T-CVMA 236-2025 雏鸡孵化厂疫苗管理与使用操作规范

CCSB41中国兽医协会发布IT/CVMA236—2025本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由南昌勃林格殷格翰动物保健有限公司提出。本文件由中国兽医协会归口。本文件起草单位：南昌勃林格殷格翰动物保健有限公司、温氏食品集团股份有限公司、华裕农业科技有限公司、江苏立华食品集团股份有限公司、佛山市高明区新广农牧有限公司、中国兽医协会。本文件主要起草人：张良、党海斌、覃健萍、周守长、张海涛、刘大伟、刘祥、魏娇娇、韩松伟、王延新。T/CVMA236—20251雏鸡孵化厂疫苗管理与使用操作规范本文件规定了雏鸡孵化厂疫苗免疫所需的硬件、区域划分、常用工具、现场管理等要求以及疫苗、稀释液接收和保存，免疫操作和疫苗免疫质量评估的方法。本文件适用于雏鸡孵化厂疫苗管理与免疫操作。2规范性引用文件本文件没有规范性引用文件。3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.1液氮苗liquidnitrogenvaccine只能在-196。C的液氮中保存，出厂时必须放置在液氮罐中的疫苗。一般包括两种类型：1.细胞结合性液氮苗，特指马立克氏病及相关疫苗；2.非细胞结合性液氮苗。3.2油佐剂灭活疫苗oiladjuvantinactivatedvaccine用油佐剂将抗原吸附或黏着，注入鸡体后可较久地存留在体内，持续地释放出抗原物质，不断刺激机体的免疫系统产生抗体的疫苗。3.3冻干苗freezedriedvaccine利用真空冻干机，将疫苗制剂干燥后得到的保持免疫原性的干粉，在疫苗接种前，用稀释液将疫苗干粉稀释至一定倍数后再使用的疫苗。4功能区域的划分和要求4.1整体要求孵化厂疫苗存储间、配备间及疫苗免疫操作间的房间空间应足够大，物品流向应使得工作简单有效。房间之间应有传递窗，传递窗易于清洁和消毒。房间墙壁、屋顶和地面的材质应光洁易清洗。分区管理制度清单请见附录A。2T/CVMA236—20254.2疫苗存储间4.2.1孵化厂应设置独立的疫苗存储间，用于存放疫苗、稀释液和蒸馏水等物品，避光并留有通风口。4.2.2疫苗存储间应配备紫外灯管，用于房间消毒。4.2.3疫苗存储间应留有通风口并安装空调或新风系统，确保疫苗存储间通风顺畅。4.2.4不同类型的疫苗、稀释液和蒸馏水等物品，按照其存放条件的要求，放置所需温度范围内，并确保温度稳定。4.3疫苗配备间4.3.1孵化厂应设立设置独立的疫苗配备间，用于疫苗使用前的配制等操作。4.3.2疫苗配备间应配备紫外灯管，用于房间消毒。4.3.3疫苗配备间应留有通风口并安装空调或新风系统，要求正压通风，确保配备间通风顺畅。4.3.4疫苗配备间应配备室内温湿度计，确保室温控制在20℃~26℃、湿度控制在50%~60%之间。4.3.5疫苗配备间应配备高压蒸汽灭菌锅，确保接种疫苗前后，对液氮苗空瓶、冻干苗空瓶和接种用具等有可能沾有活疫苗的器具进行高压蒸汽灭菌消毒。4.4疫苗免疫操作间4.4.1孵化厂应设立独立的疫苗免疫操作间，用于雏鸡疫苗免疫等相关操作。4.4.2疫苗免疫操作间应留有通风口并安装空调或新风系统，确保操作间通风顺畅。4.4.3疫苗免疫操作间应配备室内温湿度计，确保室温控制在28℃~30℃、湿度控制在60%~70%之间，防止雏鸡过冷或过热及脱水。4.5区域划分疫苗存储间、疫苗配备间和疫苗免疫操作间根据其功能应细化为以下分区：a）疫苗存储间：免疫设备存放区、液氮罐存放区、稀释液存放区和冰箱存放区等。