CN111138404A 一种大麻根提取物及其制备方法 （云南绿新生物药业有限公司）

(10)申请公布号CN111138404A(21)申请号202010064208.5(71)申请人云南绿新生物药业有限公司地址655000云南省曲靖市沾益区城西工业园区(72)发明人刘胜贵王钲霖蒋永昌付彬彬李智高孔令羽(54)发明名称一种大麻根提取物及其制备方法(57)摘要本发明属于生物医药技术领域，具体涉及一种大麻根提取物及其制备方法，本发明所述的大麻根提取物中富含大麻碱、萜醇和大麻酮等，四氢大麻酚未检出；所制得的大麻根提取物具有祛制备大麻根提取物的方法，该制备方法工艺简21.一种大麻根提取物及其制备方法，其特征在于，大麻根提取物中富含大麻碱、萜醇和大麻黄酮等，四氢大麻酚含量为未检出。2.根据权利要求1所述的一种大麻根提取物及其制备方法，其特征在于，所述大麻根提取物中大麻碱、大麻萜醇和大麻黄酮的综合百分含量大于60%,四氢大麻酚的重量百分含量为未检出。3.根据权利要求1或2所述的一种大麻根提取物及其制备方法，其特征在于：该大麻根提取物的制备方法为：(1)筛选和脱水：取新鲜工业大麻根洗净晾干，将晾干的工业大麻根放入剪切机中进行剪切，再将剪切后的工业大麻根进行脱水干燥，制备得工业大麻根粗品；(3)浸提：将制得的大麻根颗粒倒入浸提罐中，加入浸提溶剂升温浸提三次；(4)离心：将步骤(3)各次得到的浸提液进行离心分离，70～80℃浓缩回收即得初提液；(5)萃取：向步骤(4)得到的初提液中加入正己烷，取水相液；再向水相液中加入正丁醇，合并正丁醇萃取液70～80℃浓缩即得正丁醇萃取物；(6)纯化：将步骤(5)得到的正丁醇萃取物浓缩抽干，按比例加入一定量的甲醇水溶液，加热充分溶解后过滤；得到的过滤液经大孔树脂柱分离，即得大麻根纯化液；(7)浓缩和干燥：将步骤(6)得到的大麻根纯化液70～80℃减压浓缩，烘干后粉碎得大麻根提取物成品。4.根据权利要求3所述的一种大麻根提取物及其制备方法，其特征在于，所述步骤(1)中脱水干燥的温度选自60～80℃,干燥后含水量控制在15%以下。5.根据权利要求3所述的一种大麻根提取物及其制备方法，其特征在于，所述步骤(2)中粉碎机滤网为30-50目。6.根据权利要求3所述的一种大麻根提取物及其制备方法，其特征在于，所述步骤(3)中所浸提溶剂选自C1-C4的醇类水溶液，优选甲醇、乙醇或其混合水溶液，浓度为40%～85%;原料与浸提溶剂的质体比选自1:2～1:6,优选1:3或1:4;温度控制在55-70℃。7.根据权利要求3所述的一种大麻根提取物及其制备方法，其特征在于，所述步骤(4)中离心分离的转速选自2000～5000转/分钟，优选2000～3500转/分钟。8.根据权利要求3所述的一种大麻根提取物及其制备方法，其特征在于，所述步骤(5)中正己烷加入比例为1:0.5～0.8,所述正丁醇的加入比例为1:2～3。9.根据权利要求3所述的一种大麻根提取物及其制备方法，其特征在于，所述步骤(6)中大孔树脂型号为XDA系列，所用流动相为梯度甲醇水溶液。10.根据权利要求3所述的一种大麻根提取物及其制备方法，其特征在于，所述步骤(8)中干燥温度为40～50℃,粉碎机滤网为60-100目。3一种大麻根提取物及其制备方法技术领域[0001]本发明属于生物医药技术领域，具体一种大麻根提取物及其制备方法。背景技术[0002]工业大麻(SteviarebaudianaBertoni)为大麻科大麻属一年生雌雄异株的草本植物，广泛分布于世界各地。世界上大麻属植物主要有野生大麻(CannabisruderalisJanisch)、印度大麻(CannabisindicaLam)和栽培大麻(CannabissativaL)3个种，在长期的生物进化过程中又产生了许多大麻变种和亚种。由于大麻中含有一种致幻成瘾的次生代谢产物一四氢大麻酚(tetrahydrocannabinol,THC),因而成为公众熟知的毒品原植物之一。为了方便监管和合理使用，国际上将大麻中THC含量<0.3%的大麻品种定义不具备毒品利用价值的工业大麻。目前世界上种植工业大麻的国家已达27个，培育出的符合THC含量<0.3%的工业大麻品种26个。