DB3310∕T 61-2019 荸荠组培种苗生产技术规程

ICS65.020.20

B05

DB3310

浙江省台州市地方标准

DB3310/T61—2019

荸荠组培种苗生产技术规程

Technicalspecificationfortissuecultureseedlingproductionofwaterchestnut

(Eleocharisdulcis)

2019-12-12发布2020-01-01实施

台州市市场监督管理局发布

DB3310/T61—2019

前言

本标准按GB/T1.1—2009给出的规则起草。

本标准由台州市农业农村局提出并归口。

本标准起草单位：台州市农业科学研究院、台州市农业技术推广总站。

本标准主要起草人：赖小芳、唐兴国、潘晓飚、陈银龙、曾孝元、陈伟强、洪霞、王伯诚。

I

DB3310/T61—2019

荸荠组培种苗生产技术规程

1范围

本规程规定了荸荠组培相关的术语和定义、组培种苗生产、组培苗炼苗、出苗、组培苗二段育秧技

术等内容。

本标准适用于荸荠种苗组培快繁生产、管理与田间应用的全过程。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文

件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

NY/T496肥料合理使用准则通则

NY/T1276农药安全使用规范总则

NY/T2306-2013花卉种苗组培快繁技术规程

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

3.1

荸荠组培种苗

利用荸荠球茎顶芽或侧芽作为外植体，通过植物组织培养方式培育获得的完整植株。

3.2

外植体

从自然生长的活体上获取的用于进行植物组织培养的起始材料。

3.3

试管苗

在培养容器中生长且已达到移栽标准的根、茎、叶俱全的完整植株。

3.4

琼脂苗（组培瓶苗）

生长在固体培养基（凝固剂一般为琼脂）中的组培生根苗。

3.5

无琼脂苗

从培养容器中取出并洗去表面培养基的组培生根苗。

3.6

继代培养

植物组织培养过程中，培养物经过一段时间培养后，基于补充培养基养分、清除有害代谢产物、防

止培养物老化等目的，定期将其接种到新配制的培养基上继续进行培养的过程。

1

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4组培种苗生产

4.1无菌材料的获得

4.1.1外植体选择

选择具有原品种典型性状、芽头健壮、大小均匀、无病完整的荸荠球茎，切取顶芽或饱满腋芽。

4.1.2外植体处理、消毒及接种

4.1.2.1外植体处理

将球茎用1.5%洗衣粉溶液浸泡(10～15)min，洗净表面泥土，自来水冲洗1h，剥除球茎顶芽的叶

鞘，挖取带一点球茎果肉的顶芽或侧芽，剔除果肉，切取(3～5)mm的芽尖。

4.1.2.2外植体消毒

无菌条件下，将切出的芽尖用0.1％升汞溶液（内加2～3滴“Tween-80”表面活性剂，以便提高

灭菌剂活力）浸泡搅拌(8～10)min，无菌水冲洗5次～8次，吸干表面水分，通过解剖镜对芽尖进行二

次切割，切取(0.5～1)mm的茎尖，将茎尖接入预先准备的培养基上。

4.1.2.3外植体接种

外植体接种按NY/T2306-2013“9.3外植体接种”实施。

4.1.2.4培养基配方

相关培养基配方参见附录A。

1.1.1外植体培养

4.1.2.5材料摆放

将接种完成材料置于专用培养筐，整齐排放于培养架上进行培养。

4.1.2.6培养环境

培养温度(25±3)℃，光照强度(1000～1500)lx，光照时间(10～12)h/d。

4.1.2.7材料管理

每周观察记录，及时清理污染。

4.2不定芽诱导

4.2.1无菌条件下，取本标准“4.1”获得的高(1.5～2.0)cm的无菌、成活芽萌发材料，从芽基部切取结

构完整的芽，接入不定芽诱导培养基，培养环境同本标准“4.1.3”。接种过程按照NY/T2306-2013“10接

种操作”实施。

4.2.2相关培养基配方参见附录A。

4.3扩大繁殖

4.3.1增殖培养

2

DB3310/T61—2019

4.3.2无菌条件下，将本标准“4.2”获得的簇生、增殖良好荸荠培养材料从簇生芽基部切割分离，保持

丛芽高度(1.5～3.0)cm，以2个～3个不定芽为接种单位，接入增殖培养基，培养环境同本标准“4.1.3”。

每35d～40d继代1次。

4.3.3相关培养基配方参见附录A。

4.3.4培养材料保存

将待保存材料移至温度(18±2)℃、光照强度(800～1000)lx、光照时间(8～10)h/d环境中培养。每隔

90d继代1次。

4.3.5培养材料保存周期

在上述环境中培养保存的组培材料，继代保存代数应控制在15代以内。

4.4生根培养

4.4.1材料选择

选择株高≥5cm的增殖苗进行生根诱导。

4.4.2接种方法

无菌条件下，将簇生增殖苗从基部切割分离，以单个不定芽为单位接入生根诱导培养基。

4.4.3培养环境

培养环境同本标准“4.1.3”，培养周期25d。

4.4.4培养基配方

相关培养基配方参见附录A。

5组培苗炼苗

5.1待荸荠组培苗苗高≥7cm、基部长出3条～7条(2.0～5.0)cm长的白色不定根，即可进行炼苗。

5.2将试管苗移至室外开放环境中放置2d，第3天拧松瓶盖（但不要开盖），第4天向瓶内加少量水，

斜放瓶盖露出部分缝隙，第5天完全揭开瓶盖，之后每天向瓶内喷适量水，直至试管苗上部发黄为止，

炼苗时间(8～10)d，第10天可取出试管苗，洗净根部琼脂或溶液，移栽至秧田。

6出苗

6.1出苗前准备

荸荠种苗出苗类型包括琼脂苗（组培瓶苗）、无琼脂苗。出苗前需检查种苗质量，确认无污染、无

病害。

6.2包装、标签及运输

6.2.1包装

6.2.1.1琼脂苗（组培瓶苗）包装

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培养瓶放入泡沫箱内，培养瓶之间填充防撞缓冲材料，泡沫箱外以通用纸箱包装，外包装标识应包

