血常规检验操作规范

演讲人：日期:血常规检验操作规范目录CATALOGUE01检验前准备02仪器操作流程03质量控制措施04结果分析与审核05异常处理流程06安全防护要求PART01检验前准备标本类型与采集要求优先选择肘正中静脉或贵要静脉，避免在输液侧或淤血部位采血，确保血液无稀释或污染。采血时需使用一次性真空采血管，严格无菌操作，避免溶血或凝血。静脉血采集毛细血管采血标本标识与记录适用于婴幼儿或特殊患者，选择无名指或足跟部位，穿刺深度需控制（成人1.5-2.0mm，儿童≤1.5mm），避免过度挤压导致组织液混入影响结果。采集后立即标注患者姓名、ID号、采集时间及检验项目，并与申请单信息核对一致，防止样本混淆或信息错误。EDTA-K2抗凝剂仅用于特殊检测（如血气分析），不适用于血常规，因其可能干扰白细胞计数和涂片染色效果。肝素抗凝剂枸橼酸钠抗凝剂适用于凝血功能检测，血常规中禁用，因其会稀释血液导致红细胞和血红蛋白假性降低。为血常规首选抗凝剂，浓度需精确（1.5-2.2mg/mL血液），过量会导致红细胞皱缩，不足则可能引起血小板聚集。采血管需轻柔颠倒混匀8-10次，避免剧烈震荡导致溶血。抗凝剂选择与用量控制标本采集后需在2小时内送检，室温（18-25℃）保存不得超过4小时，否则可能引起血小板聚集或白细胞形态变化。常规送检时间若无法及时检测，需4℃冷藏保存（不超过24小时），但需注意冷藏可能导致血小板计数假性降低。复温后需充分混匀再检测。延迟处理措施对于白细胞分类计数异常的标本（如幼稚细胞），需在1小时内制备血涂片并固定，避免细胞形态退化影响镜检结果。特殊标本处理标本送检时效规范PART02仪器操作流程仪器开机与质控品加载仪器预热与自检质控结果分析质控品选择与加载启动血常规分析仪后，需等待设备完成预热（通常10-15分钟），并观察系统自检状态，确保光学模块、液路系统及电子元件无报错提示。每日开机后必须使用配套质控品（如全血质控物）进行检测，质控品需室温平衡30分钟，混匀后按仪器要求加载至指定位置，验证仪器精密度和准确性是否符合标准（如CV值≤5%）。记录质控数据并与Levey-Jennings质控图对比，若超出±2SD范围需排查原因（如试剂失效、气泡干扰等），必要时执行校准程序。标本唯一性标识采用LIS系统生成唯一条码编号，避免手工录入错误，确保标本信息与患者信息一一对应。急诊标本需标记“急”并优先处理。标本编号与上机顺序上机顺序优化按“质控标本→急诊标本→常规标本”顺序上机，避免交叉污染。批量检测时，每20个标本后插入一个质控品以监控仪器稳定性。标本预处理静脉血标本需轻轻颠倒混匀8-10次（避免剧烈震荡导致溶血），EDTA抗凝标本需在2小时内完成检测，防止血小板聚集或细胞形态改变。试剂更换与废液监测试剂有效期管理定期检查溶血剂、稀释液、鞘液等试剂的余量及有效期，更换时需记录批号、开瓶日期和更换人员信息，避免使用过期试剂导致结果偏差。液路系统维护每周执行液路冲洗程序，清除管道结晶或蛋白沉积；每月使用专用清洗液深度维护，确保液路通畅性和检测准确性。废液处理与容量监控废液桶需每日清空并消毒，防止废液倒灌污染仪器；设置废液容量报警阈值（如80%），超限时立即暂停检测并处理。PART03质量控制措施质控品准备与检测每日开机后，需使用配套质控品（高、中、低值）进行检测，确保质控品复温至室温并充分混匀，避免气泡干扰。检测时需严格按照仪器操作手册设置参数，并记录质控数据。质控图绘制与判读将检测结果录入Levey-Jennings质控图，观察数据是否在±2SD范围内。若连续6次出现同一侧趋势或1次超出±3SD，需启动偏差调查程序。仪器维护与校准每日质控前需执行仪器本底测试、冲洗液更换及探针清洁，确保光学系统和流体管路无污染。若质控结果异常，需优先排除仪器故障或校准偏移。每日室内质控执行步骤失控结果分析与处理纠正措施与记录根据排查结果调整参数、更换部件或联系工程师维修，纠正后需重新运行质控至合格。所有失控事件需详细记录原因、处理步骤及验证结果，存档备查。系统性误差识别若多项目同时失控，需排查仪器光源衰减、电压不稳或环境温湿度异常；若单一项目失控，可能为试剂失效或校准参数错误，需重新校准或更换试剂。初步排查流程首先复测质控品，确认非操作误差；其次检查试剂批号、有效期及储存条件，排除试剂变质或交叉污染；最后核查样本处理流程（如抗凝比例、混匀程度）。室间质评操作指南样本接收与处理收到室间质评样本后，核对样本编号与检测项目，立即检测或按指定条件保存（如避光、4℃冷藏）。检测前需与常规样本同等处理，避免特殊对待导致数据失真。检测与结果上报在常规检测条件下完成室间质评样本分析，确保操作人员、仪器及试剂与日常一致。