b）疫苗配备间：洗手消毒区、恒温箱存放区、水浴锅存放区、固定的疫苗稀释操作区、液氮罐存放区、冰箱存放区、废弃物存放区、记录区等。c）疫苗免疫操作间：注射免疫设备存放区、喷雾免疫设备存放区、雏鸡存放区等。5常用工具及管理5.1常用工具漏斗（加液氮使用）、防护用具（护目镜、防冻胶皮手套、胶鞋）、工作服、注射器及针头（根据不同物品配备不同规格的注射器和针头）、木尺、安瓿瓶底座、水浴锅、温度计、温湿计、消毒纱布、消毒用酒精棉球和酒精喷壶、放气针、计时器、台灯、剪刀、开瓶器、记号笔、标签纸、高压蒸汽灭菌锅、废弃盒、抽纸、消毒浸泡注射配件盒子、操作示意图、记录表等。常用物品清单请见附录B。5.2常用工具管理T/CVMA236—202535.2.1定点：规定现场所有工具放置到合适的位置。5.2.2定容：现场工具应放置到固定棚架、箱盒、区域内等，并进行标识。5.2.3定量：应核定区域堆放工具的数量。6设备和卫生管理6.1建立责任区，明确责任人。6.2制订区域各岗位清扫基准，全面实施例行清扫。6.3不同设备点检/保养工作充分结合，责任到人，并对检查出来的问题实施改善。6.4制订区域生物安全关键点清洁消毒流程，并实施、记录、改善。7疫苗、稀释液接收和保存7.1液氮苗7.1.1液氮苗接收7.1.1.1入厂前先消毒液氮罐，并检查液氮罐外形完整、无变形、无污染，表面没有“小水珠”。7.1.1.2进厂后立即进行液氮面高度检查，要求疫苗完全浸没在液氮面以下。7.1.1.3检查罐内疫苗是否有融解情况，如果出现，不能使用。7.1.1.4检查安瓿瓶完整性，无破损，安瓿瓶尖部应无结晶状物质。7.1.1.5检查数量、名称、规格、批号是否与货运单一致，单个提桶拍照点数时间少于10秒，填写疫苗接收记录表，液氮疫苗接收记录表见附录C。同时填写孵化厂疫苗库存记录表，见附录D。7.1.1.6安瓿瓶接收后对同一批次疫苗进行留样，留存样品不少于3瓶。做好留样标识并单独保存，保存时间不低于4个月且在有效期内。7.1.2液氮苗保存7.1.2.1正常储存时，35L的液氮罐，液氮面到罐口最大距离为26cm，大于26cm应及时添加液氮。7.1.2.2液氮面检查频率为免疫期间间隔3小时/次或非免疫期间间隔8小时/次，检查人和复核人双人核对。每天量取和添加液氮到标准高度至少两次，填写液氮添加记录表和填写疫苗使用记录表，液氮高度及冰箱温度记录表见附录E。7.2冻干苗7.2.1冻干苗接收7.2.1.1检查疫苗包装，通过冷链温度记录仪检查疫苗是否在标准温度范围内进行储存和运输。7.2.1.2检查包装箱是否有破损并且数量、名称、规格、批号是否与货运单一致，填写孵化厂疫苗库存记录表，见附录D。T/CVMA236—202547.2.2冻干苗保存7.2.2.1根据疫苗使用说明保存在2~8℃或-18℃内冰箱内，冰箱应定期进行温度校准。7.2.2.2配有记录冰箱温度的高低温度计，按时填写冰箱温度的周期记录及疫苗使用记录表，冰箱温度记录表见附录E。7.2.2.3定期对储存的冻干苗进行检查。对超过有效期或储存温度不符合要求的疫苗，应当立即采取隔离存放、暂停发放等措施。7.3油佐剂灭活苗7.3.1油佐剂灭活苗接收7.3.1.1检查疫苗包装，通过冷链温度记录仪检查疫苗是否在批准温度范围内进行储存和运输。7.3.1.2检查数量、名称、规格、批号是否与货运单一致，填写孵化厂疫苗库存记录表，见附录记录表。7.3.2油佐剂灭活苗保存7.3.2.1根据说明保存在2~8℃,特别注意不能冻存。7.3.2.2配有记录冰箱温度的高低温度计，按时填写冰箱温度的周期记录及疫苗使用记录表。