DB34∕T 5095-2025 畜禽养殖场细菌耐药性水平评价技术规范

ICS65.020.20

CCSB42

34

安徽省地方标准

DB34/T5095—2025

畜禽养殖场细菌耐药性水平评价技术规范

Technicalspecificationforevaluationofbacterialresistancelevelinlivestockand

poultryfarms

2025-01-24发布2025-02-24实施

安徽省市场监督管理局发布

DB34/T5095—2025

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定

起草。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。

本文件由安徽省兽药饲料监察所提出。

本文件由安徽省农业农村厅归口。

本文件起草单位：安徽省兽药饲料监察所、安徽省动物疫病预防与控制中心、安徽华澳生物技术有

限公司、安徽省农机安全监理总站、安徽赛如分析检测科技有限公司、安徽省农业农村厅畜牧兽医局。

本文件主要起草人：刘发全、苗文萍、吴利苹、江定丰、陈斌、明文庆、吴昊、许世富、颜秀梅、

程莹、王丽霞、汪秀娟、王伟。

I

DB34/T5095—2025

畜禽养殖场细菌耐药性水平评价技术规范

1范围

本文件规定了畜禽养殖场细菌耐药性水平评价的样品采集与保存、菌株分离鉴定与记录、耐药性监

测项目与操作、结果判定与水平评价的技术要求。

本文件适用于安徽省畜禽养殖场的细菌耐药性水平评价。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，

仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本

文件。

GB4789.1食品安全国家标准食品微生物学检验总则

GB19489实验室生物安全通用要求

NY/T4141动物源细菌耐药性监测祥品采集技术规程

NY/T4142动物源细菌抗菌药物敏感性测试技术规程微量肉汤稀释法

NY/T4145动物源金黄色葡萄球菌分离与鉴定技术规程

NY/T4147动物源肠球菌分离与鉴定技术规程

NY/T4149动物源大肠埃希菌分离与鉴定技术规程

《动物病原微生物菌（毒）种保藏管理办法》2008年11月26日农业部令第16号公布，2016年5月

30日农业部令2016年第3号、2022年1月7日农业农村部令2022年第1号修订

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

最低抑菌浓度minimuminhibitoryconcentration，MIC

在体外试验中抑制特定微生物生长所需的最低抗菌药物浓度，用以判断测试菌株对抗菌药物的敏

感程度。

折点breakpoint

用于区分菌株为敏感、中介和耐药的MIC值。

敏感susceptible

抗菌药物对菌株的MIC值等于或低于敏感折点,即菌株对该药物表现为敏感。

中介intermediate

抗菌药物对菌株的MIC值在高于敏感折点且低于耐药折点的范围内,即菌株对该药物表现为中介。

耐药resistant

1

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抗菌药物对菌株的MIC值等于或高于耐药折点,即菌株对该药物表现为耐药。

4样品采集、记录与保存

样品采集

样品应从养鸡场、养鸭场、养猪场、养羊场或奶牛养殖场采集，根据养殖场规模，每个点采集5～

10份样本，相同圈舍来源样品每种菌收集1株，来自同一养殖场的指示菌收集不超过10株，致病

菌收集不超过5株，采样按照NY/T4141的规定操作。

采样记录

采样的同时做好养殖场用药情况和饲料来源调查，按附录A的要求填写采样记录表，对同一养殖场

用药情况不同的动物群，分开填写采样记录表。

样品保存

样品采集后分别放置于清洁的容器中，存放温度为0℃～10℃，应在48h内进行细菌分离。

5菌株分离鉴定与记录

菌株分离鉴定。

5.1.1金黄色葡萄球菌分离与鉴定按NY/T4145的规定执行。

5.1.2肠球菌分离与鉴定按NY/T4147的规定执行。

5.1.3大肠埃希菌分离与鉴定按NY/T4149的规定执行。

菌株分离鉴定结果记录

采样人员记录养殖场基本信息和样品来源信息，按附录B的要求填写细菌分离鉴定结果。

6细菌耐药性监测项目与试验操作

药物敏感性监测项目

6.1.1监测肠球菌、金黄色葡萄球菌2种革兰氏阳性菌对红霉素、克林霉素、恩诺沙星、头孢噻呋、

磺胺间甲氧嘧啶、盐酸多西环素、氟苯尼考、泰妙菌素、替米考星、庆大霉素等10种抗菌药的耐药性。

6.1.2监测大肠杆菌革兰氏阴性菌对氨苄西林、庆大霉素、大观霉素、盐酸多西环素、氟苯尼考、磺

胺间甲氧嘧啶、头孢噻呋、恩诺沙星、粘杆菌素等9种抗菌药的耐药性。

细菌耐药性试验操作

采用微量肉汤稀释法对分离菌株进行药物敏感性测试。具体操作方法和步骤按NY/T4142的规定

操作。

7细菌耐药性结果判定与水平评价

细菌耐药性结果判定

2

DB34/T5095—2025

根据不同抗菌药物对受试菌的MIC值结果,将菌株判定为敏感、中介或耐药。不同细菌的耐药性判定

参考值见附录C、附录D。

细菌耐药性水平评价

将每一受试菌的菌株编号、菌种名称、对各种药物的MIC结果以及判定结果记录于药物敏感性试验

结果记录表中，见附录E、附录F。按照公式（1）、公式（2）、公式（3）分别计算分离菌株的敏感率、

中介率及耐药率。

敏感菌株数

敏感率(%)=()×100%········································(1)

