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文档简介
ICS65.120
CCSB20
15
内蒙古自治区地方标准
DB15/T2816—2022
玉米皮固态发酵菌体蛋白饲料技术规程
Technicalspecificationofproteinfeedfromcornhuskbysolid
statefermentation
2022-09-09发布2022-10-09实施
内蒙古自治区市场监督管理局发布
DB15/T2816—2022
前言
本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分:标准化文件的结构和起草规则》的规定
起草。
本文件由内蒙古自治区畜牧业标准化技术委员会(SAM/TC19)归口。
本文件起草单位:内蒙古工业大学、内蒙古阜丰生物科技有限公司、内蒙古优然牧业有限责任公司。
本文件主要起草人:刘占英、燕亚平、高俊杰、高星、崔金娜、李永丽、刘再、伏广好、兰儒冰、
李学朋、刘敏、郜晋楠、胡建华、陈晓妮、王典、朱明达。
I
DB15/T2816—2022
玉米皮固态发酵菌体蛋白饲料技术规程
1范围
本文件规定了玉米皮固态发酵菌体蛋白饲料的术语和定义、要求、操作步骤、质量评定、标签、包
装、保存及保质期。
本文件适用于玉米皮固态发酵菌体蛋白饲料的生产。
2规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中,注日期的引用文件,
仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本
文件。
GB/T6432饲料中粗蛋白的测定凯氏定氮法
GB/T6434饲料中粗纤维的含量测定过滤法
GB/T6435饲料中水分的测定
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法
GB10648《饲料标签》国家标准第1号修改单
GB13078饲料卫生标准
GB/T14699.1饲料采样
GB/T20195动物饲料试样的制备
3术语和定义
下列术语和定义适用于本文件。
玉米皮cornhusk
玉米经过浸泡、破碎后分离出来的玉米表皮,经烘干、挤水、烘干等工序加工而成。
菌体蛋白singlecellprotein
以工农业下脚料、废料为基质,通过接种菌种发酵培养获得的微生物菌体。
玉米皮菌体蛋白饲料singlecellproteinfeedfromcornhusk
以玉米皮为原料,通过纤维降解菌种,将其中纤维素和半纤维素降解为可溶性糖,再经过高产菌体
蛋白菌种将可溶性糖和无机氮源转化为菌体蛋白,获得菌体蛋白饲料。
1
DB15/T2816—2022
4要求
原料要求
应无发霉变质无杂物。粗玉米皮为5~10目;细玉米皮过20目筛通过率85%以上,以3:1的比例混合。
发酵菌种
应符合中华人民共和国农业部公告第2045号的规定。
添加剂
所用添加剂硫酸铵、磷酸二氢钾、氯化钠应符合饲料级,发酵所用的添加剂种类和剂量应符合中华
人民共和国农业部公告第2625号的规定。
培养基
枯草芽孢杆菌培养基:蛋白胨10g,酵母提取粉5g,氯化钠10g,蒸馏水1L,pH为7.0~7.4,
121℃灭菌20min。
酵母菌培养基:蛋白胨20g,酵母提取粉10g,葡萄糖20g,蒸馏水1L,pH为7.0~7.4,115℃
灭菌30min。
菌液细胞数
枯草芽孢杆菌细胞数均培养至1×109cfu/mL~2×109cfu/mL时使用;酵母菌细胞数培养至1×109~
2×109个/mL时使用。
发酵设施
可选择发酵盘和发酵池等。
发酵底物
发酵底物为原料、水及添加剂的混合物,成分为粗玉米皮75kg、细玉米皮25kg、自来水150L、
饲料级硫酸铵5kg、糖蜜(10°Brix)5L、饲料级磷酸二氢钾0.5kg、饲料级氯化钠0.25kg。
5操作步骤
生产工艺流程
生产工艺流程包括6个阶段,如图1所示。
2
DB15/T2816—2022
图1生产工艺流程
菌种培养
5.2.1菌种
菌种选用中国微生物普通菌种保藏中心的枯草芽孢杆菌BacillussubtilisCGMCC1.7417、产朊假
丝酵母CandidautilisCGMCC2.2878以及中国工业微生物菌种保藏中心的枯草芽孢杆菌Bacillus
subtilisCICC10090和酿酒酵母SaccharomycescerevisiaeCICC32236。
5.2.2发酵菌剂制备
以1%接种量将枯草芽孢杆菌B.subtilisCGMCC1.7417和枯草芽孢杆菌B.subtilis
CICC10090种子液接种至LB培养基中,37℃培养至种子液细胞数达到1×109~2×109CFU/ml。
