检验科体液化学检测实验操作规范

检验科体液化学检测实验操作规范演讲人：日期:目录CATALOGUE实验前准备与设施要求标本采集与接收规范标本前处理与保存试剂与质控品管理检测操作标准化流程结果审核与报告规范01实验前准备与设施要求PART实验室环境参数控制实验室需维持恒温（20-25℃）及湿度（40-60%）环境，避免样本变质或仪器性能波动，需配备实时监测系统并定期记录数据。温湿度调控空气洁净度管理照明与噪音控制安装高效空气过滤系统，确保无菌操作区域达到百级洁净标准，减少气溶胶污染风险。实验区域光照强度应≥500勒克斯，避免直射光源干扰检测结果；背景噪音需低于60分贝，保障操作人员专注度。分光光度计校准定期检查转速稳定性（误差＜±50rpm）及温控精度（±1℃），通过平衡测试确认转子动态平衡符合安全标准。离心机性能验证自动化分析仪质控运行前需完成光电信号校准、液路压力测试及机械臂定位校验，并加载第三方质控品验证检测重复性（CV值＜5%）。每日开机后需进行基线校正及波长准确性验证，使用标准滤光片核查吸光度线性范围，确保检测结果偏差≤±1%。仪器设备校准与验证核查生产商资质及CE/FDA认证，抽样检测促凝剂/抗凝剂涂层均匀性，避免因管壁缺陷导致样本异常。采血管批次验收通过称重法验证不同规格吸头的液体转移精度（误差＜±2%），确保与自动化平台兼容无泄漏。移液器吸头适配性测试检查冷链运输记录及有效期，开瓶后需标注启用时间并评估稳定性，避免降解产物干扰检测特异性。试剂盒有效性确认实验耗材合规性检查02标本采集与接收规范PART禁食与饮食控制体位与采集时间采集血液标本前需确认患者是否处于空腹状态，避免高脂饮食对检测结果的影响，尿液标本采集前应避免摄入大量维生素C或色素类食物。血液标本采集时需保持患者坐位或卧位稳定，避免剧烈运动后立即采血；24小时尿液标本需记录总量并混匀后取中段尿送检。患者准备与采集指南抗凝剂选择与用量根据检测项目选择合适抗凝剂（如肝素、EDTA），严格按比例添加，避免过量导致标本稀释或检测干扰。特殊人群注意事项婴幼儿采血需采用专用微量采血管，老年患者需注意止血带使用时间不超过1分钟，防止溶血或凝血异常。血液标本需使用防漏真空管加盖密封，尿液等体液需装入无菌容器并外覆生物危害袋，转运箱需具备防震、防倾倒功能。生物安全包装要求需冷藏转运的标本（如血气分析）应放置于2-8℃专用冰盒，不稳定项目（如血糖）需在采集后30分钟内送达实验室。温控与时效管理01020304标本采集后需立即标注患者姓名、唯一编号、检测项目，并由采集者和复核者共同确认，避免信息错漏。双人核对标识信息采用条形码扫描或RFID技术实现标本流转全程追踪，记录交接人员、时间及转运条件异常事件。电子化交接系统标本标识与转运流程接收时需核查标本量是否满足最低检测要求（如生化检测需≥2mL血清），检查容器有无破损、渗漏或标签模糊现象。溶血（血红蛋白>0.5g/L）、脂血（透光率<90%）、凝血（肉眼可见纤维蛋白）的标本需拒收并记录异常原因。当标本标识与申请单信息不一致时，应立即联系临床科室核实，未确认前不得上机检测，避免错误报告发放。脑脊液等需离心后检测的标本，应在接收后15分钟内完成预处理，延迟操作需备注说明并评估对结果的影响。标本接收标准与拒收原则完整性检查质量异常拒收标准信息不符处理流程特殊标本预处理03标本前处理与保存PART离心速度与时间标准血清/血浆分离标准尿液标本处理脑脊液离心规范离心速度需控制在3000-3500转/分钟，持续10-15分钟，确保血细胞与液体成分充分分离，避免溶血或纤维蛋白残留干扰检测结果。采用低速离心（2000转/分钟）5-8分钟，防止细胞破裂导致蛋白或酶类物质释放影响生化指标准确性。离心速度1500转/分钟，时间5分钟，用于去除尿沉渣，保留上清液进行化学分析，需注意避免过度离心导致尿蛋白变性。分离分装操作规范无菌分装技术使用一次性无菌吸头及EP管，避免交叉污染，分装体积需根据检测项目需求精确控制（通常≥0.5mL）。分层取样要求吸取上清液时避免触及沉淀层，尤其是血脂或高纤维蛋白原标本，需倾斜离心管后缓慢吸取中层液体。多项目分装策略同一标本需分装至不同试管时，优先分配稳定性差的检测项目（如乳酸、氨等），并标注清晰的分装顺序及用途。