7.3.2.3定期对储存的油佐剂灭活苗进行检查并记录。对超过有效期或储存温度不符合要求的疫苗，应当立即采取隔离存放、暂停发放等措施。7.4稀释用品（细胞结合性液氮苗稀释液、冻干苗稀释液、染料等）7.4.1稀释用品接收7.4.1.1检查包装箱是否有破损、有液体渗出，数量、名称、规格、批号是否与货运单一致。7.4.1.2查看稀释用品封口是否密封紧，是否有渗漏、变色、沉淀物、悬浮物等（随机抽检），如发现渗漏、变色须进行报废处理。7.4.1.3查看稀释液pH值，确保在正常范围内。如有异常，应当采取隔离存放、暂停发放等措施。7.4.1.4查看稀释液的装量或者重量，确保在正常范围内，方便疫苗配制和接种疫苗。7.4.1.5填写稀释用品接收记录表。7.4.2稀释用品保存7.4.2.1按照稀释用品说明书保存，防止过热或过冷，配备专用储存区域。7.4.2.2填写稀释用品使用记录表。8疫苗准备8.1细胞结合性液氮苗融解和稀释8.1.1稀释前准备工作T/CVMA236—202558.1.1.1有专门的疫苗稀释操作员，每次进入疫苗配备间，应更衣、换鞋（水鞋或者工装鞋）和手消8.1.1.2进入疫苗配备间后开排气扇通风，防止液氮挥发引起的缺氧。8.1.1.3使用四孔恒温水浴锅，使用清洁水且水量不应低于三分之二，并每天更换。8.1.1.4稀释液不定期称重，容量多的要抽走。8.1.1.5根据疫苗要求设置对应稀释温度，并用温度计校准。8.1.1.6稀释液应根据疫苗要求提前放置于恒温箱或者常温条件。8.1.1.7稀释液内不应添加任何抗生素，不应使用变色、浑浊的稀释液。8.1.1.8使用的注射器和针头（针头大于12号，且针头长度能探到安瓿瓶底部）应经过消毒灭菌，建议使用一次性注射器。8.1.2融解过程8.1.2.1融解前要用酒精棉球对稀释液瓶口进行消毒并晾干，注意酒精不应与稀释好的疫苗直接接触。8.1.2.2提取疫苗前应清洗消毒双手，佩戴防护眼镜、防冻胶皮手套。8.1.2.3提取疫苗前应先用注射器吸取2mL稀释液备用。8.1.2.4疫苗取出后应立即放入水浴锅解冻水中轻轻摇动，时间间隔不应超过5秒，提取疫苗时防止液氮撒漏及疫苗瓶爆炸。8.1.2.5疫苗解冻时应完全没在水中，不应触碰水浴锅内壁，更不应露出水面。8.1.2.6解冻2mL的疫苗，27℃融解时间不应超过90秒，37℃融解时间不应超过60秒，且完全融解；5mL的疫苗解冻时间不应超过120秒，且完全融解。8.1.3稀释过程8.1.3.1疫苗解冻后先用纸巾快速擦干疫苗瓶和手上的水，再掰开疫苗瓶。8.1.3.2用提前吸取稀释液的注射器吸取疫苗，并且注射器中疫苗注入稀释液时要缓慢进行，不可用力过猛过快，瓶身内壁与瓶帽内至少冲洗两次。8.1.3.3从取出疫苗安瓿瓶至疫苗溶液配制完毕，2mL疫苗时间不应超过120秒；8.1.3.4如果使用5mL的疫苗，从取出疫苗安瓿瓶至疫苗溶液配制完毕，时间不应超过150秒。8.1.3.5疫苗稀释后轻轻摇晃稀释液瓶数次，并在瓶身上标记疫苗稀释完成时间，填写孵化厂注射免疫记录表见附录F。8.1.3.6盛装疫苗的安瓿瓶、瓶塞以及剩余的疫苗放到专用的、加有消毒液的废料桶内。8.2非细胞结合性液氮苗融解和稀释8.2.1稀释前准备工作8.2.1.1操作人员洗手，酒精喷洒并清洁操作台面。T/CVMA236—202568.2.1.2摆放疫苗配置所需工具（纸巾、无菌注射器、安瓿瓶底座、量筒、开瓶器、水浴锅（27℃水温）、喷雾用疫苗瓶、蒸馏水。8.2.1.3量取足够蒸馏水至喷雾用疫苗瓶中。如若使用染料，请提前将染料加入稀释用蒸馏水中。