以1%接种量将产朊假丝酵母C.utilisCGMCC2.2878和酿酒酵母S.cerevisiaeCICC32236
种子液接种至YPD培养基中30℃培养至种子液细胞数达到1×109~2×109个/ml。
将菌种(枯草芽孢杆菌B.subtilisCGMCC1.7417:枯草芽孢杆菌B.subtilisCICC10090:
酿酒酵母S.cerevisiaeCICC32236:产朊假丝酵母C.utilisCGMCC2.2878)按1:1:2:2的比例混
合均匀作为发酵菌剂备用。
接种
发酵底物与发酵菌剂充分混合均匀后置于发酵设施,菌剂接种总量为15%,接种量为菌剂体积与发
酵底物质量的比。
发酵
5.4.1发酵条件
发酵应在好氧条件下进行,料层厚度保持在发酵设施高度的2/3处,发酵室温度在25℃~30℃,
相对湿度不低于95%,发酵品温控制在30℃~35℃,发酵72h±2h。
5.4.2发酵过程控制
发酵过程中每12h翻拌一次。
冬季发酵应采取增温、保温措施,夏季发酵应采取降温措施,避免阳光直射。
在发酵过程中,采用间歇通风调节品温在30℃~35℃;当品温高于35℃且连续通风仍不
能降至35℃以下时,则应翻拌一次。
取样及检测
3
DB15/T2816—2022
5.5.1取样方法
应执行GB/T14699.1。
5.5.2检测指标
水分
应执行GB/T6435。
粗蛋白
应执行GB/T6432。
真蛋白
参照附录A中的方法执行。
粗纤维
应执行GB/T6434。
6质量评价
感官指标
感官指标按照表1执行。
表1玉米皮菌体蛋白饲料感官评定
等级
项目
一级二级
颜色色泽均匀色泽稍不均匀
气味芳香酸味,略带酒香,无异味酒味较浓,无异味
质地质地柔软,易分离质地稍硬
理化指标
理化指标按照表2执行。
表2玉米皮菌体蛋白饲料质量基准(干基,%)
等级
项目
一级二级
水分≤60
粗蛋白质SCP≥25.022.0≤SCP<25
真蛋白质CP≥12.09.0≤CP<12
粗纤维CF≤15.015.0<CF≤18.0
4
DB15/T2816—2022
卫生指标
应符合GB13078的规定。
质量分级判定规则
6.4.1符合感官要求及卫生指标后,再根据品质指标定级。
6.4.2根据品质定级时,当样品的各项品质指标同时符合某一等级时,则判定所代表的该批次产品为
该等级;当有任意一项指标低于该等级标准时,则按单项指标最低值所在等级定级。任意一项指标低于
二级标准,则判定所代表的该批次产品为等级外产品。
7标签、包装、保存
标签
产品标签应符合GB10648的规定。
包装
产品质量检验合格后,装入带有单向阀的呼吸袋进行密封保存。
保存
应在阴凉避光条件下保存,避免雨淋。
保质期
夏季应为90d;冬季应为150d。保存期间密切注意温度变化。
5
DB15/T2816—2022
A
A
附录A
(资料性)
真蛋白含量的测定方法
A.1原理
硫酸铜在碱性溶液中,可将蛋白质沉淀,且不溶于热水,过滤和洗涤后,可将纯蛋白质和非蛋白质
含氮物分离,再用凯氏定氮法测定沉淀中的蛋白质含量。
A.2试剂或材料
A.2.1水GB/T6682,三级。
A.2.2硫酸铵,化学纯。
A.2.3氢氧化钠,化学纯。
A.2.4五水硫酸铜,化学纯。
A.2.5硼酸,化学纯。
A.2.6混合催化剂。称取0.4g五水硫酸铜、6.0g硫酸钾或硫酸钠,研磨均匀;或购买商品化的凯式
定氮催化剂片。
A.2.7硼酸吸收液Ⅰ。称取20g硼酸,用水溶解并稀释1000mL。
A.2.8硼酸吸收液Ⅱ。1%硼酸水溶液1000mL,加入0.1%溴甲酚绿乙醇溶液10mL,0.1%甲基红乙醇溶
液7mL,4%氢氧化钠水溶液0.5mL,混匀,室温保存期为1个月(全自动程序用)。
A.2.9氢氧化钠溶液Ⅰ。称取40.0g氢氧化钠,用水溶解,冷却至室温稀释至1000mL。
A.2.10氢氧化钠溶液Ⅱ。称取25.0g氢氧化钠,用水溶解,冷却至室温稀释至1000mL。
A.2.11硫酸铜溶液。称取100.0g五水硫酸铜,用水溶解,冷却至室温稀释至1000mL。
A.3仪器设备
A.3.1分析天平:感量0.0001g。
A.3.2消煮炉、电炉。
A.3.3凯式烧瓶:250mL。
A.3.4消煮管:250mL。
A.3.5凯式蒸馏装置:常量直接蒸馏式或半微量水蒸气蒸馏式。
A.3.6定氮仪:以凯式原理制造的各类型半自动、全自动定氮仪。
A.4样品
按照GB/T14699.1抽取具有代表性的饲料样品,用四分法缩减取样。按照GB/T20195制备试样,粉
碎,全部通过0.42mm试验筛,混匀,装入密闭容器中备用。
A.5样品处理
A.5.1硫酸铜沉淀蛋白
6
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