结果需通过实验室信息系统（LIS）或指定平台加密上报，严禁人为修改数据。结果分析与改进收到评价报告后，比对实验室结果与靶值偏差，计算SDI和VE值。若出现不可接受结果，需启动根本原因分析（RCA），制定改进计划并提交整改报告至质评机构。PART04结果分析与审核异常结果复检规则复检阈值设定根据实验室标准操作规程（SOP），当红细胞计数（RBC）低于3.5×10¹²/L或高于5.8×10¹²/L、血红蛋白（Hb）低于110g/L或高于160g/L时，需启动复检流程，排除仪器误差或样本干扰因素。白细胞分类异常处理若白细胞分类计数中中性粒细胞比例超过80%或淋巴细胞比例超过60%，需结合临床病史并人工涂片镜检，确认是否存在感染、血液病等病理状态。血小板假性减少复检当血小板计数（PLT）低于100×10⁹/L时，需检查样本是否凝集或存在血小板卫星现象，必要时采用枸橼酸钠抗凝管重新采集检测。123直方图/散点图判读要点红细胞直方图分析正常红细胞体积分布曲线呈单峰对称分布，若出现双峰或右侧拖尾，提示可能存在大细胞性贫血或红细胞碎片干扰，需结合血红蛋白电泳或铁代谢检查进一步验证。白细胞散点图异常中性粒细胞与淋巴细胞区域分界模糊或出现中间细胞群增多时，可能提示病毒感染、慢性粒细胞白血病等，需结合流式细胞术进行免疫分型确认。血小板直方图偏移血小板体积分布宽度（PDW）增高伴直方图右侧展宽，需警惕血小板活化或巨大血小板综合征，建议采用光学法血小板计数复检。由检验技师完成原始数据核对，确保仪器传输结果与LIS系统一致，标记异常值并填写复检记录，包括复检方法、结果及操作人员签名。报告审核双签字制度初级审核内容由主管检验师复核临床相关性，如贫血患者是否与MCV、MCH结果匹配，感染病例是否与白细胞计数及CRP指标吻合，确认无误后签署电子报告并锁定数据。高级审核流程当血红蛋白低于60g/L或白细胞计数高于30×10⁹/L时，需立即电话通知临床医生，并在报告中备注“已口头报告”，双签字后归档备查。危急值处理规范PART05异常处理流程标本凝集/溶血应对方案立即标记异常标本并记录凝集程度，联系临床重新采集标本；若为轻微凝集且无法复采，需离心后取上清液检测，并在报告中备注“标本凝集可能影响结果准确性”。凝集标本处理溶血标本识别与处理原因分析与预防通过肉眼观察或仪器报警判断溶血程度，重度溶血需拒收并通知临床重新采血；轻度溶血可检测但需在报告中标注“溶血可能干扰血红蛋白及钾离子测定结果”。核查采血过程是否规范（如暴力混匀、采血针过细等），对护理人员进行培训以减少人为因素导致的溶血或凝集。仪器故障应急操作故障初步排查立即执行仪器自检程序，检查试剂余量、废液桶状态及管路堵塞情况；若为软件故障，重启系统后校准质控品验证性能。备用仪器启用启动应急预案，切换至备用检测设备，优先处理急诊标本，并记录故障期间所有操作以便后续追溯。工程师联动机制故障超过30分钟未恢复时，联系厂家工程师并提供错误代码，同时手工法完成危急值项目检测（如血红蛋白、血小板计数）。危急值报告路径结果复核流程发现危急值后，由两名检验人员复核标本状态及检测过程，排除操作误差或仪器干扰因素，确保数据可靠性。后续追踪与记录1小时内填写《危急值报告登记表》，包括患者信息、项目结果、临床处理措施，并定期汇总分析危急值分布趋势以优化阈值设定。通过电话或LIS系统预警功能通知开单医师，记录接听人姓名、时间及反馈内容，要求复述结果以确认信息传递无误。即时通知临床PART06安全防护要求生物安全防护等级环境消毒标准每日工作结束后需使用含氯消毒剂（如500mg/L有效氯）对台面、仪器表面及地面进行彻底消毒，紫外线照射30分钟以上，并记录消毒日志备查。样本处理规范所有血液样本需视为潜在传染源，操作时严格遵循“三区划分”（清洁区、半污染区、污染区），禁止直接接触样本开口处，离心前必须密封管盖，防止气溶胶产生。BSL-2级实验室要求血常规检验需在生物安全二级（BSL-2）实验室内进行，配备生物安全柜、高压灭菌设备及个人防护装备（如手套、口罩、护目镜），确保操作人员免受血液样本中潜在病原体的感染风险。暴露后紧急处理若发生针刺伤或皮肤黏膜接触血液样本，立即用流动水冲洗伤口15分钟，挤压伤口周边排出污染血液，并用75%乙醇或0.5%碘伏消毒；黏膜暴露需用生理盐水反复冲洗。上报与风险评估24小时内填写职业暴露登记表，上报医院感染管理部门，评估暴露源是否携带HBV、HCV、HIV等病原体，必要时启动预防性用药（如HIV暴露后72小时内服用阻断药物）。随访监测暴露后需进行血清学追踪检测（如0、1、3、6个月），监测相关抗体水平，并接受心理干预以缓解焦虑情绪。职业暴露处理