DB23∕T 2323-2019 软枣猕猴桃组培快繁技术规程

ICS65.020.40

B61DB23

黑龙江省地方标准

DB23/T2323—2019

软枣猕猴桃组培快繁育苗技术规程

2019-03-19发布2019-04-18实施

黑龙江省市场监督管理局发布

DB23/T2323—2019

前言

本标准依据GB/T1.1—2009的编写规则起草。

本标准由黑龙江省林业和草原局提出并归口。

本标准起草单位：黑龙江省林业科学研究所、黑龙江省林业监测规划院。

本标准主要起草人：田新华、李京、周伟政、张玲、卢慧颖、李艳霞、张妍妍、张建瑛、姜天瑞、

温爱亭、李念森、黄俊杰、毛洪波、于腊梅、于晓杰、韩贤波、白吉福、徐英华。

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DB23/T2323—2019

软枣猕猴桃组培快繁育苗技术规程

1范围

本标准规定了软枣猕猴桃（ActinidiaargutaPlaneh.）组培快繁育苗技术的仪器设备、

环境和设备消毒、培养基制备、外植体培养、炼苗与移栽、生产档案。

本标准适用于软枣猕猴桃组培快繁育苗。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适

用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T6001育苗技术规程

LY/T1882林木组织培养育苗技术规程

DB23/T1589蓝靛果种苗组培快繁技术规程

3仪器设备

应符合DB23/T1589的规定。

4环境和设备消毒

4.1接种室消毒

接种前用紫外灯照射30min。

4.2培养室消毒

每周用臭氧消毒40min。

4.3超净工作台的消毒

接种前用紫外灯照射30min并用70％酒精擦拭台面，定期清洗超净工作台过滤膜。

4.4接种器具的消毒

使用前将枪式镊子、解剖剪、培养皿、解剖刀进行高温蒸汽消毒；接种过程中采用酒精

灯灼烧消毒。

5培养基制备

5.1母液配制

按照LY/T1882的规定执行。

5.2培养基配制

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DB23/T2323—2019

按照LY/T1882的规定执行。

诱导培养基：MS培养基+6-BA0.5mg/L+ZT1.0mg/L；继代增殖培养基：MS培养基+6-BA

1.0mg/L+ZT0.5mg/L；生根培养基：MS培养基+IBA0.2mg/L。

5.3培养基灭菌

采用高压蒸汽灭菌，在压力0.105MPa、温度121℃条件下灭菌20min。锅内的灭菌物

以不超过锅容量的3/4为宜。

5.4培养基保存

灭菌后的培养基放入接种室，常温条件下宜在7d内使用，2℃～4℃条件下14d内使用。

培养基应保存于洁净环境中，避免阳光直射。

6外植体培养

6.1外植体的选择

选择生长健壮、无病的植株作为采样母株，剪取当年生的半木质化的茎段作为外植体，

采样时间宜选择晴天或露水干后。

6.2外植体灭菌

先将外植体用洗涤剂作表面清洗，再将外植体用流水冲洗30min后，将外植体放入消毒

瓶中。把装有外植体的消毒瓶放入超净工作台，打开消毒瓶倒入0.1%升汞并摇晃，浸泡消

毒3min取出，用无菌水冲洗5次；再用无菌水浸泡40min，用无菌滤纸吸干外植体表面的水

分。

6.3外植体接种与诱导培养

将培养瓶的封口膜取下，瓶口在酒精灯外焰上旋转灼烧消毒。枪式镊子在酒精灯上灼烧

消毒并冷却后，将表面消毒后的外植体用手术剪刀剪去两端，剪取长约1.0cm左右的带有

单个腋芽的茎段接种于诱导培养基。每个培养瓶放3个外植体，接种后盖上封口膜，并标注

日期。培养35d后进行继代增殖培养。

6.4继代增殖培养

外植体经诱导培养生成丛生芽，转接至继代增殖培养基中培养。培养35d后再进行继

代增殖培养。

6.5生根培养

选取培养瓶中长度1.5cm～2.0cm生长健壮的芽接种至生根培养基中，组培苗生长过

程中在基部会出现浅绿色嫩根，培养35d后平均生根数3条以上，根长在1.0cm以上即

可炼苗。

6.6组培苗培养条件

培养室的温度控制在24±2℃，相对空气湿度控制在70%～80%，光照强度为2000

Lux～3000Lux，光照时间为12h/d。

7炼苗与移栽

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DB23/T2323—2019

7.1组培苗炼苗

将装组培苗的培养瓶从培养架上轻轻取下，迅速转移到日光温室中，自然散射光下炼

苗，温度控制在20℃～25℃，每天中午在培养瓶周围喷洒雾水，封口炼苗3d～5d。

封口炼苗后打开瓶口，向瓶内注入超过培养基表面0.5cm高的自来水，温度控制在20

℃～25℃，炼苗1d～2d后即可移栽。

7.2移栽

用手指或镊子轻轻取出组培苗，用清水洗去苗基部的培养基，速蘸0.5%高锰酸钾溶

液消毒，移栽至装有黑壤土和粗河沙（混合比例为2：1）的混合基质的育苗盘中。育苗盘

规格为35cm×50cm，育苗盘四壁高度不能低于7cm，装入育苗盘中的基质厚度不应小于5cm

。

7.3移栽苗管理

育苗期保持育苗基质见干见湿，育苗水分管理按照GB/T6001的规定执行。温室空气

湿度应保持6