8.2.2融解过程8.2.2.1从液氮罐中取出足够数量的疫苗，检查疫苗名称及外观；将提斗放回液氮罐中并盖好盖子。8.2.2.2将安瓿瓶放置27℃温水中缓慢划圈融解，直到完全解冻到液体状态。如果一次融解的疫苗数量较多，可使用漏勺或类似容器盛放融解。8.2.3稀释过程8.2.3.1擦拭安瓿瓶瓶身，用开瓶器打开安瓿瓶，将瓶身、瓶尖放入对应底座孔中。8.2.3.2用无菌注射器吸取疫苗，加入喷雾用疫苗瓶中混合。并冲洗瓶身、瓶尖2次。8.2.3.3将配置好的疫苗进行喷雾免疫，并在1小时内完成免疫。8.3油佐剂灭活苗的准备8.3.1按照生产厂家要求做使用前预温处理。8.3.2使用前反复轻摇并摇匀。8.3.3使用完后的油佐剂灭活苗瓶应放到专用的废弃桶内，当天未能使用完的油佐剂灭活苗及时无害化处理或销毁，第二天不应使用，填写孵化厂注射免疫记录表，见附录F。8.4冻干苗的融解和稀释8.4.1准备工作8.4.1.1有专门的疫苗稀释操作员，每次进入疫苗配备间，需要换鞋、更衣。8.4.1.2使用的量器、容器和设备（针头、注射器）必须经过消毒灭菌，建议使用一次性注射器。8.4.2稀释过程8.4.2.1开始稀释疫苗前清洗消毒双手。8.4.2.2稀释疫苗使用无菌的蒸馏水，根据疫苗使用要求保持在规定的温度内，并计量准确。8.4.2.3稀释时，盛装疫苗的西林瓶应至少冲洗两次。8.4.2.4盛装疫苗的西林瓶、瓶塞以及剩余的疫苗放到专用的、加有消毒液的废料桶内。8.4.2.5填写孵化厂喷雾免疫记录表，见附录G。9免疫接种操作9.1颈部皮下注射免疫9.1.1免疫注射设备需提前进行调试，校准剂量、检查漏免情况，并及时调整针头。T/CVMA236—202579.1.2注射部位为颈部皮下，注射剂量为0.2mL/羽。9.1.3稀释好的细胞结合性液氮疫苗在40至50分钟内注射完毕为宜，不应超过60分钟。每10~15分钟轻摇稀释液瓶数次以混匀疫苗。9.1.4注射过程中，如果发现漏免雏鸡应及时补免，每1000只鸡用酒精棉球擦拭消毒一次针头，若针头有毛刺或弯针，应立即更换。9.1.5油佐剂灭活苗应在细胞结合性液氮疫苗注射免疫两个小时后再进行注射。9.1.6填写孵化厂注射免疫记录表，见附录F。9.2喷雾免疫9.2.1免疫喷雾设备应提前进行调试，以确保雾滴大小、分布和计量符合厂家要求。9.2.2免疫前轻轻拨匀鸡只，使得鸡只分布均匀和站立。9.2.3喷雾时每筐雏鸡在喷雾器停留时间不低于5秒钟，疫苗应在45分钟内喷雾完毕。9.2.4填写孵化厂喷雾免疫记录表，见附录G。10疫苗免疫操作效果评估方法10.1颈部皮下注射免疫操作效果评估10.1.1疫苗注射免疫正确位置应为颈部皮下，其他情况均为不准确免疫。每次免疫前，需要对注射剂量进行校准，防止因设备问题导致的免疫剂量不准确。不应有漏免，其他情况应低于3‰。对免疫操作效果进行抽检评估，并填写孵化厂注射免疫效果抽检记录表，见附录H。10.1.2漏免：没有任何疫苗注射到雏鸡体内。10.1.3渗漏：疫苗注射后，在注射部位有疫苗渗出，沾湿附近羽毛，导致没有足量的疫苗注射到雏鸡体内。10.1.4出血：疫苗注射后，在雏鸡的头部、颈部或者其他部位有血液渗出。10.1.5位置错误：疫苗没有注射到雏鸡颈部皮下，可能注射到颈部下方、背部或翅膀等部位。10.1.6如使用自动化注射设备请参考设备使用说明，具体操作方式，参照各厂家设备要求。10.2喷雾免疫操作效果评估10.2.1对设备评估，确保设备有足够的喷雾压力且经过校准，免疫覆盖率至少达到95%以上。10.2.2喷雾剂量检查，使用优质定量给液器的喷雾装置，不应使用一次性塑料给液器。10.2.3雾滴分布均匀性检查，若无法喷出大小稳定且均匀