T-CITS 582-2025 免疫细胞功能状态量化检测评估指南

免疫细胞功能状态量化检测评估指南Guidelinesforevalua(报批稿)中国检验检测学会发布 1范围 12规范性引用文件 3术语和定义 14缩略语 15量化检测评估原则 26量化检测评估指标 27量化检测评估方法 38临床应用 4附录A(规范性)免疫细胞功能状态评估技术适用临床应用场景 6参考文献 7本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由首都医科大学附属北京安定医院和国军标(北京)标准化技术研究院提出。本文件由中国检验检测学会归口。本文件起草单位：首都医科大学附属北京安定医院、国军标(北京)标准化技术研究院、山东大学齐鲁医院(青岛)、北京列伯实验室技术交流中心、北京实安科技有限公司、北京医学检验学会、北京中检体外诊断工程技术研究中心、川北医学院附属医院、大连理工大学附属中心医院(大连市中心医院)、大连医科大学附属第一医院、惠州市第一人民医院、钦州市第一人民医院、四川沃文特生物技术有限公司、郑州大学第一附属医院、中山大学附属第一医院广西医院。本文件主要起草人：刘辰庚、刘万阳、王谦、李娜、穆红、戴其全、任亦星、安晓华韩朝、冯阳春、柳明波、雷蕾、陈香宇、张帅、王东。1本文件适用于临床诊疗、健康管理、疾病防控及免疫学研究等领域的免疫细胞功能状态量化检量化检测评估evaluationofquantitaCLIA:化学发光免疫分析法(chemiluminescenceimmunoassay)2ELISA:酶联免疫吸附测定(enzyme-linkedimmunosorbentassay)IgA/G/M/E:免疫球蛋白A/G/M/E(immunoglobulina/g/m/e)IL-2/4/6/10:白细胞介素-2/-4/-6/-10(interleukin-2/-4/-6/-10)PD-1:程序性细胞死亡蛋白1(programmedcelldeathprotein1)qPCR:实时定量聚合酶链式反应(quantitativereal-timepRNA-seq:RNA测序(rnaTh1/Th2:辅助性T细胞1型/2型(Thelper1/Thelper2cell)评估方法基于免疫学、分子生物学等科学理论，采用经广泛验证的技术，建立严格的质量控制与标准化操作程序。整合多维度数据通过智能算法生成综合性免疫评估指标，实现可视化与标准化评估涵盖免疫防御、监视与自稳三大功能，覆盖先天性与适应性免疫系统中的关键细胞类型及其功能亚群，兼顾静态参数(数量、比例、表面标志物)与动态功能(增殖、杀伤、细胞因子分泌),关注免疫状态随病程、治疗及机体状态的动态变化，通过定期监测建立个体化免疫功能动态基优先选择操作简便、成本效益高、易于推广的检测方法；评估结果清晰明确并附临床可操作的3b)免疫细胞功能活性指标，如细胞因子(如IFN-γ,TNF-α,IL-2,IL-4,IL-6,IL-10)c)免疫细胞表面与功能分子标志物，如免疫检查点分子(如PD-1,CTLA-4,淋巴细胞活化基因3)的表达水平和活化标志物(如CD25,CD69,人类白细胞抗原-DR)的表达水平等；采用流式细胞术检测T细胞、辅助性T细胞、细胞毒性T细胞、B细胞和NK细胞等主要淋巴细b)Th2型细胞因子：如IL-4、IL-5、IL-6、IL-10等，反映体液免疫应答及免疫调节状态；7.2.2.2针对特定自身免疫病，宜检测相关的自身抗体谱(如ANA、dsDNA和ANCA等)。4评价免疫细胞在抗原或丝裂原刺激下的增殖反应能力。