DB22∕T 3494-2023 茄子抗褐纹病鉴定技术规程

ICS65.020

CCSB05

22

吉林省地方标准

DB22/T3494—2023

茄子抗褐纹病鉴定技术规程

Technicalcodeofpracticeforresistanceevaluationofeggplant

cultivarstoPhomopsisblight

2023-09-28发布2023-11-16实施

吉林省市场监督管理厅发布

DB22/T3494—2023

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规

定起草。

请注意本文件中的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。

本文件由吉林农业大学提出。

本文件由吉林省农业农村厅归口。

本文件起草单位：吉林农业大学、吉林农业科技学院、辽宁省桓仁满族自治县农业发展服务中心。

本文件主要起草人：陈姗姗、赵春波、韩玉珠、李爽、赵靖、段微、吴春燕、于占东、张莹、曹鑫、

任瑞敏。

I

DB22/T3494—2023

茄子抗褐纹病鉴定技术规程

1范围

本文件确立了茄子抗褐纹病鉴定的程序，规定了接种体制备、育苗、接种鉴定、病情调查、抗性评

价等阶段的操作指示，描述了过程记录的追溯方法。

本文件适用于茄子品种资源对茄子抗褐纹病的室内鉴定及评价。

2规范性引用文件

本文件没有规范性引用文件。

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

3.1

茄子褐纹病Phomopsisblightofeggplant

由半知菌类真菌茄褐纹拟茎点霉（有性态Diaporthevexans、无性态Phomopsisvexans）引起的一

种真菌病害。

3.2

抗病性diseaseresistance

茄子品种（系）所具有的能够抵御或减轻茄子褐纹病侵染和危害的可遗传性状。

3.3

接种体inoculum

用于接种茄子以引起茄子褐纹病的分生孢子或菌丝体。

3.4

病情指数diseaseindex（DI）

全面考虑发病率与严重度两者的综合指标。

4程序框

1

DB22/T3494—2023

图1茄子抗褐纹病鉴定程序流程

5接种体制备

5.1病原物分离和纯化

采用常规组织分离法。从典型病斑的病健交界处，用无菌刀片切取5mm×10mm的病组织，75%乙

醇消毒30s，无菌水冲洗3次～4次，用无菌滤纸吸干组织块表面水分，置于马铃薯葡萄糖琼脂（PDA）

培养基中，每皿接入3块～5块，用封口膜将培养皿封口后置入25℃恒温箱中暗培养。待长出分生

孢子器后，单孢法纯化获得纯培养物。

5.2茄子褐纹病菌的鉴定和保存

对经过柯氏证病法则验证的有致病性的分离物进行形态学观察。与茄子褐纹病菌（见附录A）形态

一致的分离物编号，用滤纸片法-20℃冰箱长期保存菌种。

5.3接种体的繁殖和保存

5.3.1将菌种转接于PDA培养基，置于25℃恒温箱中培养7天后，用内径为6mm的打孔器从菌

落边缘打取菌饼，转接于PDA平板，培养至21天长出分生孢子器。

5.3.2用无菌的镊子夹取分生孢子器置于双层无菌载玻片压碎后，用少量无菌水冲洗，制成孢子悬液。

在光学显微镜下使用血球计数板对菌悬液中的孢子进行计数，配成1×107个/mL的孢子悬浮液待用。

6育苗

6.1将试验种子放入10%磷酸三钠溶液，或0.1%高锰酸钾溶液中浸种20分钟后，用清水冲洗4次，

放在常温条件下浸种10小时～12小时，然后放在28℃～30℃条件下催芽，每10小时用温水

投洗一次。对照抗病和感病品种种子采取同样方式处理。

2

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6.2出芽后播种于10cm×10cm装有营养土的营养钵中，营养土采用近五年未种过茄科植物的肥