括防撞、防摔、请勿倒置等。

6.2.1.2无琼脂苗包装

无琼脂苗预先装入小塑料盒，再放入泡沫箱内，泡沫箱外以通用纸箱包装，外包装标识应包括防撞、

防摔、请勿倒置等。

6.2.2标签

每箱应贴标签，注明品种、规格、数量、产地、出苗日期、注意事项等。

6.2.3运输

用厢式货车密闭运输，装车时纸箱不可倒置，运输途中温度保持(10～25)℃，应在5d内到达目的

地。

7组培苗二段育秧技术

7.1培育壮苗

7.1.1秧田的选择与整理

7.1.1.1秧田应选择地势平坦、肥力中等、排灌方便的水田，其土壤应不漏水、不漏肥、不过于紧实。

组培苗秧田不宜施用有机肥。

7.1.1.2移栽前一个月翻耕，每公顷撒施生石灰1125kg进行土壤消毒，其间耙耕2次～3次，使田土

成泥糊状。

7.1.1.3移栽前2d～3d，每公顷施过磷酸钙375kg、硫酸钾型复合肥75kg，耙匀耙平，待泥浆沉淀

后起畦，畦面宽120cm、畦高10cm、畦间沟宽30cm、畦面平整，使畦面不积水、行沟内能储水，方

便排灌。

7.1.1.4相关肥料使用按NY/T496执行。

7.1.2移栽时间

每年4月15日左右开始育苗，育秧期约35d。

7.1.3组培苗移栽技术

阴雨天气，移栽可全天进行，晴朗天气，移栽在下午进行。移栽时将清洗干净的组培苗自然分株、

勿伤根系，以浅插种稳为宜，插植深度(2～3)cm，株行距（8×8）cm。移栽后搭建小拱棚，覆盖薄膜和

遮阳网。

7.1.4苗期管理

7.1.4.1移栽后的前3d不开膜；3天后拆除遮阳网。移栽后的前10d，沟内保持水层，床面保持湿

润。棚内温度超过25℃时，打开薄膜两头，傍晚降温后及时关棚，10d后温度稳定在20℃以上可拆

除全部薄膜；新叶长出(3～5)㎝，床面可回水0.5㎝；大雨过后应及时排水，防止田水没顶。

7.1.4.2拆膜后喷药防病防虫，同时结合根外追肥，用2‰～5‰的磷酸二氢钾溶液喷施、5d一次、

连喷2次～3次；遇高温阴雨天气，雨停后应立即喷药防病。

4

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7.1.4.335d后苗高约20cm，转入下一阶段。

7.1.4.4相关肥料使用按NY/T496执行，相关农药使用按NY/T1276执行。

7.2种苗扩繁

7.2.1整地与施肥

7.2.1.1繁殖田的选择与育苗田相同。种苗移栽前20d每公顷施腐熟有机肥11250kg，种苗移栽前1d

每公顷施硫酸钾型复合肥225kg、过磷酸钙600kg，耙平田面使肥料均匀，保持水层(2～5)cm。

7.2.1.2相关肥料使用按NY/T496执行。

7.2.2移栽时间

5月中旬开始移栽，移栽后扩繁时间(50～60)d。

7.2.3移栽技术

移栽前从苗床拔出带泥组培苗，剔除杂、变异株，杀菌液泡根消毒；单株插植，株行距（80×80）

m，拉线分厢(4～5)m一厢，留工作行约1m。

7.2.4繁殖田肥水管理

7.2.4.1移栽后，田里保持(2～5)cm水层，秧苗返青后开始追肥，每公顷撒施硫酸钾型复合肥75kg、

尿素45kg，每10d一次、连施两次，30d后每公顷再施硫酸钾型复合肥150kg，封行后控肥控水，移

栽前10d停止施肥。

7.2.4.2相关肥料使用按NY/T496执行。

7.2.5病虫防治

以预防为主、综合防治为原则。注意防治秆枯病、枯萎病、白禾螟等，移栽前5d喷一次杀菌剂，

使苗带药到大田。相关肥料使用按NY/T496执行，相关农药使用按NY/T1276执行。

7.3注意事项

种植组培苗的注意事项参见附录B。

5

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AA

附录A

（资料性附录）

荸荠组培不同阶段参考培养基

荸荠组培不同阶段参考培养基见表A.1。

表A.1荸荠组培不同阶段参考培养基

外植体培养阶段MS+6-BA（0.5～1.0）mg·L-1+NAA（0.01～0.02）mg·L-1

不定芽诱导阶段MS+6-BA（1.0～1.5）mg·L-1

增殖培养阶段MS+6-BA（1.5～2.0）mg·L-1+NAA（0.01～0.05）mg·L-1

生根培养阶段MS+NAA（0.05～0.2）mg·L-1+AC1000mg·L-1

注：不同阶段培养基蔗糖含量均为30g·L-1，