HIV快速检测阳性样本确认流程指南

HIV快速检测阳性样本确认流程指南在艾滋病防控工作中，HIV快速检测凭借操作简便、耗时短的优势，广泛应用于基层筛查、高危人群监测等场景。然而，快速检测的阳性结果需通过实验室确证试验进一步验证，以避免假阳性带来的社会心理影响，同时保障公共卫生管理的准确性。本文结合临床实践与实验室规范，详细阐述HIV快速检测阳性样本的确认流程，为医疗及疾控机构提供实用参考。一、阳性样本的初步处理与送检准备当快速检测（如胶体金法、乳胶法等）出现阳性结果时，需立即对样本和受检者信息进行双核对：确认受检者姓名、性别、年龄、采样时间等信息与样本标签一致，记录快速检测的方法、结果判读时间及操作人员。（一）样本保存与运输1.样本类型与保存：快速检测常用全血、血清或血浆样本。若采用全血样本，需在24小时内送检；血清/血浆样本可在4℃环境下短期保存（≤72小时），如需长期保存（超过3天），应置于-20℃冰箱，避免反复冻融导致抗体或核酸降解。2.生物安全运输：将样本装入带螺旋盖的无菌离心管，外包密封袋，放入符合UN3373标准的生物安全运输箱（内置冰排维持低温），随附送检单（注明受检者信息、快速检测结果、样本类型及采集时间），由专人送至具备确证资质的实验室（如疾控中心或三级医院检验科）。二、实验室确证试验的选择与操作确证试验的核心目标是通过高特异性方法验证HIV感染状态，目前主流方法包括蛋白印迹试验（WB）、核酸检测（NAT）及抗原抗体联合确证试验，需根据受检者情况（如感染阶段、年龄）选择适宜方法。（一）蛋白印迹试验（WB）：抗体确证的“金标准”WB通过检测HIV特异性抗体的条带（如gp120、gp41、p24等）判断感染状态，操作需严格遵循以下规范：样本处理：血清/血浆样本需56℃灭活30分钟（避免病毒活性），离心去除杂质后备用。试验流程：按试剂盒说明书加样、孵育（通常37℃，1-2小时）、洗涤（去除非特异性结合）、加酶标二抗、显色（如化学发光或底物显色）。结果判定：阳性：出现至少两条env基因编码的条带（如gp120、gp41）或一条env条带加p24条带（依试剂盒判定标准）；阴性：无特异性条带或仅出现非特异性条带；不确定：条带不典型（如仅p24或单一env条带），需结合临床随访。（二）核酸检测（NAT）：窗口期与婴幼儿的关键手段对于窗口期受检者（感染后抗体未产生，快速检测阳性但WB阴性）、婴幼儿（母婴传播筛查，母体抗体干扰抗体检测），需采用核酸检测（如RT-PCR检测HIVRNA，或PCR检测HIVDNA）：样本要求：全血需使用EDTA抗凝管，避免肝素干扰扩增；血浆需在采集后2小时内分离，-80℃保存。结果判定：检测到HIV核酸（RNA或DNA）且排除实验室污染，结合临床症状（如发热、皮疹）可判定感染；未检测到核酸需排除窗口期（建议2-4周后复查）。三、结果复核与质量控制为避免操作误差或试剂失效导致的假结果，需建立双重复核机制：（一）内部复核对WB或NAT的阳性/不确定结果，由另一名具备HIV检测资质的检验人员重复试验，或换用不同品牌试剂盒验证。若两次结果一致，方可报告；若结果矛盾，需排查样本污染、试剂批号差异等因素。（二）质量控制体系1.室内质控：每批检测设置阴性质控（不含HIV抗体/核酸）、阳性质控（含已知浓度的HIV抗体/核酸），监控试验的准确性。若质控品结果异常，需立即停止试验，排查试剂失效、仪器故障（如酶标仪波长偏移、核酸扩增仪温度不均）等问题。2.室间质量评价：每年参加国家级或省级室间质评（如国家疾控中心的HIV确证实验室能力验证），通过盲样检测验证实验室的检测能力，及时改进操作中的薄弱环节。四、结果报告与咨询服务确证试验完成后，需以书面报告形式反馈结果，并配套专业咨询，减轻受检者的心理负担：（一）报告内容明确标注：确证试验方法（如“WB法”或“RT-PCR法”）；结果（“HIV抗体阳性”“HIV核酸阳性”“阴性”或“结果不确定”）；检测日期、实验室名称及联系方式；结果解释（如不确定结果的可能原因：窗口期、免疫反应异常等）。（二）分级咨询服务1.阳性结果：由疾控中心或医疗机构的艾滋病咨询员提供一对一咨询，内容包括：解释感染状态，告知抗病毒治疗的免费政策及转介流程（如转至当地定点医院）；指导防护措施（如避免无保护性行为、不共用注射器），防止病毒传播；提供心理支持，缓解焦虑情绪，鼓励规律治疗。2.阴性结果：说明快速检测可能为假阳性（如类风湿因子、自身抗体干扰），解释确证试验的可靠性，建议：若有高危行为，3个月后再次筛查（排除窗口期）；保持健康生活方式，避免高危行为。3.不确定结果：建议2-4周后复查，结合以下信息综合判断：近期高危行为史（如性接触、注射吸毒）；临床症状（如持续发热、淋巴结肿大、皮疹）；补充检测（如抗原检测、CD4+T细胞计数）。五、特殊场景的处理建议（一）婴幼儿样本（≤18月龄）母婴传播的婴幼儿可能携带母体抗体，抗体检测（如WB）易出现假阳性。需采用HIVDNA检测（检测婴儿体内的病毒核酸）确认感染，同时结合母亲的感染状态、婴儿的临床症状（如生长发育迟缓、反复感染）综合判断。（二）窗口期样本若快速检测阳性，但WB阴性、NAT阴性，需结合受检者的高危行为时间（如最后一次高危行为距检测的时间）：若＜2周，建议2周后复查NAT；若2-4周，建议4周后复查WB或NAT；若＞4周，结合临床排除感染（如无相关症状、行为史低危），可判定为假阳性。结语HIV快速检测阳性样本的确认流程，是平衡筛查效率与诊断准确性的关键环节