暂存温度与时效规定分离后的血清/血浆在2-8℃冷藏条件下可保存24小时，如需长期保存需置于-20℃以下，避免反复冻融。常规生化检测保存葡萄糖、乳酸等易代谢物质需在分离后1小时内检测，或立即置于冰上暂存（4℃），时效不超过2小时。特殊项目时效性-20℃保存的标本需在室温下自然解冻，禁止水浴或加热，解冻后需轻柔混匀避免气泡产生影响光学检测。冷冻标本解冻规范04试剂与质控品管理PART试剂配制与有效性验证交叉污染防控采用独立分装工具和专用容器配制试剂，避免不同试剂间交叉污染，定期检查配制设备的清洁状态。03通过重复检测已知浓度样本，评估试剂批间差和批内差，确保其在不同时间段内性能稳定，灵敏度满足临床检测需求。02稳定性与灵敏度验证标准化配制流程严格按照试剂说明书进行操作，确保稀释比例、混合顺序及环境温湿度符合要求，避免因操作不当导致试剂失效或检测偏差。01质控品复溶与保存要求复溶操作规范使用指定溶剂和体积复溶冻干质控品，轻柔混匀避免气泡产生，静置时间需符合说明书要求以确保充分溶解。开瓶稳定性监测记录首次使用时间，定期检测质控品开瓶后的性能变化，超出稳定期或出现异常结果需立即更换。分装与冻存条件复溶后质控品应分装至无菌小管中，标注批号及有效期，-20℃以下冷冻保存，避免反复冻融导致靶值漂移。校准品溯源与应用规范国际标准物质溯源选择具有国际认证的校准品，确保其赋值可追溯至更高一级参考物质，减少检测系统的系统性误差。多点校准策略每日开机或更换试剂批号后需执行校准，并通过第三方质控品验证校准效果，偏差超过允许范围时重新校准。根据检测项目线性范围，采用至少6个浓度点的校准曲线，覆盖临床常见病理值，提高低值和高值区域的准确性。校准频率与验证05检测操作标准化流程PART仪器操作参数设置根据试剂说明书和仪器性能要求，精确设置波长、温度、反应时间等核心参数，确保检测系统稳定性。需定期验证参数准确性，避免因参数漂移导致结果偏差。校准参数设定样本量与试剂比例优化质控规则配置依据不同检测项目特性，调整样本与试剂的最佳配比，例如高浓度样本需适当稀释，低浓度样本需增加进样量以提高灵敏度。在仪器软件中预设Westgard多规则质控策略，包括1-2s、1-3s、R-4s等规则，实现实时监控检测过程的精密度和准确度。样本前处理标准化严格按试剂瓶标识方向装载，避免气泡产生；启用仪器自动混匀功能或手动颠倒混匀，确保试剂充分溶解无沉淀。试剂装载与混匀反应过程监控实时观察反应曲线是否呈典型动力学特征，异常曲线（如跳点、平台期延迟）需立即暂停检测并排查原因。对浑浊或高脂样本进行离心或过滤处理，避免堵塞仪器管路；溶血样本需标记并评估干扰程度，必要时重新采集。上机检测关键步骤使用经计量认证的比色杯，避免划痕影响透光率；显色反应需严格避光并控制环境温度，显色时间误差不超过说明书规定值的±5%。手工检测方法学要点比色法操作细节根据不同体液类型（如脑脊液、胸腹水）设定差异化的离心条件，例如脑脊液需低速离心以避免细胞破裂影响生化指标。离心速度与时间控制定期校准移液器，关键步骤采用反向吸液技术；黏稠样本（如关节腔积液）需使用正置换型移液器以保证体积准确性。移液精度验证06结果审核与报告规范PART原始数据核查要点检测参数完整性验证确保所有检测项目的数据完整录入，包括样本编号、检测时间、仪器参数、校准曲线及质控结果，避免遗漏关键信息导致报告错误。异常结果复检机制对超出线性范围、质控偏差或临床不符的结果，需执行复检流程，结合稀释重测、仪器比对或人工复核等手段确认数据可靠性。交叉污染排查审核同批次样本的检测顺序，排查高值样本对低值样本的携带污染风险，必要时重新处理样本或更换检测批次。危急值报告流程02

03

电子系统强制拦截01

分级预警与即时通知在LIS系统中设置危急值自动拦截功能，未完成复核流程的报告无法签发，防止误报或漏报。多通道复核确认危急值结果需由两名检验人员独立复核，核对样本状态、仪器状态及历史数据，排除技术干扰因素后方可上报。建立危急值分级标准（如血钾、血糖等），检测到危急值时需立即电话通知临床医生，并记录通知时间、接听人及反馈内容，确保信息传递可追溯。报告签发与存档要求双