7.3基因表达分析方法7.3.1免疫受体多样性分析7.3.1.1采用NGS分析TCR或BCR的互补决定区序列。7.3.1.2宜通过生物信息学分析评估免疫受体库的多样性指数、克隆组成、克隆扩增情况及优势克7.3.2免疫细胞转录组分析采用RNA-seq或scRNA-seq技术，全面分析免疫细胞在转录层面的功能状态，发现与免疫应答、免疫调节或疾病状态相关的特征性基因表达谱。7.3.3特定基因表达检测采用实时qPCR或基因芯片等技术，关注与免疫细胞功能、活化、耗竭或代谢相关的关键基因表达变化(如叉头盒蛋白P3、T-box转录因子21、GATA结合蛋白3、维甲酸相关孤儿受体γ、PD-1、CTLA-4等),对免疫相关功能基因或信号通路关键分子进行靶向表达分析。7.4综合性免疫评估方法7.4.1多参数流式细胞术分析结合质谱流式技术，通过设计多色荧光抗体组合，同时检测免疫细胞表面标志物、胞内细胞因子、磷酸化信号分子及增殖标志物等，在单细胞水平实现高通量、多维度的免疫表型与功能分析。7.4.2免疫力评分系统基于流式细胞术、细胞功能及分子检测等多维度数据，通过已验证的算法模型进行整合分析，生成免疫力评分体系，直观评估个体免疫状态(抑制、平衡或激活),为免疫健康分层和临床干预提供依据。8临床应用8.1免疫细胞量化检测评估可用于以下典型场景，为临床决策和健康管理提供支持：a)恶性肿瘤患者：评估放化疗前后的免疫状态，预测感染风险与治疗耐受性，指导免疫检查点抑制剂等药物的应用；b)器官移植受者：监测免疫抑制状态，个体化调整免疫抑制剂用量，辅助鉴别排斥反应与机会性感染风险；c)自身免疫性疾病与过敏性疾病患者：评估免疫失衡状态，指导免疫调节治疗方向，见图1;d)重症感染患者：监测免疫状态变化，识别“免疫麻痹”或“炎症风暴”,指导免疫支持治e)亚健康人群：进行免疫健康筛查与评估，实现“治未病”的主动健康管理；f)细胞治疗：包括免疫细胞和干细胞评估治疗前的基础免疫状态，监测治疗后免疫系统的恢复与重建情况。5(过敏及自身免疫性疾病等)(激素及免疫抑制剂)(免疫细胞治疗等)8.2免疫细胞功能状态评估技术适用的临床应用场景参见附录A。6(规范性)免疫细胞功能状态评估技术适用的临床应用场景见表A.1。技术类别临床应用场景常规筛查与监测WBC、ALC及百分比(%)患者；亚健康人群(基础筛查)多色流式细胞术疫细胞治疗(核心监测指标)器官移植受者(排斥/感染鉴别);自身免疫性疾病(活动度评估);重症感染患者(免疫分型);免疫细胞治疗(功能验(CD107a)检测细胞杀伤活性、脱颗粒能力治疗(如嵌合抗原受体T细胞(chimericantigenreceptort-cel评估)高通量测序(YGS)扩增植受者(免疫重建);重症感染患者(应答监控);免疫细胞治疗(克隆动态)RNA测序(RNA-seq)、免疫细胞功能基因表达谱(如耗竭、活化、分型关键基因)恶性肿瘤患者(肿瘤微环境解析、预后标志物);自身免疫性疾病(机制研究);免疫细胞治疗(机制与耐药研究)特定微小核糖核酸(microRNA,(mcsscngcrRNA,mRNA)表达水平免疫性疾病(活动度及分型)估多参数流式细胞术(≥10色)+算法模型免疫力评分系统特殊疾病免疫球蛋白(IgG/A/M/E)、补体(C3/C4)水平自身免疫性疾病；重症感染患者(免疫功能筛查)自身抗体检测(IIF、ELISA、CLIA等)白身免疫性疾病(诊断与分型)测(qPCR、CLIA等)等病毒DNA载量或抗体水平感染患者(病因及免疫控制能力评估)7分会，中国医药生物技术协会生物诊断技术分会.免疫细胞功能状态量化检测评估与临床应用专家共识[J]