[0003]工业大麻又称汉麻，汉麻全身都是宝主要有纺织、食用和药用三大功能。从大麻的根中分离得到的已知化合物已有数十种，含有大麻碱(cannabisativine),脱水大麻碱(anhyrocannabisativine),胆碱(choline),神经碱(neurine),无羁萜(friedelin),表无羁萜醇(epifriedelinol),葛缕酮(carvone),二氢葛缕酮(dihydrocarvone),β-谷甾醇(β-sitosterol)[4],大麻环醚萜酚(cannabiglendol),还含有多种脂肪酸及5α-麦角甾-3-酮，5α-豆甾-3-酮(5α-stigmastan-3-one),菜油甾醇(camβ-豆甾-22-烯-3-酮(5α-stigmast-22-en-3-one)[6],豆甾-4-烯-3-酮(stigmast-4-en-3-one),菜油甾-4-烯-3-酮(campest-4-en-3-one),豆甾-4,22-二烯-3-酮(stigmast-4,22-dien-3-one),豆甾-5-烯-3β-醇-7one),豆甾-5,22-烯-3β-醇-7-酮(stigmast-5,22-dien-3β-ol-7-one)等，它们在医学上具有祛瘀、止血、利尿等功效。目前汉麻根在药用上已经得到广泛应用，但实现工业化提取的并不多见。本发明采用常规提取法，对汉麻根中的有效物进行提取，以探寻汉麻根提取物的最适提取条件，目的在于研发一个适合工业化大规模生产的工艺，旨在为充分利用汉麻中的生物活性成分，实现汉麻资源的综合利用和效益最大化提供指导。发明内容[0004]为充分利用汉麻中的生物活性成分，探寻汉麻中大麻根提取物的可利用度，本发明提供了一种大麻根提取物及其制备方法，该制备方法能够简单、有效的从工业大麻根中获得大麻根提取物。[0006]优选的大麻根提取物中大麻碱、大麻萜醇和大麻黄酮的综合百分含量大于60%,四氢大麻酚的重量百分含量为未检出。[0007]该大麻根提取物的制备方法为：4(1)筛选和脱水：取新鲜工业大麻根洗净晾干，将晾干的工业大麻根放入剪切机中进行剪切，再将剪切后的工业大麻根进行脱水干燥，制备得工业大麻根粗品。[0008](2)粉碎：将干燥后的工业大麻根粗品粉碎，制成大麻根颗粒。[0009](3)浸提：将制得的大麻根颗粒倒入浸提罐中，加入浸提溶剂升温浸提三次。[0010](4)离心：将步骤(3)各次得到的浸提液进行离心分离，70～80℃浓缩回收即得初提液。[0011](5)萃取：向步骤(4)得到的初提液中加入正己烷，取水相液；再向水相液中加入正丁醇，合并正丁醇萃取液70～80℃浓缩即得正丁醇萃取物。[0012](6)纯化：将步骤(5)得到的正丁醇萃取物浓缩抽干，按比例加入一定量的甲醇水溶液，加热充分溶解后过滤；得到的过滤液经大孔树脂柱分离，即得大麻根纯化液。[0013](7)浓缩和干燥：将步骤(6)得到的大麻根纯化液70～80℃减压浓缩，烘干后粉碎得大麻根提取物成品。[0014]步骤(1)中脱水干燥的温度选自60～80℃,干燥后含水量控制在15%以下。[0015]步骤(2)中粉碎机滤网为30-50目。[0016]步骤(3)中浸提溶剂选自C1-C4的醇类水溶液，优选甲醇、乙醇或其混合水溶液，浓度为40%～85%;原料与浸提溶剂的质体比选自1:2～1:6,优选1:3或1:4;温度控制在55-70[0017]步骤(4)中离心分离的转速选自2000～5000转/分钟，优选2000～3500转/分钟。[0018]步骤(5)中正己烷加入比例为1:0.5～0.8,所述正丁醇的加入比例为1:2～3。[0019]步骤(6)中大孔树脂型号为XDA系列，所用流动相为梯度甲醇水溶液。[0020]步骤(8)中干燥温度为40～50℃,粉碎机滤网为60-100目。[0021]本发明方法的优点和技术效果：本发明在利用完工业大麻花叶后，又充分利用了工业大麻根，使得汉麻中的生物活性成分得到了充分利用，为实现汉麻资源的综合利用和效益最大化提供了指导。本发明工艺简单，所需设备成本低，投料量大，非常适合工业化大规模生产。具体实施方式[0022]为使本发明实现的技术手段、创作特征、达成目的与功效易于明白了解，下面结合具体实施方式，进一步阐述本发明。