受试菌株总数

中介菌株数

中介率(%)=()×100%········································(2)

受试菌株总数

耐药菌株数

耐药率(%)=()×100%········································(3)

受试菌株总数

8生物安全

实验室应符合GB4789.1的要求。

废弃物处理应按照GB19489的规定执行。

菌株管理按照《动物病原微生物菌（毒）种保藏管理办法》的规定执行。

3

DB34/T5095—2025

附录A

（资料性）

采样记录表

采集畜禽养殖场基本信息和样品来源信息等按表A.1的要求填写。

表A.1采样记录表

采样地：养殖场：

采样时间：联系人姓名、电话：

样品来源

□猪日龄____□消化道□呼吸道□泌尿生殖道

□鸡日龄____□肝胆□脑□淋巴结

□牛日龄____□关节□奶样□皮肤

其他________日龄____□粪便其他______________

采样动物健康状况养殖量

□健康□发病及症状：

。

养殖场使用抗菌药情况：

饲料来源、添加抗菌药种类治疗用抗菌药种类与使用方式

药物名称

生产厂名称

使用方式

饲料添加的药物名称

剂量单个动物剂量

剂量

饮水添加剂量

使用时间

饲料添加剂量

用药天数

采样人（签名）：

采样日期：年月日

4

DB34/T5095—2025

附录B

（资料性）

细菌分离鉴定记录表

填写菌株编号信息和菌种分离鉴定结果等信息按表B.1的要求填写。

表B.1细菌分离鉴定记录表

采样时间养殖场名称

样品来源样品类型

样品数量分离人

菌株编号菌种分离鉴定结果保存方式

5

DB34/T5095—2025

附录C

（资料性）

革兰氏阳性菌耐药性判定参考值

表C.1给出了革兰氏阳性菌对不同药物的耐药性判定参考值。

表C.1革兰氏阳性菌耐药性判定参考值

折点，

编号药物名称(µg/mL)

敏感中介耐药

1红霉素≤0.51-4≥8

2克林霉素≤0.51-2≥4

3恩诺沙星≤0.51-2≥4

4头孢噻呋≤24≥8

5磺胺间甲氧嘧啶≤256384≥512

6盐酸多西环素≤48≥16

7氟苯尼考≤24≥8

8泰妙菌素≤1616≥32

9替米考星≤816≥32

10庆大霉素≤48≥16

6

DB34/T5095—2025

附录D

（资料性）

革兰氏阴性菌耐药性判定参考值

表D.1给出了革兰氏阴性菌对不同药物的耐药性判定参考值。

表D.1革兰氏阴性菌耐药性判定参考值

折点，

编号药物名称(µg/mL)

敏感中介耐药

1氨苄西林≤816≥32

2庆大霉素≤48≥16

3大观霉素≤3264≥128

4盐酸多西环素≤48≥16

5氟苯尼考≤48≥16

6磺胺间甲氧嘧啶≤256384≥512

7头孢噻呋≤24≥8

8恩诺沙星≤0.250.5-1≥2

9粘杆菌素≤24≥8

7

DB34/T5095—2025

附录E

（资料性）

革兰氏阳性菌药物敏感性试验结果记录

表E.1给出了药物敏感性试验中畜禽养殖场革兰氏阳性菌对不同抗菌药MIC值、判定结果及耐药性

水平评价。

表E.1畜禽养殖场革兰氏阳性菌药物敏感性试验结果记录表

养殖场名称检测时间记录人

磺胺间甲盐酸多西

红霉素克林霉素恩诺沙星头孢噻呋氟苯尼考泰妙菌素替米考星庆大霉素

菌株菌株氧嘧啶环素

编号名称MIC值判定MIC值判定MIC值判定MIC值判定MIC值判定MIC值判定MIC值判定MIC值判定MIC值判定MIC值判定

µg/mL结果µg/mL结果µg/mL结果µg/mL结果µg/mL结果µg/mL结果µg/mL结果µg/mL结果µg/mL结果µg/mL结果

敏感率

中介率

耐药率

8

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附录F

（资料性）

革兰氏阴性菌药物敏感性试验结果记录

表F.1给出了药物敏感性试验中畜禽养殖场革兰氏阴性菌对不同抗菌药MIC值、判定结果及耐药性

水平评价。

表F.1畜禽养殖场革兰氏阴性菌药物敏感性试验结果记录表

养殖场名称检测时间记录人

盐酸多西磺胺间甲

氨苄西林庆大霉素大观霉素氟苯尼考头孢噻呋恩诺沙星粘杆菌素

菌株菌株