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文档简介
ICS65.020.30
CCSB40
15
内蒙古自治区地方标准
DB15/T4046—2025
利用葡萄糖钳夹技术检测围产期母羊
胰岛素敏感性的操作规程
Thecodeofpracticeondetectinginsulinsensitivityinperinatal
ewesusingglucoseclamptechnology
2025-06-06发布2025-07-06实施
内蒙古自治区市场监督管理局发布
DB15/T4046—2025
前言
本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分:标准化文件的结构和起草规则》的规定
起草。
本文件由内蒙古自治区畜牧业标准化技术委员会(SAM/TC19)归口。
本文件起草单位:内蒙古自治区农牧业科学院、鄂尔多斯市农畜产品质量安全中心、乌兰察布市凉
城县永兴镇人民政府、鄂尔多斯市农牧业科学研究院。
本文件主要起草人:孙海洲、金鹿、张春华、李胜利、张崇志、付乐、李文婷、陈攀亮、赵亚星、
杨鼎、宝华、义拉勒特、孙余卓、魏晓玲、娜美日嘎。
I
DB15/T4046—2025
利用葡萄糖钳夹技术检测围产期母羊
胰岛素敏感性的操作规程
1范围
本文件规定了检测围产期母羊胰岛素敏感性方法使用的试剂、仪器、设备和测定步骤。
本文件适用于围产期母羊胰岛素敏感性的检测。
2规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中,注日期的引用文件,
仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本
文件。
YY/T1200葡萄糖测定试剂盒(酶法)
YY/T1250胰岛素定量标记免疫分析试剂盒
3术语和定义
下列术语和定义适用于本文件。
胰岛素敏感性insulinsensitivity
脂肪细胞、肌肉细胞和肝细胞对正常浓度的胰岛素产生反应不足的现象,亦即这些细胞需要更高的
胰岛素浓度才能对胰岛素产生反应。
胰岛素-血糖钳夹技术hyperinsulinemiceuglycemicclamptest
一种检测胰岛素敏感性的方法,即给予动物一定量的胰岛素后,将葡萄糖用某种速率滴注入血液,
部分葡萄糖能被利用,但血糖水平可维持稳态。
4试剂
试剂
4.1.1牛源胰岛素(纯度≥27%)。
4.1.2牛血清白蛋白(BSA,纯度≥98%)。
4.1.3生理盐水:称取0.9g氯化钠,溶解在少量蒸馏水中,稀释溶解后定容到100mL。
4.1.410%葡萄糖溶液:称取10.0g葡萄糖,溶解在少量蒸馏水中,稀释溶解后定容到100mL。
4.1.550%葡萄糖溶液:称取50.0g葡萄糖,溶解在少量蒸馏水中,稀释溶解后定容到100mL。
1
DB15/T4046—2025
滴注液配制
4.2.110%糖盐溶液:称取12.5g葡萄糖,溶解在125mL生理盐水中。
4.2.2葡萄糖滴注液:125mL10%糖盐溶液与75mL50%葡萄糖溶液混匀,用0.22μm的一次性过
滤器过滤除菌,配制成葡萄糖滴注液待用。
4.2.3胰岛素滴注液:称取3mg胰岛素与0.03gBSA溶于3mL无菌水中,充分混合后,加入150μ
L6N盐酸制备为冻存液。称取0.23gBSA、量取2.88mL冻存液溶解于237.12mL生理盐水中,混匀
后用0.22μm的一次性过滤器过滤除菌,配制成胰岛素滴注液待用。
5仪器和设备
恒流泵(型号:HL-2,输出流量:2×(1mL/h~600mL/h))。
注射泵(型号:W0109-1B,流量范围:5.297μL/min~52.97mL/min(60mL注射器))。
快速测血糖仪(室温~30℃)。
0.22μm的一次性过滤器。
输液管。
一次性静脉留置针。
6测定步骤
母羊滴注前处理
滴注前一周对母羊进行3d适应性训练,在代谢笼中饲养,自由饮水,每隔两小时饲喂一次,为避
免采食量变化对机体血糖水平的影响,需要对动物进行定量限饲,饲喂量为前一日饲喂量的80%。
安装静脉留置针
滴注前一天,在母羊的一侧颈静脉安装留置针,连接三通管,一端连接注射胰岛素,一端连接葡萄
糖输注泵,输注滴注液。同时,在动物的另一侧颈静脉安装留置针用于采集血样。
胰岛素与葡萄糖的滴注
200mL胰岛素滴注液使用注射泵调节,保证胰岛素滴注液以10mL/h的速度恒流灌注入颈静脉中。
100mL葡萄糖滴注液使用恒流泵调节,灌注速率随机体血糖水平的变化调节,使机体血糖水平保持稳
定,此时葡萄糖滴注液的滴注速率为8mL/h,此滴注过程大约需要10h~12h。
钳夹处理期血液中血糖浓度的测定
基准期:灌注前一天,分别于07:30、08:30、13:30、14:30、19:30和20:30六个时间点采集血样,
用快速测血糖仪测定血糖浓度,确定基础血糖在1.4mmol/L~4.4mmol/L范围内。
灌注期:葡萄糖,胰岛素灌注后每隔10min测定一次血糖,并根据血糖浓度调节目标血糖水平,
使其稳定在基础血糖1.4mmol/L~4.4mmol/L范围内。待血糖稳定后,每隔1h采一次血样测定血糖
并留样用于测定胰岛素浓度。
完成期:钳夹结束时,首先停止泵入胰岛素,预防低血糖发生,然后逐渐减少葡萄糖输入速度。
血样的处理
采集的血样中加入肝素钠抗凝,低速台式离心机3000rpm,离心15min,取血浆以分析胰岛素和
2
DB15/T4046—2025
血糖浓度。
血样的测定指标与方法
血浆胰岛素浓度按照
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