[0023]实施例1(1)筛选和脱水：取10kg新鲜工业大麻根洗净晾干，将晾干的工业大麻根放入剪切机中进行剪切，再将剪切后的工业大麻根放入烘箱中设置干燥温度为80℃,进行脱水干燥，制备得工业大麻根粗品，含水量控制在15%以下。[0024](2)粉碎：将干燥后的工业大麻根粗品投入40目滤网的粉碎机中，制成大麻根颗粒。[0025](3)浸提：将制得的大麻根颗粒倒入浸提罐中，加入75%甲醇水溶液升温浸提三次。甲醇加入量为大麻根颗粒的3倍，升温至60℃浸泡提取2h,得到浸提液。[0026](4)离心：将步骤(3)各次得到的浸提液以3500r/min的转速进行离心分离，回收浓缩即得初提液。5[0027](5)萃取：向步骤(4)得到的初提液中加入0.5倍的正己烷，充分摇匀静置，取水相液；再向水相液中加入2.5倍量正丁醇，充分摇匀静置，萃取3次，合并萃取液70～80℃浓缩即得正丁醇萃取物。[0028](6)纯化：将步骤(5)得到的正丁醇萃取物70～80℃浓缩抽干，按浓缩物量的5倍加水溶液洗脱分离，即得大麻根纯化液。[0029](7)浓缩和干燥：将步骤(6)得到的大麻根纯化液70～80℃浓缩抽干，得到的浓缩物放入烘箱，设置干燥温度45℃,真空抽干，烘干后用100目滤网粉碎，即得大麻根提取物成品360g。(1)筛选和脱水：取10kg新鲜工业大麻根洗净晾干，将晾干的工业大麻根放入剪切机中进行剪切，再将剪切后的工业大麻根放入烘箱中设置干燥温度为80℃,进行脱水干燥，制备得工业大麻根粗品，含水量控制在15%以下。[0031](2)粉碎：将干燥后的工业大麻根粗品投入40目滤网的粉碎机中，制成大麻根颗[0032](3)浸提：将制得的大麻根颗粒倒入浸提罐中，加入80%甲醇水溶液升温浸提三次。甲醇加入量为大麻根颗粒的3倍，升温至60℃浸泡提取2h,得到浸提液。[0033](4)离心：将步骤(3)各次得到的浸提液以3500r/min的转速进行离心分离，回收浓缩即得初提液。[0034](5)萃取：向步骤(4)得到的初提液中加入0.5倍的正己烷，充分摇匀静置，取水相液；再向水相液中加入2.5倍量正丁醇，充分摇匀静置，萃取3次，合并萃取液70～80℃浓缩即得正丁醇萃取物。[0035](6)纯化：将步骤(5)得到的正丁醇萃取物70～80℃浓缩抽干，按浓缩物量的5倍加水溶液洗脱分离，即得大麻根纯化液。[0036](7)浓缩和干燥：将步骤(6)得到的大麻根纯化液70～80℃浓缩抽干，得到的浓缩物放入烘箱，设置干燥温度45℃,真空抽干，烘干后用100目滤网粉碎，即得大麻根提取物成(1)筛选和脱水：取10kg新鲜工业大麻根洗净晾干，将晾干的工业大麻根放入剪切机中进行剪切，再将剪切后的工业大麻根放入烘箱中设置干燥温度为80℃,进行脱水干燥，制备得工业大麻根粗品，含水量控制在15%以下。[0038](2)粉碎：将干燥后的工业大麻根粗品投入40目滤网的粉碎机中，制成大麻根颗[0039](3)浸提：将制得的大麻根颗粒倒入浸提罐中，加入60%甲醇水溶液升温浸提三次。甲醇加入量为大麻根颗粒的3倍，升温至60℃浸泡提取2h,得到浸提液。[0040](4)离心：将步骤(3)各次得到的浸提液以3500r/min的转速进行离心分离，回收浓缩即得初提液。[0041](5)萃取：向步骤(4)得到的初提液中加入0.5倍的正己烷，充分摇匀静置，取水相6液；再向水相液中加入2.5倍量正丁醇，充分摇匀静置，萃取3次，合并萃取液70～80℃浓缩即得正丁醇萃取物。[0042](6)纯化：将步骤(5)得到的正丁醇萃取物70～80℃浓缩抽干，按浓缩物量的5倍加水溶液洗脱分离，即得大麻根纯化液。[0043](7)浓缩和干燥：将步骤(6)得到的大麻根纯化液70～80℃浓缩抽干，得到的浓缩物放入烘箱，设置干燥温度45℃,真空抽干，烘干后用100目滤网粉碎，即得大麻根提取物成品380g。(1)筛选和脱水：取10kg新鲜工业大麻根洗净晾干，将晾干的工业大麻根放入剪切机中进行剪切，再将剪切后的工业大麻根放入烘箱中设置干燥温度为80℃,进行脱水干燥，制备得工业大麻根粗品，含水量控制在15%以下。[0045](2)粉碎：将干燥后的工业大麻根粗品投入40目滤网的粉碎机中，制成大麻根颗[0046](3)浸提：将制得的大麻根颗粒倒入浸提罐中，加