沃园田土6份、草炭土3份，充分腐熟的农家肥1份进行配制，在日光温室内育苗，白天温度25℃～

30℃，夜间温度15℃～17℃，其他正常管理，育苗期间不使用任何杀菌剂。

6.3幼苗应生长健壮、整齐一致，待长至5叶期用于苗期接种。

7接种鉴定

7.1接种时期

幼苗4片～6片真叶期进行接种。

7.2接种方法

采用喷雾法接种，用小型喷雾器将配制好的1×107个/mL孢子悬浮液，均匀喷雾到每一片叶的正

反面，每株接种孢子悬浮液5mL。每份鉴定材料3次重复，每一重复10株苗。

7.3接种后的管理

接种24小时内，将植株置于鉴定室内黑暗保湿，相对湿度90%～95%，24小时以后保持每天

光照14小时，采用灌根浇水，保持土壤湿度近饱和，接种期间温度控制在24℃～28℃范围内。

7.4病情调查

7.4.1调查时间

病情调查于接种后10天～15天进行。

7.4.2调查方法

调查每份鉴定材料接种后发病情况，根据病害症状描述，逐份进行材料调查，记载病情级别，计算

出病情指数（DI）。茄子褐纹病苗期症状见附录A，病情级别划分见附表A.1。

7.4.3病情指数计算

病情指数（DI）按公式（1）计算：

∑(푠×푛)

퐷퐼=()×100····································································(1)

푁×푆

式中：

DI——病情指数；

s——各病情级别代表数值；

n——各病情级别病株(叶)数；

N——调查总株(叶)数；

S——最高病情级别代表值。

8抗性评价

8.1抗性水平

3

DB22/T3494—2023

依据鉴定材料的病情指数（DI）平均值，确定抗性水平，划分标准见表1。

表1茄子褐纹病抗性评价标准

病情指数抗感评价

DI=0.0免疫（I）

0＜DI＜5高抗（HR）

5≤DI＜15抗病（R）

15≤DI＜25中抗（MR）

25≤DI＜35感病（S）

35≤DI＜50中感（MS）

DI≥50高感（HS）

8.2鉴定有效性判别

感病对照材料达到其相应感病程度（DI≥25）时，该批次鉴定视为有效。

4

DB22/T3494—2023

A

A

附录A

（资料性）

茄子褐纹病

A.1学名

茄褐纹拟茎点霉（有性态Diaporthevexans、无性态Phomopsisvexans）

A.2形态描述

A.2.1茄褐纹拟茎点霉病斑上产生的黑色小点是病菌的分生孢子器。初埋生于寄主表皮下，成熟后突

破表皮而外露。孢子器单独着生于子座上，呈凸透镜形，具有孔口，其大小为（55～400）μm×（45～

250）μm，可随寄主部位和环境条件而变化。

A.2.2分生孢子有2种不同形态：

a)椭圆形或纺锤形，单孢无色，大小为（5～8）μm×(2～8）μm，通常内含2个～3个油球；

b)呈细长线状，并在一端弯曲成钩，单孢无色，大小为（12.2～28.0）μm×（1.2～2.0）μm。

A.3病情级别划分

幼苗病情级别及其相对应的症状描述见表A.1。

表A.1茄子褐纹病病情级别划分

病情级别症状描述

0级叶片不发病

1级病斑面积占叶片面积的1%～5%

3级病斑面积占叶片面积的6%～10%

5级病斑面积占叶片面积的11%～25%

7级病斑面积占叶片面积的26%～50%

9级病斑面积占叶片面积大于50%

A.4病原菌培养性状

A.4.1茄子褐纹病菌在PDA培养基上培养，温度为28℃～30℃，湿度80%以上，20天后产生黑

褐色分生孢子器，分生孢子器呈现不规则圆形，直径7mm左右，中间隆起，表面不光滑，菌落形态见

图A.1。

A.4.2挑取黑色分生孢子器，在载玻片上压片镜检，可观察到椭圆形分生孢子器和分生孢子，孢子尺

寸为（4～8）μm×（2～6）μm,分生孢子器形态见图A.2。

5

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图A.1茄子褐纹病菌在PDA培养基上的菌落形态

a）茄子褐纹病菌分生孢子器b）茄子褐纹病菌α型分生孢子

图A.2显微镜下的茄子褐纹病菌分生孢子器形态

A.5记录档案

对茄子褐纹病抗性鉴定过程进行详实的记录并存档，记录格式见表A.2。

表A.2茄子抗褐纹病鉴定结果记载表

病情级别

编号品种名称来源病情指数抗性评价

0级1级