化中，用于检测细胞膜表面抗原的固定剂是？A.甲醛B.乙醇C.甲醇D.冰醋酸5.以下哪种方法常用于减少免疫组化染色中的非特异性结合？A.高温修复B.预冷血清C.蛋白酶K消化D.多次洗涤6.免疫组化中，用于检测DNA的荧光标记物是？A.荧光素二抗B.碘化丙啶（PI）C.地高辛标记的RNA聚合酶D.异硫氰酸荧光素（FITC）7.免疫组化中，用于检测细胞核抗原的修复液是？A.高渗盐溶液B.枸橼酸盐缓冲液C.乙醇-乙酸盐溶液D.DAKO修复液8.免疫组化中，用于阻断内源性过氧化物酶的试剂是？A.甲醇B.H₂O₂C.3%过氧化氢溶液D.封闭液9.免疫组化中，用于检测细胞质抗原的最佳修复时间是？A.5分钟B.15分钟C.30分钟D.60分钟10.免疫组化中，用于检测RNA的标记物是？A.地高辛标记的RNA聚合酶B.碘化丙啶（PI）C.荧光素二抗D.异硫氰酸荧光素（FITC）二、多选题（每题3分，共10题）1.免疫组化染色中，影响结果的因素包括？A.抗体浓度B.温度控制C.固定方法D.胶体金标记2.免疫组化中，用于减少非特异性结合的措施有？A.封闭血清B.高温修复C.蛋白酶K消化D.多次洗涤3.免疫组化中，常用的封闭液包括？A.牛血清白蛋白（BSA）B.非免疫血清C.甲醇溶液D.胶体金标记4.免疫组化中，用于检测细胞核抗原的修复液包括？A.枸橼酸盐缓冲液B.DAKO修复液C.高渗盐溶液D.乙醇-乙酸盐溶液5.免疫组化中，用于增强信号的方法包括？A.酪氨酸酶标记B.双标技术C.生物素化酶标记D.荧光素二抗6.免疫组化中，常用的染色剂包括？A.DABB.FITCC.HRPD.PI7.免疫组化中，影响染色结果的因素包括？A.抗体质量B.温度控制C.固定方法D.胶体金标记8.免疫组化中，用于检测细胞表面抗原的措施包括？A.高温修复B.冷血清封闭C.蛋白酶K消化D.多次洗涤9.免疫组化中，常用的修复液包括？A.枸橼酸盐缓冲液B.DAKO修复液C.高渗盐溶液D.乙醇-乙酸盐溶液10.免疫组化中，用于减少背景的方法包括？A.封闭血清B.高温修复C.蛋白酶K消化D.多次洗涤三、判断题（每题2分，共10题）1.免疫组化染色中，抗体浓度越高，染色结果越好。（×）2.免疫组化中，高温修复适用于所有抗原。（×）3.免疫组化中，封闭不充分会导致背景过深。（√）4.免疫组化中，DAB是常用的荧光标记物。（×）5.免疫组化中，冰醋酸固定适用于所有抗原。（×）6.免疫组化中，蛋白酶K消化可以提高特异性。（√）7.免疫组化中，多次洗涤可以减少背景。（√）8.免疫组化中，荧光素二抗比生物素化酶更常用。（√）9.免疫组化中，甲醛固定适用于所有抗原。（×）10.免疫组化中，高渗盐溶液适用于细胞核抗原修复。（√）四、简答题（每题5分，共5题）1.简述免疫组化染色的基本步骤。2.简述免疫组化染色中，如何减少非特异性结合。3.简述免疫组化染色中，高温修复的原理。4.简述免疫组化染色中，DAB染色的原理。5.简述免疫组化染色中，荧光标记物的优缺点。五、论述题（每题10分，共2题）1.结合上饶地区常见肿瘤病理特点，论述免疫组化技术在肿瘤诊断中的应用价值。2.结合上饶市人民医院的实际情况，论述免疫组化染色质量控制的重要性及措施。答案与解析一、单选题答案1.A2.A3.A4.B5.B6.B7.B8.C9.C10.A二、多选题答案1.ABC2.ABCD3.AB4.ABCD5.ABCD6.ABCD7.ABC8.AB9.ABCD10.ABCD三、判断题答案1.×2.×3.√4.×5.×6.√7.√8.√9.×10.√四、简答题答案1.免疫组化染色基本步骤：（1）固定组织切片；（2）抗原修复；（3）封闭内源性过氧化物酶；（4）抗原封闭；（5）加入一抗；（6）加入二抗；（7）显色反应（DAB或荧光）；（8）复染（苏木素或DAPI）；（9）脱水透明封片。2.减少非特异性结合的措施：（1）封闭血清：使用非免疫血清或BSA封闭未结合位点；（2）高温修复：增强抗原暴露；（3）蛋白酶K消化：去除组织中的蛋白酶，减少非特异性结合；（4）多次洗涤：避免抗体堆积。3.高温修复原理：高温修复通过加热使抗原修复液（如枸橼酸盐缓冲液）进入组织细胞内，使抗原决定簇暴露，提高抗体结合效率，增强染色特异性。4.DAB染色原理：DAB（3,3'-二氨基联苯胺）是免疫组化中常用的酶促显色剂，在辣根过氧化物酶（HRP）的作用下氧化成棕褐色沉淀，用于定位抗原。5.荧光标记物优缺点：优点：灵敏度高、可多标检测；缺点：易受光漂白影响、需荧光显微镜观察。五、论述题答案1.免疫组化技术在肿瘤诊断中的应用价值：上饶地区常见肿瘤（如肺癌、鼻咽癌、乳腺癌等）的病理诊断中，免疫组化技术具有重要价值。通过检测肿瘤相关抗原（如EGFR、HER2、Ki-67等），可辅助诊断、分型及指导靶向治疗。例如：-肺癌中，EGFR突变检测指导靶向药物使用；-鼻咽癌中，EBV检测辅助诊断；-乳腺癌中，Ki-67表达评估增殖活性。2.免疫组化染色质量控制措施：上饶市人民医院应建立